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肉牛H-FABP基因分子特征及肌内脂肪沉积相关miRNAs鉴定

摘要第10-12页
Abstract第12-13页
第一章 文献综述第14-26页
    1.1 夏洛莱牛、辽育白牛与本地黄牛的差异第14-15页
    1.2 影响肌内脂肪沉积的相关基因第15-17页
        1.2.1 脂肪酸转位酶第15页
        1.2.2 过氧化氢酶体激活增殖受体基因第15页
        1.2.3 脂蛋白脂肪酶第15-16页
        1.2.4 脂肪细胞的决定和分化因子1第16页
        1.2.5 脂肪酸合成酶第16页
        1.2.6 固醇调节元件结合蛋白1第16页
        1.2.7 CCAAT增强子结合蛋白第16页
        1.2.8 肥胖基因第16-17页
        1.2.9 瘦素第17页
        1.2.10 激素敏感脂肪酶第17页
        1.2.11 黑素皮质素受体-4第17页
        1.2.12 脂肪酸结合蛋白(FABPs)第17页
    1.3 心肌脂肪酸结合蛋白(H-FABP)第17-19页
        1.3.1 H-FABP基因的分子特征及生理分布第17-18页
        1.3.2 H-FABP基因的特征第18页
        1.3.3 H-FABP基因的生物学功能第18-19页
    1.4 MiRNA的简介第19-24页
        1.4.1 MiRNA的特征第19-20页
        1.4.2 MiRNA的产生过程第20-21页
        1.4.3 MiRNA的研究进展第21-22页
        1.4.4 H-FABP基因与miRNA的相关研究进展第22-24页
    1.5 本研究的目的与意义第24-25页
    1.6 技术路线第25-26页
第二章 肉牛H-FABP基因克隆、分子特征鉴定第26-34页
    2.1 试验材料第26-27页
        2.1.1 肌肉组织样品第26页
        2.1.2 试验所需药品和试剂第26页
        2.1.3 主要仪器设备第26-27页
        2.1.4 主要试剂的配制第27页
    2.2 试验方法第27-30页
        2.2.1 技术路线第27页
        2.2.2 引物设计与合成第27-28页
        2.2.3 用天根组织试剂盒提取组织基因组的方法步骤第28-29页
        2.2.4 DNA浓度和纯度的检测第29页
        2.2.5 反应体系第29页
        2.2.6 序列鉴定第29-30页
        2.2.7 PCR反应条件的优化第30页
    2.3 结果与分析第30-32页
        2.3.1 牛肉组织中DNA样品的检测第30页
        2.3.2 最适退火温度第30页
        2.3.3 目的基因片段扩增与测序第30-31页
        2.3.4 测序波峰图第31-32页
        2.3.5 不同品种牛H-FABP测序序列同源性分析第32页
    2.4 讨论第32-33页
    2.5 小结第33-34页
第三章 肉牛H-FABP基因潜在肌内脂肪沉积miRNAs的预测和筛选第34-43页
    3.1 试验材料第34-35页
        3.1.1 测序所获得的序列第34-35页
        3.1.2 分析软件第35页
    3.2 试验方法第35-36页
        3.2.1 试验技术路线第35页
        3.2.2 软件分析第35-36页
    3.3 结果与分析第36-41页
        3.3.1 预测分析第36-38页
        3.3.2 筛选靶标miRNAs第38-39页
        3.3.3 特异miRNAs特征鉴定第39-41页
    3.4 讨论第41-42页
    3.5 小结第42-43页
第四章 肌内脂肪沉积特异miRNAs表达差异分析第43-56页
    4.1 试验材料第43-44页
        4.1.1 试验样本第43页
        4.1.2 试验所需药品和试剂第43页
        4.1.3 实时定量PCR试验主要仪器设备第43页
        4.1.4 主要试剂的配制第43-44页
    4.2 试验方法第44-49页
        4.2.1 技术路线第44页
        4.2.2 引物设计与合成第44-46页
        4.2.3 不同品种牛肌肉脂肪组织的总RNA抽提第46页
        4.2.4 Poly(A)加尾反应和反转录反应第46-47页
        4.2.5 MiRNA的荧光定量PCR第47-49页
    4.3 结果与分析第49-53页
        4.3.1 组织中RNA样品的检测第49-50页
        4.3.2 目的基因片段扩增第50页
        4.3.3 相对定量结果第50-53页
    4.4 讨论第53-55页
    4.5 小结第55-56页
第五章 结论第56-57页
参考文献第57-60页
附录第60-64页
中英文缩写对照表第64-65页
致谢第65-67页
攻读学位论文期间发表文章第67页

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