摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
符号说明 | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-19页 |
1.1 Annexins的结构与功能 | 第13页 |
1.1.1 Annexins的定义及结构 | 第13页 |
1.1.2 Annexins在动植物中的功能 | 第13页 |
1.2 拟南芥Annexins的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 拟南芥膜联蛋白同源进化关系分析 | 第13-14页 |
1.2.2 拟南芥膜联蛋白的研究动态 | 第14-15页 |
1.2.3 拟南芥ANN1的特殊功能 | 第15-16页 |
1.3 植物蛋白的亚细胞定位 | 第16-19页 |
1.3.1 目的蛋白亚细胞定位研究的意义及最常用的研究方法 | 第16-17页 |
1.3.2 拟南芥蛋白的亚细胞定位研究动态 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-29页 |
2.1 实验材料 | 第19-22页 |
2.1.1 相关拟南芥材料 | 第19页 |
2.1.2 主要实验器材 | 第19页 |
2.1.3 抗生素 | 第19-20页 |
2.1.4 质粒载体 | 第20-21页 |
2.1.5 培养基 | 第21页 |
2.1.6 工程菌和病原菌 | 第21页 |
2.1.7 酶和试剂 | 第21-22页 |
2.1.8 试剂盒 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-29页 |
2.2.1 载体构建 | 第22-25页 |
2.2.2 大肠杆菌和农杆菌感受态的制备 | 第25页 |
2.2.3 大肠杆菌和农杆菌的电击转化 | 第25-26页 |
2.2.4 本生烟瞬时表达操作步骤 | 第26页 |
2.2.5 拟南芥的培养与遗传转化 | 第26-27页 |
2.2.6 基因组DNA的提取 | 第27页 |
2.2.7 Trypan Blue染色步骤 | 第27-29页 |
第三章 结果与分析 | 第29-52页 |
3.1 用于亚细胞定位的双元表达载体的构建 | 第29-33页 |
3.1.1 p1300-eYFP的构建 | 第29-31页 |
3.1.2 p1300-Annexins-eYFP的构建 | 第31-33页 |
3.2 拟南芥膜联蛋白的亚细胞定位 | 第33-39页 |
3.2.1 膜联蛋白在本生烟瞬时表达系统中的定位 | 第33-37页 |
3.2.2 膜联蛋白在拟南芥的定位 | 第37-39页 |
3.3 过表达ANN4和ANN6后的亚细胞定位 | 第39-45页 |
3.3.1 ANN4和ANN6可能会延缓NLS在核里面聚集 | 第39-41页 |
3.3.2 ANN4和ANN6过表达载体的构建 | 第41-43页 |
3.3.3 过表达的ANN4和ANN6在本生烟和拟南芥中的定位 | 第43-45页 |
3.4 35s::ANN4-eYFP和35s::ANN6-eYFP的抗病性分析 | 第45-52页 |
3.4.1 35s::ANN4-eYFP和35s::ANN6-eYFP表型特征 | 第45-46页 |
3.4.2 35S::ANN4-eYFP和35S::ANN6-eYFP接菌后台盼蓝染色 | 第46-48页 |
3.4.3 35S::ANN4-eYFP和35S::ANN6-eYFP接菌24 h后孢子萌发情况的统计分析 | 第48-50页 |
3.4.4 35S::ANN4-eYFP和35S::ANN6-eYFP接菌3 d后菌丝生长情况的统计分析 | 第50-52页 |
第四章 讨论与结论 | 第52-56页 |
4.1 拟南芥膜联蛋白亚细胞定位的多样性暗示其功能多样性 | 第52-53页 |
4.1.1 拟南芥膜联蛋白亚细胞定位的特点 | 第52-53页 |
4.1.2 亚细胞定位的多样性与功能多样性 | 第53页 |
4.2 拟南芥膜联蛋白新的功能 | 第53-54页 |
4.2.1 拟南芥膜联蛋白参与细胞内吞作用 | 第53-54页 |
4.2.2 ANN4和ANN6对核定位信号的干扰作用 | 第54页 |
4.2.3 ANN4和ANN6具有抗病相关作用 | 第54页 |
4.3 展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
附录 | 第60-63页 |
附表1. 引物 | 第60-63页 |
致谢 | 第63页 |