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拟南芥ANNEXIN蛋白家族的亚细胞定位及ANN4和ANN6的过表达研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
符号说明第11-13页
第一章 文献综述第13-19页
    1.1 Annexins的结构与功能第13页
        1.1.1 Annexins的定义及结构第13页
        1.1.2 Annexins在动植物中的功能第13页
    1.2 拟南芥Annexins的研究进展第13-16页
        1.2.1 拟南芥膜联蛋白同源进化关系分析第13-14页
        1.2.2 拟南芥膜联蛋白的研究动态第14-15页
        1.2.3 拟南芥ANN1的特殊功能第15-16页
    1.3 植物蛋白的亚细胞定位第16-19页
        1.3.1 目的蛋白亚细胞定位研究的意义及最常用的研究方法第16-17页
        1.3.2 拟南芥蛋白的亚细胞定位研究动态第17-19页
第二章 材料与方法第19-29页
    2.1 实验材料第19-22页
        2.1.1 相关拟南芥材料第19页
        2.1.2 主要实验器材第19页
        2.1.3 抗生素第19-20页
        2.1.4 质粒载体第20-21页
        2.1.5 培养基第21页
        2.1.6 工程菌和病原菌第21页
        2.1.7 酶和试剂第21-22页
        2.1.8 试剂盒第22页
    2.2 实验方法第22-29页
        2.2.1 载体构建第22-25页
        2.2.2 大肠杆菌和农杆菌感受态的制备第25页
        2.2.3 大肠杆菌和农杆菌的电击转化第25-26页
        2.2.4 本生烟瞬时表达操作步骤第26页
        2.2.5 拟南芥的培养与遗传转化第26-27页
        2.2.6 基因组DNA的提取第27页
        2.2.7 Trypan Blue染色步骤第27-29页
第三章 结果与分析第29-52页
    3.1 用于亚细胞定位的双元表达载体的构建第29-33页
        3.1.1 p1300-eYFP的构建第29-31页
        3.1.2 p1300-Annexins-eYFP的构建第31-33页
    3.2 拟南芥膜联蛋白的亚细胞定位第33-39页
        3.2.1 膜联蛋白在本生烟瞬时表达系统中的定位第33-37页
        3.2.2 膜联蛋白在拟南芥的定位第37-39页
    3.3 过表达ANN4和ANN6后的亚细胞定位第39-45页
        3.3.1 ANN4和ANN6可能会延缓NLS在核里面聚集第39-41页
        3.3.2 ANN4和ANN6过表达载体的构建第41-43页
        3.3.3 过表达的ANN4和ANN6在本生烟和拟南芥中的定位第43-45页
    3.4 35s::ANN4-eYFP和35s::ANN6-eYFP的抗病性分析第45-52页
        3.4.1 35s::ANN4-eYFP和35s::ANN6-eYFP表型特征第45-46页
        3.4.2 35S::ANN4-eYFP和35S::ANN6-eYFP接菌后台盼蓝染色第46-48页
        3.4.3 35S::ANN4-eYFP和35S::ANN6-eYFP接菌24 h后孢子萌发情况的统计分析第48-50页
        3.4.4 35S::ANN4-eYFP和35S::ANN6-eYFP接菌3 d后菌丝生长情况的统计分析第50-52页
第四章 讨论与结论第52-56页
    4.1 拟南芥膜联蛋白亚细胞定位的多样性暗示其功能多样性第52-53页
        4.1.1 拟南芥膜联蛋白亚细胞定位的特点第52-53页
        4.1.2 亚细胞定位的多样性与功能多样性第53页
    4.2 拟南芥膜联蛋白新的功能第53-54页
        4.2.1 拟南芥膜联蛋白参与细胞内吞作用第53-54页
        4.2.2 ANN4和ANN6对核定位信号的干扰作用第54页
        4.2.3 ANN4和ANN6具有抗病相关作用第54页
    4.3 展望第54-56页
参考文献第56-60页
附录第60-63页
    附表1. 引物第60-63页
致谢第63页

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