| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 核小体及核小体定位 | 第12-15页 |
| 1.1.1 核小体结构 | 第12-13页 |
| 1.1.2 核小体定位与基因表达调控 | 第13-14页 |
| 1.1.3 影响核小体定位的因素 | 第14-15页 |
| 1.2 酵母 | 第15-19页 |
| 1.2.1 酵母细胞壁组成及破壁提取基因组方法 | 第15-16页 |
| 1.2.2 酵母基因组组成 | 第16-17页 |
| 1.2.3 酵母 ARS | 第17页 |
| 1.2.4 酵母基因组标记检测 | 第17-18页 |
| 1.2.5 核小体定位对酵母 ARS 活性的影响 | 第18-19页 |
| 1.3 核小体体外组装及检测技术 | 第19-24页 |
| 1.3.1 组蛋白 | 第19-20页 |
| 1.3.2 核小体体外组装 | 第20-21页 |
| 1.3.3 核小体体外组装后的检测 | 第21-24页 |
| 2 实验材料与方法 | 第24-34页 |
| 2.1 酵母菌的培养及生长曲线测定 | 第24页 |
| 2.1.1 材料与方法 | 第24页 |
| 2.1.2 酵母生长曲线测量 | 第24页 |
| 2.2 酵母菌基因组的提取与检测 | 第24-26页 |
| 2.2.1 溶菌酶法 | 第24页 |
| 2.2.2 蜗牛酶过夜处理法 | 第24-25页 |
| 2.2.3 蜗牛酶反复冻融法 | 第25页 |
| 2.2.4 珠磨法 | 第25页 |
| 2.2.5 提取基因组的检测 | 第25-26页 |
| 2.3 酵母转化 | 第26-27页 |
| 2.3.1 材料与方法 | 第26页 |
| 2.3.2 质粒 p405 的提取 | 第26页 |
| 2.3.3 酵母感受态细胞制备 | 第26页 |
| 2.3.4 质粒转入酵母细胞 | 第26-27页 |
| 2.4 BrdU 标记酵母基因组 | 第27-28页 |
| 2.4.1 载玻片的预处理 | 第27页 |
| 2.4.2 提取标记基因组涂片检测 | 第27页 |
| 2.4.3 琼脂糖固定标记的酵母细胞涂片检测 | 第27-28页 |
| 2.5 酵母组蛋白提取 | 第28-30页 |
| 2.5.1 蛋白标准曲线绘制 | 第28页 |
| 2.5.2 酵母组蛋白提取 | 第28-29页 |
| 2.5.3 SDS-PAGE 检测 | 第29-30页 |
| 2.5.4 蛋白含量测定 | 第30页 |
| 2.6 核小体体外组装 | 第30-34页 |
| 2.6.1 体外组装体系建立 | 第30-31页 |
| 2.6.2 酵母 ARS304、305 体外形成核小体 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-45页 |
| 3.1 酵母菌生长曲线测定 | 第34页 |
| 3.2 酵母基因组的提取与检测 | 第34-37页 |
| 3.2.1 破壁效果比较 | 第34-35页 |
| 3.2.2 提取的基因组 DNA 的浓度和纯度 | 第35-36页 |
| 3.2.3 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第36-37页 |
| 3.3 BrdU 标记基因组检测酵母 ARS 复制活性 | 第37-38页 |
| 3.3.1 提取标记基因组涂片检测 | 第37-38页 |
| 3.3.2 琼脂糖固定标记的酵母细胞涂片检测 | 第38页 |
| 3.4 酵母组蛋白提取及检测 | 第38-41页 |
| 3.4.1 蛋白标准曲线 | 第38-39页 |
| 3.4.2 组蛋白浓度 | 第39页 |
| 3.4.3 SDS-PAGE 检测 | 第39-41页 |
| 3.5 核小体体外组装 | 第41-45页 |
| 3.5.1 采用 601 序列建立体外组装体系 | 第41-42页 |
| 3.5.2 ARS304、305 体外组装形成核小体的能力比较 | 第42-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 在学研究成果 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
