| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 芒草细胞壁降解过程的多糖变化 | 第13-46页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 能源植物芒草的概况及应用 | 第13-14页 |
| 1.2 植物细胞壁的基本组成 | 第14-19页 |
| 1.2.1 纤维素 | 第15-16页 |
| 1.2.2 半纤维素 | 第16-17页 |
| 1.2.3 果胶 | 第17-18页 |
| 1.2.4 木质素 | 第18页 |
| 1.2.5 细胞壁各成分间的联系及相互作用 | 第18-19页 |
| 1.3 生物质预处理及酶解 | 第19-21页 |
| 1.3.1 碱预处理 | 第20页 |
| 1.3.2 酸预处理 | 第20-21页 |
| 1.3.3 生物质酶解 | 第21页 |
| 1.4 细胞壁成分免疫学研究法 | 第21-24页 |
| 1.4.1 糖组分析 | 第22-23页 |
| 1.4.2 免疫荧光检测 | 第23-24页 |
| 1.5 芒草茎秆的组织结构 | 第24-25页 |
| 1.6 本研究目的与意义 | 第25页 |
| 2 实验材料与方法 | 第25-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.2 实验主要仪器 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-31页 |
| 2.3.1 石蜡切片制法 | 第26-27页 |
| 2.3.2 免疫标记及显微镜观察 | 第27-28页 |
| 2.3.3 比色法测定己糖、戊糖及糖醛酸 | 第28-29页 |
| 2.3.4 半纤维素单糖含量测定 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-44页 |
| 3.1 碱预处理酶解免疫荧光检测 | 第31-34页 |
| 3.2 酸预处理酶解免疫荧光检测 | 第34-36页 |
| 3.3 直接酶解免疫荧光检测 | 第36-39页 |
| 3.4 酸碱预处理及直接酶解的戊糖、己糖、糖醛酸释放量 | 第39-41页 |
| 3.5 酸碱预处理酶解及直接酶解的单糖释放量 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 细胞壁多糖表位与免疫荧光检测 | 第44页 |
| 4.2 戊糖、己糖、糖醛酸测定与免疫荧光检测 | 第44-45页 |
| 4.3 展望 | 第45-46页 |
| 第二章 Nc PMO-2在植物中功能探索 | 第46-73页 |
| 1 前言 | 第46-53页 |
| 1.1 PMO的发现 | 第47页 |
| 1.2 PMO的氧化酶切机制 | 第47-48页 |
| 1.3 PMO蛋白的多样性 | 第48-50页 |
| 1.4 PMO的多样性及生物学功能 | 第50-51页 |
| 1.5 PMO底物多样性 | 第51-52页 |
| 1.6 本研究的目的与意义 | 第52-53页 |
| 2 材料与方法 | 第53-65页 |
| 2.1 实验材料 | 第53页 |
| 2.2 Nc PMO-2序列的获取 | 第53-54页 |
| 2.3 拟南芥和水稻超表达载体构建 | 第54-58页 |
| 2.3.1 含目的片段的pUC57及pD1301s与pUBI-ZH2空载体双酶切 | 第54页 |
| 2.3.2 酶切产物回收 | 第54-55页 |
| 2.3.3 目的片段连接载体pD1301s与p UBI-ZH2 | 第55-56页 |
| 2.3.4 菌落PCR检测阳性克隆 | 第56页 |
| 2.3.5 大肠杆菌感受态DH5α细胞的制备 | 第56-57页 |
| 2.3.6 连接产物转化DH5α感受态（热激法） | 第57页 |
| 2.3.7 大肠杆菌质粒提取 | 第57-58页 |
| 2.3.8 质粒双酶切检测 | 第58页 |
| 2.3.9 阳性质粒转化农杆菌菌株GV3101和EHA105 | 第58页 |
| 2.4 拟南芥转基因及阳性苗筛选 | 第58-59页 |
| 2.5 水稻组织培养 | 第59-61页 |
| 2.5.1 愈伤诱导 | 第59页 |
| 2.5.2 愈伤继代 | 第59-60页 |
| 2.5.3 预培养 | 第60页 |
| 2.5.4 愈伤与农杆菌共培养 | 第60页 |
| 2.5.5 选择培养 | 第60页 |
| 2.5.6 分化培养 | 第60页 |
| 2.5.7 生根培养 | 第60-61页 |
| 2.5.8 移栽 | 第61页 |
| 2.6 水稻及拟南芥种植 | 第61页 |
| 2.7 拟南芥及水稻叶片DNA提取 | 第61-62页 |
| 2.8 拟南芥及水稻叶片总RNA提取 | 第62-63页 |
| 2.9 反转录 | 第63页 |
| 2.10 植物细胞壁成分测定 | 第63-64页 |
| 2.11 乙酸-硝酸-水法测定晶体纤维素 | 第64-65页 |
| 2.12 水稻成熟期性状测定 | 第65页 |
| 2.13 酶解效率测定 | 第65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-71页 |
| 3.1 Nc PMO-2基因合成 | 第65-67页 |
| 3.2 Nc PMO-2在拟南芥和水稻中的超表达载体构建 | 第67页 |
| 3.3 拟南芥、水稻超表达转基因植株表达量测定 | 第67-68页 |
| 3.4 拟南芥、水稻超表达转基因植株表型鉴定 | 第68-69页 |
| 3.5 拟南芥、水稻超表达转基因植株细胞壁成分分析 | 第69-70页 |
| 3.6 拟南芥、水稻超表达转基因植株酶解产糖 | 第70-71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 4.1 PMO在高等植物细胞壁降解中可能发挥的作用 | 第71页 |
| 4.2 PMO与分蘖、结实率等表型的关系 | 第71-72页 |
| 4.3 植物细胞壁结构改良与生物能源利用 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 附录 | 第83-87页 |
| 附录A：标准曲线 | 第83-84页 |
| 附录B:合成基因及引物序列 | 第84-86页 |
| 附录C:个人简历 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
