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马鹿精子体外获能与评价体系及其体外受精的研究

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-8页
缩略语表第9-18页
1 绪论第18-46页
    1.1 引言第18-19页
    1.2 什么是精子获能与AR第19页
    1.3 精子获能的研究方法第19-20页
    1.4 精子体外获能的影响因素第20-24页
        1.4.1 温度第20页
        1.4.2 pH和渗透压第20页
        1.4.3 精子体外获能方法第20-21页
        1.4.4 动物种类第21-22页
        1.4.5 精液来源第22页
        1.4.6 培养基成分第22-24页
    1.5 精子获能的评价第24-26页
        1.5.1 HAM第24-25页
        1.5.2 AR第25页
        1.5.3 SPA第25-26页
    1.6 AR的诱导因子第26-30页
        1.6.1 P_4第26-27页
        1.6.2 GABA第27页
        1.6.3 A23187第27-28页
        1.6.4 Val第28-29页
        1.6.5 其他第29-30页
    1.7 AR评价方法第30-32页
        1.7.1 TEM法第30-31页
        1.7.2 相差显微镜检查法第31页
        1.7.3 TST法第31页
        1.7.4 CBB法第31页
        1.7.5 CTC法第31-32页
        1.7.6 Hoechst与特异植物凝集素结合法第32页
        1.7.7 顶体酶释放检测法第32页
    1.8 精子获能与AR中的生理学变化第32-35页
        1.8.1 精子获能期间胞内离子的变化第32-33页
        1.8.2 AR过程中胞内离子的变化第33-35页
    1.9 精子获能与AR中的形态学变化第35-36页
    1.10 卵母细胞体外成熟与体外受精第36-46页
        1.10.1 卵母细胞的成熟机理第36-37页
        1.10.2 卵母细胞的收集第37-38页
        1.10.3 卵母细胞体外成熟的影响因素第38-42页
        1.10.4 精子体外获能第42页
        1.10.5 体外受精与受精卵的体外培养第42-46页
2 材料与方法第46-59页
    2.1 试验材料第46-49页
        2.1.1 精液来源第46页
        2.1.2 试验动物来源第46页
        2.1.3 主要仪器设备第46-47页
        2.1.4 主要试剂和药品第47页
        2.1.5 主要操作用液第47-49页
    2.2 精子体外获能第49-55页
        2.2.1 诱导精子体外获能的方法第49-50页
        2.2.2 诱导获能精子发生AR的方法第50页
        2.2.3 精子质量检测和获能水平的评价方法第50-53页
        2.2.4 实验设计第53-55页
    2.3 体外受精第55-56页
        2.3.1 体外受精程序第55-56页
        2.3.2 COEM的制备方法第56页
        2.3.3 实验设计第56页
    2.4 体外获能与AR过程中生理学变化第56-58页
        2.4.1 离子的检测方法第56-58页
        2.4.2 实验设计第58页
    2.5 体外获能与AR过程中形态学变化第58-59页
        2.5.1 电子显微镜检查样本的制备方法第58页
        2.5.2 精子的测量方法第58页
        2.5.3 实验设计第58-59页
3 试验结果第59-94页
    3.1 马鹿精子体外获能培养体系的筛选第59-79页
        3.1.1 评价马鹿精子体外获能方法的筛选第59-60页
        3.1.2 诱导马鹿获能精子发生AR的方法第60-67页
        3.1.3 温度对马鹿精子体外获能的影响第67-68页
        3.1.4 培养方法对马鹿精子体外获能的影响第68-69页
        3.1.5 鲜精与冻精在马鹿精子体外获能中的差异第69-70页
        3.1.6 培养基中几种离子和能源物质浓度对马鹿精子体外获能的影响第70-74页
        3.1.7 BSA和血清对马鹿精子体外获能的影响第74-75页
        3.1.8 肝素对马鹿精子体外获能的影响第75-77页
        3.1.9 马鹿精子体外获能最佳培养体系第77-79页
    3.2 马鹿体外受精研究第79页
        3.2.1 血清对体外受精的影响第79页
        3.2.2 COEM对体外受精的影响第79页
    3.3 马鹿精子体外获能与AR过程中的生理学变化第79-92页
        3.3.1 Ca~(2+)变化第80-82页
        3.3.2 Mg~(2+)变化第82-84页
        3.3.3 Na~+变化第84-86页
        3.3.4 K~+变化第86-88页
        3.3.5 Cl~-变化第88-90页
        3.3.6 总P变化第90-92页
    3.4 马鹿精子体外获能与AR过程中的形态学变化第92-94页
        3.4.1 正常马鹿精子形态第92页
        3.4.2 马鹿精子获能前后的形态学变化第92-93页
        3.4.3 马鹿精子冷冻前后的形态学变化第93-94页
4 分析与讨论第94-106页
    4.1 马鹿精子体外获能培养体系第94-96页
        4.1.1 温度第94页
        4.1.2 获能方法第94页
        4.1.3 鲜精与冻精第94-95页
        4.1.4 体外获能培养基第95页
        4.1.5 BSA与血清第95-96页
        4.1.6 肝素第96页
    4.2 马鹿精子体外获能评价体系第96-100页
        4.2.1 精子获能的评价第96-98页
        4.2.2 AR诱导因子第98-100页
    4.3 马鹿体外受精研究第100-101页
        4.3.1 血清对体外受精的影响第100页
        4.3.2 COEM对体外受精的影响第100-101页
    4.4 马鹿精子体外获能与AR过程中的生理学变化第101-104页
        4.4.1 Ca~(2+)第101-102页
        4.4.2 Mg~(2+)第102页
        4.4.3 Na~+第102-103页
        4.4.4 K~+第103页
        4.4.5 Cl~-第103页
        4.4.6 P第103-104页
    4.5 马鹿精子体外获能与AR过程中的形态学变化第104-106页
        4.5.1 马鹿精子形态结构特点与其机能的关系第104页
        4.5.2 马鹿精子体外获能后超微结构变化及其机制探讨第104-106页
结论第106-107页
参考文献第107-123页
附图1 马鹿精子获能/AJR前后TST染色图片第123-124页
附图2 马鹿体外受精图片第124-125页
附图3 马鹿精子SPA图片第125-126页
附图4 马鹿精子获能与冷冻前后超微结构第126-130页
攻读学位期间发表的学术论文第130-131页
致谢第131-132页

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