| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-14页 |
| 1.1 球根植物休眠解除的机制 | 第10-11页 |
| 1.1.1 激素和碳水化合物对球根植物休眠解除的影响 | 第10页 |
| 1.1.2 不同基因对球根植物休眠解除的调控作用 | 第10-11页 |
| 1.2 ADP核糖基化因子对植物休眠解除的影响 | 第11-12页 |
| 1.2.1 ADP核糖基化因子的发现 | 第11页 |
| 1.2.2 ARF基因对植物休眠解除的调控作用 | 第11-12页 |
| 1.3 Arf GTPase对植物休眠解除过程中物质运输的影响 | 第12-13页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 2 细叶百合鳞茎休眠解除过程中淀粉和蔗糖酶活性分析 | 第14-20页 |
| 2.1 材料与方法 | 第14-16页 |
| 2.1.1 植物材料及处理方法 | 第14页 |
| 2.1.2 酶活性测定 | 第14-16页 |
| 2.1.3 酶活性计算 | 第16页 |
| 2.2 结果与分析 | 第16-18页 |
| 2.2.1 细叶百合内外层鳞片淀粉酶活性变化规律 | 第16-17页 |
| 2.2.2 细叶百合内外层鳞片蔗糖代谢相关酶活性变化规律 | 第17-18页 |
| 2.3 本章小结 | 第18-20页 |
| 3 细叶百合鳞茎休眠解除过程中ARF基因的表达 | 第20-27页 |
| 3.1 材料与方法 | 第20页 |
| 3.1.1 植物材料及处理方法 | 第20页 |
| 3.1.2 主要试验试剂和药品 | 第20页 |
| 3.2 试验方法 | 第20-23页 |
| 3.2.1 ARF家族基因功能注释 | 第20页 |
| 3.2.2 细叶百合RNA的提取 | 第20-21页 |
| 3.2.3 细叶百合cDNA的合成 | 第21-22页 |
| 3.2.4 细叶百合鳞茎休眠解除过程中ARF基因的表达分析 | 第22-23页 |
| 3.3 结果与分析 | 第23-26页 |
| 3.3.1 ARF家族基因功能注释 | 第23-24页 |
| 3.3.2 细叶百合鳞茎总RNA的提取 | 第24页 |
| 3.3.3 ARF基因在不同休眠时期的表达 | 第24-26页 |
| 3.4 本章小结 | 第26-27页 |
| 4 细叶百合LpAGD14基因的克隆及序列分析 | 第27-40页 |
| 4.1 材料与方法 | 第27页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第27页 |
| 4.1.2 中间载体及菌株 | 第27页 |
| 4.1.3 主要试剂和药品 | 第27页 |
| 4.2 试验方法 | 第27-31页 |
| 4.2.1 特异性引物设计及PCR扩增反应 | 第27-28页 |
| 4.2.2 PCR产物的回收 | 第28页 |
| 4.2.3 目的DNA片段连接pMD18-T载体 | 第28页 |
| 4.2.4 连接产物转化大肠杆菌 | 第28-29页 |
| 4.2.5 质粒的提取 | 第29页 |
| 4.2.6 中间表达载体的构建 | 第29页 |
| 4.2.7 植物表达载体的构建 | 第29-30页 |
| 4.2.8 LpAGD14蛋白亚细胞定位预测 | 第30页 |
| 4.2.9 pBI121-LpAGD14-GFP在洋葱表皮细胞中的瞬时表达 | 第30-31页 |
| 4.3 结果与分析 | 第31-39页 |
| 4.3.1 目的基因的PCR扩增 | 第31页 |
| 4.3.2 PCR扩增产物的回收 | 第31-32页 |
| 4.3.3 菌液PCR扩增鉴定 | 第32页 |
| 4.3.4 LpAGD14基因序列分析 | 第32-36页 |
| 4.3.5 LpAGD14基因的保守结构域分析 | 第36页 |
| 4.3.6 LpAGD14基因理化性质分析 | 第36页 |
| 4.3.7 中间表达载体的构建 | 第36-37页 |
| 4.3.8 植物表达载体pBI121-LpAGD14-GFP的构建 | 第37-38页 |
| 4.3.9 植物表达载体pBI121-LpAGD14-GFP的瞬时表达 | 第38-39页 |
| 4.4 本章小结 | 第39-40页 |
| 5 细叶百合LpAGD14基因转化拟南芥 | 第40-46页 |
| 5.1 试验材料 | 第40页 |
| 5.1.1 试验材料及菌株 | 第40页 |
| 5.1.2 主要试剂和仪器 | 第40页 |
| 5.1.3 培养基和试验试剂的配制 | 第40页 |
| 5.2 试验方法 | 第40-43页 |
| 5.2.1 植物表达载体pCXSN-LpAGD14的构建 | 第40-42页 |
| 5.2.2 植物表达载体转化农杆菌 | 第42页 |
| 5.2.3 pCXSN-LpAGD14转化拟南芥 | 第42-43页 |
| 5.2.4 转基因植株的鉴定 | 第43页 |
| 5.3 结果与分析 | 第43-45页 |
| 5.3.1 植物表达载体pCXSN-LpAGD14的构建 | 第43-44页 |
| 5.3.2 农杆菌介导转化拟南芥 | 第44-45页 |
| 5.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 6 讨论 | 第46-48页 |
| 6.1 淀粉及蔗糖代谢酶对百合鳞茎休眠解除的影响 | 第46页 |
| 6.2 ARF基因对百合鳞茎休眠解除的影响 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
