摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第13-28页 |
1.1 再生医学的研究概况 | 第13-15页 |
1.1.1 再生医学与组织工程学的关系 | 第14-15页 |
1.1.2 再生医学与组织干细胞的关系 | 第15页 |
1.2 肝脏再生医学的研究概况 | 第15-22页 |
1.2.1 肝脏再生的证据 | 第16-17页 |
1.2.2 肝细胞的增殖能力 | 第17页 |
1.2.3 肝干细胞在肝再生医学的应用 | 第17-18页 |
1.2.4 肝脏再生的相关细胞因子 | 第18-20页 |
1.2.5 肝脏再生的机制 | 第20-21页 |
1.2.6 肝脏再生的模型 | 第21-22页 |
1.2.7 蛋白质组学在肝再生中的应用 | 第22页 |
1.3 KIT LIGAND 的研究概况 | 第22-27页 |
1.3.1 干细胞因子结构及其性质 | 第23-24页 |
1.3.2 干细胞因子的生物学活性 | 第24-26页 |
1.3.3 干细胞因子的应用 | 第26-27页 |
1.4 本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
第二章 肝损伤模型的建立 | 第28-32页 |
2.1 材料与方法 | 第28-29页 |
2.1.1 实验动物 | 第28页 |
2.1.2 实验材料和仪器 | 第28页 |
2.1.3 实验方法 | 第28-29页 |
2.2 实验结果 | 第29-32页 |
2.2.1 谷丙转氨酶水平的测定 | 第29页 |
2.2.2 肝脏组织病理学 | 第29-31页 |
2.2.3 肝脏外观变化 | 第31-32页 |
第三章 KIT LIGAND 基因的克隆和表达载体的构建 | 第32-44页 |
3.1 实验材料 | 第32-33页 |
3.1.1 实验仪器及设备 | 第32页 |
3.1.2 实验试剂 | 第32-33页 |
3.2 实验方法 | 第33-39页 |
3.2.1 Kit liagnd 基因芯片分析 | 第33页 |
3.2.2 Kit liagnd 基因克隆 | 第33页 |
3.2.3 大肠杆菌(E.coli) DH5α和BL21 感受态制备 | 第33-34页 |
3.2.4 感受态细胞的转化 | 第34-35页 |
3.2.5 试剂盒抽取质粒 | 第35-36页 |
3.2.6 基因序列的测定 | 第36页 |
3.2.7 大量制备高纯度的phCMV1 以及插入外源基因的phCMV1 重组质粒 | 第36-38页 |
3.2.8 高纯度质粒中内毒素的清除 | 第38页 |
3.2.9 内毒素含量的测定 | 第38-39页 |
3.2.10 高纯度质粒最终纯度和浓度的测定 | 第39页 |
3.3 实验结果 | 第39-44页 |
3.3.1 Kit liagnd 基因芯片分析 | 第39-40页 |
3.3.2 Kit liagnd 基因序列测定 | 第40-41页 |
3.3.3 高纯度质粒内毒素含量的测定 | 第41-42页 |
3.3.4 高纯度质粒最终纯度和浓度的测定 | 第42-44页 |
第四章 KIT LIGAND 在小鼠体内的表达和肝脏功能指标的测定 | 第44-57页 |
4.1 实验材料 | 第44-45页 |
4.1.1 实验仪器及设备 | 第44-45页 |
4.1.2 实验试剂 | 第45页 |
4.1.3 实验动物 | 第45页 |
4.2 实验方法 | 第45-50页 |
4.2.1 小鼠肝损伤动物模型 | 第45页 |
4.2.2 小鼠血液和肝脏样品采集 | 第45-46页 |
4.2.3 质粒肌肉电转染方法 | 第46-47页 |
4.2.4 组织包埋程序 | 第47页 |
4.2.5 组织石蜡切片的制作 | 第47页 |
4.2.6 常规苏木精?伊红(HE)染色步骤 | 第47-49页 |
4.2.7 血清中谷丙转氨酶(ALT)活力的测定 | 第49-50页 |
4.2.8 酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第50页 |
4.2.9 统计学处理 | 第50页 |
4.3 实验结果 | 第50-57页 |
4.3.1 血清中谷丙转氨酶(ALT)活力的测定 | 第50-52页 |
4.3.2 肝组织病理变化的观察 | 第52-56页 |
4.3.3 酶联免疫吸附实验(ELISA)结果 | 第56-57页 |
第五章 讨论 | 第57-65页 |
5.1 肝脏再生过程中功能基因的筛选 | 第57-58页 |
5.2 真核表达载体的选择 | 第58-60页 |
5.3 质粒内毒素对肝脏损伤修复的影响 | 第60-61页 |
5.4 KIT LIGAND 对肝脏损伤修复过程的影响 | 第61-63页 |
5.4.1 检验血清中谷丙转氨酶(ALT)活力 | 第61-62页 |
5.4.2 肝组织病理变化的观察 | 第62-63页 |
5.5 推测KIT LIGAND 基因的作用机制 | 第63-65页 |
第六章 结论与展望 | 第65-66页 |
6.1 研究结论 | 第65页 |
6.2 课题研究展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第79页 |