| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 缩略表 | 第12-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-35页 |
| 1.1 引言 | 第19-32页 |
| 1.1.1 研究的目的与意义 | 第19页 |
| 1.1.2 国内外研究现状及发展趋势 | 第19-32页 |
| 1.2 研究目标与主要研究内容 | 第32-34页 |
| 1.2.1 关键的科学问题与研究目标 | 第32页 |
| 1.2.2 主要研究内容 | 第32-34页 |
| 1.3 技术路线图 | 第34-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 2.1.1 植物材料及生长环境 | 第35页 |
| 2.1.2 实验载体及菌株 | 第35页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第35页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第35-36页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第36页 |
| 2.1.6 引物设计 | 第36-37页 |
| 2.2 实验方法 | 第37-46页 |
| 2.2.1 毛竹基因组DNA及总RNA的提取 | 第37-39页 |
| 2.2.2 反转录 | 第39页 |
| 2.2.3 ped-miR164b相关基因序列克隆 | 第39-44页 |
| 2.2.4 ped-miR164b介导靶基因的切割位点验证 | 第44-46页 |
| 2.3 生物信息学分析 | 第46-47页 |
| 2.4 半年生毛竹实生苗逆境胁迫及激素处理 | 第47页 |
| 2.5 定量分析 | 第47-48页 |
| 2.6 植物表达载体构建及转化 | 第48-52页 |
| 2.6.1 目的基因扩增 | 第48-49页 |
| 2.6.2 植物表达载体构建及检测 | 第49-50页 |
| 2.6.3 重组质粒转化农杆菌GV3101 | 第50页 |
| 2.6.4 转化模式植物拟南芥 | 第50-52页 |
| 2.6.5 转基因拟南芥PCR检测验证 | 第52页 |
| 2.7 转基因拟南芥功能验证 | 第52-54页 |
| 第三章 结果与分析 | 第54-81页 |
| 3.1 ped-mi R164相关基因的克隆 | 第54-58页 |
| 3.1.1 毛竹叶片基因组DNA的提取及总RNA的提取 | 第54-55页 |
| 3.1.2 ped-miR164b前体序列及其成熟序列克隆 | 第55-56页 |
| 3.1.3 ped-miR164b靶基因PeNAC1编码区扩增 | 第56-57页 |
| 3.1.4 ped-miR164b前体上游启动子序列扩增 | 第57页 |
| 3.1.5 RLM-5′RACE剪切位点的预测及验证 | 第57-58页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第58-62页 |
| 3.2.1 ped-miR164b前体及成熟序列分析 | 第58-59页 |
| 3.2.2 毛竹NAC转录因子家族及mi R164b作用位点分析 | 第59-62页 |
| 3.2.3 ped-miR164b前体上游序列调控元件分析 | 第62页 |
| 3.3 基因表达分析 | 第62-66页 |
| 3.3.1 组织特异性表达分析 | 第62-63页 |
| 3.3.2 胁迫及激素处理表达分析 | 第63-66页 |
| 3.4 基因异位表达及启动子活性分析 | 第66-81页 |
| 3.4.1 ped-miR164b基因植物表达载体构建及菌液PCR验证 | 第66-69页 |
| 3.4.2 PeNAC1正、反义植物表达载体构建及菌液PCR验证 | 第69-71页 |
| 3.4.3 转基因拟南芥PCR检测 | 第71-72页 |
| 3.4.4 转基因拟南芥植株表型分析 | 第72-75页 |
| 3.4.5 GUS组织化学染色及活性分析 | 第75-76页 |
| 3.4.6 转基因拟南芥植株抗逆性分析 | 第76-81页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第81-88页 |
| 4.1 结论 | 第81-82页 |
| 4.2 讨论 | 第82-86页 |
| 4.3 展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| 在读期间的学术研究 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
