摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
1.1 夏洛莱牛、辽育白牛与本地黄牛的差异 | 第14-15页 |
1.2 影响肌内脂肪沉积的相关基因 | 第15-17页 |
1.2.1 脂肪酸转位酶 | 第15页 |
1.2.2 过氧化氢酶体激活增殖受体基因 | 第15页 |
1.2.3 脂蛋白脂肪酶 | 第15-16页 |
1.2.4 脂肪细胞的决定和分化因子1 | 第16页 |
1.2.5 脂肪酸合成酶 | 第16页 |
1.2.6 固醇调节元件结合蛋白1 | 第16页 |
1.2.7 CCAAT增强子结合蛋白 | 第16页 |
1.2.8 肥胖基因 | 第16-17页 |
1.2.9 瘦素 | 第17页 |
1.2.10 激素敏感脂肪酶 | 第17页 |
1.2.11 黑素皮质素受体-4 | 第17页 |
1.2.12 脂肪酸结合蛋白(FABPs) | 第17页 |
1.3 心肌脂肪酸结合蛋白(H-FABP) | 第17-19页 |
1.3.1 H-FABP基因的分子特征及生理分布 | 第17-18页 |
1.3.2 H-FABP基因的特征 | 第18页 |
1.3.3 H-FABP基因的生物学功能 | 第18-19页 |
1.4 MiRNA的简介 | 第19-24页 |
1.4.1 MiRNA的特征 | 第19-20页 |
1.4.2 MiRNA的产生过程 | 第20-21页 |
1.4.3 MiRNA的研究进展 | 第21-22页 |
1.4.4 H-FABP基因与miRNA的相关研究进展 | 第22-24页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
1.6 技术路线 | 第25-26页 |
第二章 肉牛H-FABP基因克隆、分子特征鉴定 | 第26-34页 |
2.1 试验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 肌肉组织样品 | 第26页 |
2.1.2 试验所需药品和试剂 | 第26页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第26-27页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第27页 |
2.2 试验方法 | 第27-30页 |
2.2.1 技术路线 | 第27页 |
2.2.2 引物设计与合成 | 第27-28页 |
2.2.3 用天根组织试剂盒提取组织基因组的方法步骤 | 第28-29页 |
2.2.4 DNA浓度和纯度的检测 | 第29页 |
2.2.5 反应体系 | 第29页 |
2.2.6 序列鉴定 | 第29-30页 |
2.2.7 PCR反应条件的优化 | 第30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-32页 |
2.3.1 牛肉组织中DNA样品的检测 | 第30页 |
2.3.2 最适退火温度 | 第30页 |
2.3.3 目的基因片段扩增与测序 | 第30-31页 |
2.3.4 测序波峰图 | 第31-32页 |
2.3.5 不同品种牛H-FABP测序序列同源性分析 | 第32页 |
2.4 讨论 | 第32-33页 |
2.5 小结 | 第33-34页 |
第三章 肉牛H-FABP基因潜在肌内脂肪沉积miRNAs的预测和筛选 | 第34-43页 |
3.1 试验材料 | 第34-35页 |
3.1.1 测序所获得的序列 | 第34-35页 |
3.1.2 分析软件 | 第35页 |
3.2 试验方法 | 第35-36页 |
3.2.1 试验技术路线 | 第35页 |
3.2.2 软件分析 | 第35-36页 |
3.3 结果与分析 | 第36-41页 |
3.3.1 预测分析 | 第36-38页 |
3.3.2 筛选靶标miRNAs | 第38-39页 |
3.3.3 特异miRNAs特征鉴定 | 第39-41页 |
3.4 讨论 | 第41-42页 |
3.5 小结 | 第42-43页 |
第四章 肌内脂肪沉积特异miRNAs表达差异分析 | 第43-56页 |
4.1 试验材料 | 第43-44页 |
4.1.1 试验样本 | 第43页 |
4.1.2 试验所需药品和试剂 | 第43页 |
4.1.3 实时定量PCR试验主要仪器设备 | 第43页 |
4.1.4 主要试剂的配制 | 第43-44页 |
4.2 试验方法 | 第44-49页 |
4.2.1 技术路线 | 第44页 |
4.2.2 引物设计与合成 | 第44-46页 |
4.2.3 不同品种牛肌肉脂肪组织的总RNA抽提 | 第46页 |
4.2.4 Poly(A)加尾反应和反转录反应 | 第46-47页 |
4.2.5 MiRNA的荧光定量PCR | 第47-49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-53页 |
4.3.1 组织中RNA样品的检测 | 第49-50页 |
4.3.2 目的基因片段扩增 | 第50页 |
4.3.3 相对定量结果 | 第50-53页 |
4.4 讨论 | 第53-55页 |
4.5 小结 | 第55-56页 |
第五章 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
附录 | 第60-64页 |
中英文缩写对照表 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
攻读学位论文期间发表文章 | 第67页 |