中文摘要 | 第3-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
缩略语表 | 第9-18页 |
1 绪论 | 第18-46页 |
1.1 引言 | 第18-19页 |
1.2 什么是精子获能与AR | 第19页 |
1.3 精子获能的研究方法 | 第19-20页 |
1.4 精子体外获能的影响因素 | 第20-24页 |
1.4.1 温度 | 第20页 |
1.4.2 pH和渗透压 | 第20页 |
1.4.3 精子体外获能方法 | 第20-21页 |
1.4.4 动物种类 | 第21-22页 |
1.4.5 精液来源 | 第22页 |
1.4.6 培养基成分 | 第22-24页 |
1.5 精子获能的评价 | 第24-26页 |
1.5.1 HAM | 第24-25页 |
1.5.2 AR | 第25页 |
1.5.3 SPA | 第25-26页 |
1.6 AR的诱导因子 | 第26-30页 |
1.6.1 P_4 | 第26-27页 |
1.6.2 GABA | 第27页 |
1.6.3 A23187 | 第27-28页 |
1.6.4 Val | 第28-29页 |
1.6.5 其他 | 第29-30页 |
1.7 AR评价方法 | 第30-32页 |
1.7.1 TEM法 | 第30-31页 |
1.7.2 相差显微镜检查法 | 第31页 |
1.7.3 TST法 | 第31页 |
1.7.4 CBB法 | 第31页 |
1.7.5 CTC法 | 第31-32页 |
1.7.6 Hoechst与特异植物凝集素结合法 | 第32页 |
1.7.7 顶体酶释放检测法 | 第32页 |
1.8 精子获能与AR中的生理学变化 | 第32-35页 |
1.8.1 精子获能期间胞内离子的变化 | 第32-33页 |
1.8.2 AR过程中胞内离子的变化 | 第33-35页 |
1.9 精子获能与AR中的形态学变化 | 第35-36页 |
1.10 卵母细胞体外成熟与体外受精 | 第36-46页 |
1.10.1 卵母细胞的成熟机理 | 第36-37页 |
1.10.2 卵母细胞的收集 | 第37-38页 |
1.10.3 卵母细胞体外成熟的影响因素 | 第38-42页 |
1.10.4 精子体外获能 | 第42页 |
1.10.5 体外受精与受精卵的体外培养 | 第42-46页 |
2 材料与方法 | 第46-59页 |
2.1 试验材料 | 第46-49页 |
2.1.1 精液来源 | 第46页 |
2.1.2 试验动物来源 | 第46页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第46-47页 |
2.1.4 主要试剂和药品 | 第47页 |
2.1.5 主要操作用液 | 第47-49页 |
2.2 精子体外获能 | 第49-55页 |
2.2.1 诱导精子体外获能的方法 | 第49-50页 |
2.2.2 诱导获能精子发生AR的方法 | 第50页 |
2.2.3 精子质量检测和获能水平的评价方法 | 第50-53页 |
2.2.4 实验设计 | 第53-55页 |
2.3 体外受精 | 第55-56页 |
2.3.1 体外受精程序 | 第55-56页 |
2.3.2 COEM的制备方法 | 第56页 |
2.3.3 实验设计 | 第56页 |
2.4 体外获能与AR过程中生理学变化 | 第56-58页 |
2.4.1 离子的检测方法 | 第56-58页 |
2.4.2 实验设计 | 第58页 |
2.5 体外获能与AR过程中形态学变化 | 第58-59页 |
2.5.1 电子显微镜检查样本的制备方法 | 第58页 |
2.5.2 精子的测量方法 | 第58页 |
2.5.3 实验设计 | 第58-59页 |
3 试验结果 | 第59-94页 |
3.1 马鹿精子体外获能培养体系的筛选 | 第59-79页 |
3.1.1 评价马鹿精子体外获能方法的筛选 | 第59-60页 |
3.1.2 诱导马鹿获能精子发生AR的方法 | 第60-67页 |
3.1.3 温度对马鹿精子体外获能的影响 | 第67-68页 |
3.1.4 培养方法对马鹿精子体外获能的影响 | 第68-69页 |
3.1.5 鲜精与冻精在马鹿精子体外获能中的差异 | 第69-70页 |
3.1.6 培养基中几种离子和能源物质浓度对马鹿精子体外获能的影响 | 第70-74页 |
3.1.7 BSA和血清对马鹿精子体外获能的影响 | 第74-75页 |
3.1.8 肝素对马鹿精子体外获能的影响 | 第75-77页 |
3.1.9 马鹿精子体外获能最佳培养体系 | 第77-79页 |
3.2 马鹿体外受精研究 | 第79页 |
3.2.1 血清对体外受精的影响 | 第79页 |
3.2.2 COEM对体外受精的影响 | 第79页 |
3.3 马鹿精子体外获能与AR过程中的生理学变化 | 第79-92页 |
3.3.1 Ca~(2+)变化 | 第80-82页 |
3.3.2 Mg~(2+)变化 | 第82-84页 |
3.3.3 Na~+变化 | 第84-86页 |
3.3.4 K~+变化 | 第86-88页 |
3.3.5 Cl~-变化 | 第88-90页 |
3.3.6 总P变化 | 第90-92页 |
3.4 马鹿精子体外获能与AR过程中的形态学变化 | 第92-94页 |
3.4.1 正常马鹿精子形态 | 第92页 |
3.4.2 马鹿精子获能前后的形态学变化 | 第92-93页 |
3.4.3 马鹿精子冷冻前后的形态学变化 | 第93-94页 |
4 分析与讨论 | 第94-106页 |
4.1 马鹿精子体外获能培养体系 | 第94-96页 |
4.1.1 温度 | 第94页 |
4.1.2 获能方法 | 第94页 |
4.1.3 鲜精与冻精 | 第94-95页 |
4.1.4 体外获能培养基 | 第95页 |
4.1.5 BSA与血清 | 第95-96页 |
4.1.6 肝素 | 第96页 |
4.2 马鹿精子体外获能评价体系 | 第96-100页 |
4.2.1 精子获能的评价 | 第96-98页 |
4.2.2 AR诱导因子 | 第98-100页 |
4.3 马鹿体外受精研究 | 第100-101页 |
4.3.1 血清对体外受精的影响 | 第100页 |
4.3.2 COEM对体外受精的影响 | 第100-101页 |
4.4 马鹿精子体外获能与AR过程中的生理学变化 | 第101-104页 |
4.4.1 Ca~(2+) | 第101-102页 |
4.4.2 Mg~(2+) | 第102页 |
4.4.3 Na~+ | 第102-103页 |
4.4.4 K~+ | 第103页 |
4.4.5 Cl~- | 第103页 |
4.4.6 P | 第103-104页 |
4.5 马鹿精子体外获能与AR过程中的形态学变化 | 第104-106页 |
4.5.1 马鹿精子形态结构特点与其机能的关系 | 第104页 |
4.5.2 马鹿精子体外获能后超微结构变化及其机制探讨 | 第104-106页 |
结论 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-123页 |
附图1 马鹿精子获能/AJR前后TST染色图片 | 第123-124页 |
附图2 马鹿体外受精图片 | 第124-125页 |
附图3 马鹿精子SPA图片 | 第125-126页 |
附图4 马鹿精子获能与冷冻前后超微结构 | 第126-130页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第130-131页 |
致谢 | 第131-132页 |