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细胞因子Kit ligand对肝脏损伤和再生的调控作用研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 前言第13-28页
    1.1 再生医学的研究概况第13-15页
        1.1.1 再生医学与组织工程学的关系第14-15页
        1.1.2 再生医学与组织干细胞的关系第15页
    1.2 肝脏再生医学的研究概况第15-22页
        1.2.1 肝脏再生的证据第16-17页
        1.2.2 肝细胞的增殖能力第17页
        1.2.3 肝干细胞在肝再生医学的应用第17-18页
        1.2.4 肝脏再生的相关细胞因子第18-20页
        1.2.5 肝脏再生的机制第20-21页
        1.2.6 肝脏再生的模型第21-22页
        1.2.7 蛋白质组学在肝再生中的应用第22页
    1.3 KIT LIGAND 的研究概况第22-27页
        1.3.1 干细胞因子结构及其性质第23-24页
        1.3.2 干细胞因子的生物学活性第24-26页
        1.3.3 干细胞因子的应用第26-27页
    1.4 本研究的目的与意义第27-28页
第二章 肝损伤模型的建立第28-32页
    2.1 材料与方法第28-29页
        2.1.1 实验动物第28页
        2.1.2 实验材料和仪器第28页
        2.1.3 实验方法第28-29页
    2.2 实验结果第29-32页
        2.2.1 谷丙转氨酶水平的测定第29页
        2.2.2 肝脏组织病理学第29-31页
        2.2.3 肝脏外观变化第31-32页
第三章 KIT LIGAND 基因的克隆和表达载体的构建第32-44页
    3.1 实验材料第32-33页
        3.1.1 实验仪器及设备第32页
        3.1.2 实验试剂第32-33页
    3.2 实验方法第33-39页
        3.2.1 Kit liagnd 基因芯片分析第33页
        3.2.2 Kit liagnd 基因克隆第33页
        3.2.3 大肠杆菌(E.coli) DH5α和BL21 感受态制备第33-34页
        3.2.4 感受态细胞的转化第34-35页
        3.2.5 试剂盒抽取质粒第35-36页
        3.2.6 基因序列的测定第36页
        3.2.7 大量制备高纯度的phCMV1 以及插入外源基因的phCMV1 重组质粒第36-38页
        3.2.8 高纯度质粒中内毒素的清除第38页
        3.2.9 内毒素含量的测定第38-39页
        3.2.10 高纯度质粒最终纯度和浓度的测定第39页
    3.3 实验结果第39-44页
        3.3.1 Kit liagnd 基因芯片分析第39-40页
        3.3.2 Kit liagnd 基因序列测定第40-41页
        3.3.3 高纯度质粒内毒素含量的测定第41-42页
        3.3.4 高纯度质粒最终纯度和浓度的测定第42-44页
第四章 KIT LIGAND 在小鼠体内的表达和肝脏功能指标的测定第44-57页
    4.1 实验材料第44-45页
        4.1.1 实验仪器及设备第44-45页
        4.1.2 实验试剂第45页
        4.1.3 实验动物第45页
    4.2 实验方法第45-50页
        4.2.1 小鼠肝损伤动物模型第45页
        4.2.2 小鼠血液和肝脏样品采集第45-46页
        4.2.3 质粒肌肉电转染方法第46-47页
        4.2.4 组织包埋程序第47页
        4.2.5 组织石蜡切片的制作第47页
        4.2.6 常规苏木精?伊红(HE)染色步骤第47-49页
        4.2.7 血清中谷丙转氨酶(ALT)活力的测定第49-50页
        4.2.8 酶联免疫吸附实验(ELISA)第50页
        4.2.9 统计学处理第50页
    4.3 实验结果第50-57页
        4.3.1 血清中谷丙转氨酶(ALT)活力的测定第50-52页
        4.3.2 肝组织病理变化的观察第52-56页
        4.3.3 酶联免疫吸附实验(ELISA)结果第56-57页
第五章 讨论第57-65页
    5.1 肝脏再生过程中功能基因的筛选第57-58页
    5.2 真核表达载体的选择第58-60页
    5.3 质粒内毒素对肝脏损伤修复的影响第60-61页
    5.4 KIT LIGAND 对肝脏损伤修复过程的影响第61-63页
        5.4.1 检验血清中谷丙转氨酶(ALT)活力第61-62页
        5.4.2 肝组织病理变化的观察第62-63页
    5.5 推测KIT LIGAND 基因的作用机制第63-65页
第六章 结论与展望第65-66页
    6.1 研究结论第65页
    6.2 课题研究展望第65-66页
参考文献第66-78页
致谢第78-79页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第79页

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