| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-23页 |
| ·酿酒酵母醛酮类还原酶 Gre2 的研究背景 | 第11-14页 |
| ·酿酒酵母的背景知识简介 | 第11页 |
| ·醛酮类物质及其还原反应简介 | 第11-13页 |
| ·酿酒酵母的压力应答系统 | 第13页 |
| ·Gre2 是一类重要的醛酮类还原酶 | 第13-14页 |
| ·酿酒酵母中 Gre2 蛋白的研究进展 | 第14-18页 |
| ·在酿酒酵母中Gre2 蛋白发挥多种醛酮类还原酶的功能 | 第14页 |
| ·Gre2 蛋白质在体内发挥丙酮醛的解毒作用 | 第14页 |
| ·Gre2 通过发挥异戊醛还原酶的作用抑制酵母出丝 | 第14-15页 |
| ·Gre2 通过参与麦角固醇的合成 | 第15页 |
| ·Gre2 催化(S)-3-氯-1-苯基-1-丙醇的合成 | 第15-17页 |
| ·Gre2 参与（2S，5S）-2,5-己二醇的生物合成 | 第17-18页 |
| ·Gre2 拥有保守的催化三联体 | 第18页 |
| ·Gre2 属于SDR 家族的成员 | 第18页 |
| ·参与的其它工作的相关背景简介 | 第18-23页 |
| ·酿酒酵母中的其它靶标 | 第19-21页 |
| ·蓝藻的两个物种(Microcystis aeruginosa PCC 7806 和 Anabaena sp. PCC 7120)中的其它靶标 | 第21-23页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·常用菌株 | 第23页 |
| ·常用质粒 | 第23页 |
| ·常用酶类 | 第23页 |
| ·常用晶体学初筛条件 | 第23页 |
| ·常用小分子试剂 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-36页 |
| ·相关分子克隆方法 | 第24-28页 |
| ·目的蛋白的检测表达与获取 | 第28-32页 |
| ·目的蛋白晶体的筛选与优化 | 第32-33页 |
| ·数据收集与晶体结构解析 | 第33-34页 |
| ·实验中用到的其它方法 | 第34-36页 |
| 第三章 Gre2 蛋白研究的结果与讨论 | 第36-61页 |
| ·Gre2 的实验结果 | 第36-48页 |
| ·Gre2 的分子克隆与检测表达 | 第36-40页 |
| ·Gre2 重组蛋白的大量表达与纯化 | 第40-42页 |
| ·Gre2 的晶体初筛与优化 | 第42-46页 |
| ·Gre2 的晶体衍射数据的收集和数据处理 | 第46-48页 |
| ·Gre2 的晶体结构描述 | 第48-58页 |
| ·Gre2 的apo form 的晶体结构 | 第48-50页 |
| ·Gre2 与NADPH 复合物的晶体结构 | 第50-52页 |
| ·Gre2 apo form 结构与Gre2-NADPH Complex 结构的比较与分析 | 第52-53页 |
| ·Gre2 具有保守Ser-Tyr-Lys 催化三联体结构 | 第53-58页 |
| ·Gre2 的酶学活性体系及Km 值测定条件的初步摸索及分析 | 第58-61页 |
| ·Gre2 的酶学活性体系及Km 值测定条件的初步摸索 | 第58-60页 |
| ·Gre2 的酶学相关的分析 | 第60-61页 |
| 第四章 其它工作的结果与讨论 | 第61-71页 |
| ·酿酒酵母中其它蛋白的实验结果及分析 | 第61-64页 |
| ·Ydl124W 的实验结果与讨论 | 第61-63页 |
| ·Dph1 和Dph2 的实验结果与讨论 | 第63-64页 |
| ·蓝藻中其它蛋白的实验结果及分析 | 第64-71页 |
| ·蓝藻所选蛋白靶标的分子克隆、检测表达及其分析 | 第64-66页 |
| ·目的蛋白159028653 和all4018 的大量表达和纯化及结果分析 | 第66-69页 |
| ·目的蛋白159028653 和all4018 的晶体初筛及结果分析 | 第69页 |
| ·目的蛋白all4018 的蛋白酶解及结果分析 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录1 常规试剂配方 | 第76-78页 |
| 附录2 质粒小量抽提 | 第78-79页 |
| 附录3 酵母基因组的抽提步骤 | 第79-80页 |
| 附录4 细菌基因组的抽提步骤 | 第80-81页 |
| 附录5 感受态细胞的制作 | 第81-82页 |
| 附录6 引物设计遵从的一般原则 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
