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防治脱氧雪腐镰刀烯醇毒素污染的脂肽类抗菌物质的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第1章 绪论第17-37页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第17页
    1.2 禾谷镰刀菌及其毒素第17-22页
        1.2.1 禾谷镰刀菌的特征第17-18页
        1.2.2 禾谷镰刀菌的致病性第18页
        1.2.3 禾谷镰刀菌的毒素第18-22页
    1.3 国内外粮食及制品中DON污染情况和防治第22-27页
        1.3.1 粮食中DON的污染情况第22-25页
        1.3.2 粮食DON毒素污染的防治第25-26页
        1.3.3 微生物防治DON毒素的污染第26-27页
    1.4 微生物的抗真菌作用第27-33页
        1.4.1 抗真菌活性第27-29页
        1.4.2 拮抗物质第29-33页
    1.5 微生物农药第33-35页
        1.5.1 微生物农药概述第33-34页
        1.5.2 研究现状与应用第34-35页
    1.6 本课题的研究内容和技术路线第35-37页
        1.6.1 主要研究内容第35-36页
        1.6.2 技术路线第36-37页
第2章 实验材料与方法第37-53页
    2.1 实验材料及仪器设备第37-39页
        2.1.1 实验试剂第37页
        2.1.2 实验仪器设备第37页
        2.1.3 微生物菌种第37-38页
        2.1.4 微生物培养基第38-39页
    2.2 禾谷镰刀菌拮抗细菌的筛选与鉴定第39-42页
        2.2.1 细菌的活化与培养第39页
        2.2.2 禾谷镰刀菌孢子液的制备第39页
        2.2.3 细菌对禾谷镰刀菌生长的抑制活性第39-40页
        2.2.4 细菌发酵液对禾谷镰刀菌生长的抑制活性第40页
        2.2.5 细菌发酵液对禾谷镰刀菌产DON毒素的抑制活性第40-41页
        2.2.6 拮抗细菌的种属鉴定第41-42页
    2.3 禾谷镰刀菌拮抗物质的稳定性第42-43页
        2.3.1 温度对拮抗物质的影响第42页
        2.3.2 pH对拮抗物质的影响第42-43页
        2.3.3 蛋白酶对拮抗物质的影响第43页
    2.4 禾谷镰刀菌拮抗物质基因的鉴定第43-45页
    2.5 禾谷镰刀菌拮抗物质的分离第45-46页
        2.5.1 硫酸铵分级沉淀第45页
        2.5.2 有机溶剂沉淀第45页
        2.5.3 有机溶剂萃取第45页
        2.5.4 盐酸沉淀第45-46页
    2.6 拮抗物质的分离方法优化与鉴定第46-48页
        2.6.1 细菌发酵液中色素的去除第46-47页
        2.6.2 盐酸沉淀提取pH的优化第47-48页
        2.6.3 质谱检测拮抗物质第48页
    2.7 脂肽类拮抗物质对禾谷镰刀菌的抑制机制第48-50页
        2.7.1 脂肽对禾谷镰刀菌生长的影响第48页
        2.7.2 脂肽对小麦中禾谷镰刀菌生长和产毒的影响第48-49页
        2.7.3 脂肽对孢子萌发和菌丝形态的影响第49页
        2.7.4 脂肽对禾谷镰刀菌细胞膜的影响第49页
        2.7.5 脂肽对DON毒素合成基因的影响第49-50页
    2.8 发酵培养基及发酵条件优化第50-53页
        2.8.1 碳源筛选实验第50-51页
        2.8.2 氮源筛选实验第51页
        2.8.3 碳氮源的添加量第51-52页
        2.8.4 培养温度筛选实验第52页
        2.8.5 发酵罐培养时间选择第52-53页
第3章 禾谷镰刀菌拮抗细菌的筛选与种属鉴定第53-68页
    3.1 引言第53页
    3.2 实验菌株对禾谷镰刀菌菌丝体生长的抑制活性第53-55页
    3.3 细菌发酵液对禾谷镰刀菌的抑制活性第55-57页
    3.4 细菌发酵液对禾谷镰刀菌DON毒素产生的抑制活性第57-60页
    3.5 拮抗细菌的种属鉴定第60-66页
        3.5.1 形态和生理生化鉴定第60-61页
        3.5.2 分子鉴定第61-66页
    3.6 本章小结第66-68页
第4章 禾谷镰刀菌拮抗物质的分离与鉴定第68-89页
    4.1 引言第68页
    4.2 拮抗物质的稳定性第68-71页
        4.2.1 温度稳定性第68-69页
        4.2.2 pH稳定性第69页
        4.2.3 蛋白酶稳定性第69-71页
    4.3 拮抗物质基因的鉴定第71-74页
    4.4 拮抗物质的分离第74-78页
        4.4.1 硫酸铵分级沉淀第74-75页
        4.4.2 有机溶剂沉淀第75-76页
        4.4.3 有机溶剂萃取第76-77页
        4.4.4 盐酸沉淀第77-78页
    4.5 拮抗物质分离方法的优化第78-84页
        4.5.1 大孔树脂对拮抗物质的初步纯化第78-83页
        4.5.2 不同pH对拮抗物质的沉淀效果第83-84页
    4.6 质谱检测拮抗物质第84-87页
    4.7 本章小结第87-89页
第5章 脂肽的生防机制与拮抗菌株的发酵优化第89-112页
    5.1 引言第89页
    5.2 脂肽粗提物对禾谷镰刀菌的抑制活性第89-101页
        5.2.1 对禾谷镰刀菌生长的影响第90-92页
        5.2.2 对小麦中禾谷镰刀菌的影响第92-96页
        5.2.3 对孢子萌发和菌丝形态的影响第96-100页
        5.2.4 对禾谷镰刀菌细胞膜的影响第100-101页
    5.3 脂肽粗提物对DON毒素合成基因的影响第101-102页
    5.4 发酵培养基的优化第102-108页
        5.4.1 碳源筛选第103-104页
        5.4.2 有机氮源筛选第104-105页
        5.4.3 无机氮源筛选第105-106页
        5.4.4 碳氮源的添加量第106-108页
    5.5 发酵培养条件的优化第108-110页
        5.5.1 培养温度第108-109页
        5.5.2 发酵罐培养时间第109-110页
    5.6 本章小结第110-112页
结论第112-114页
参考文献第114-129页
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果第129-131页
致谢第131-132页
个人简历第132页

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