摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 羊口疮研究进展及展望 | 第12-20页 |
·前言 | 第12页 |
·病原学和分类学地位 | 第12-13页 |
·基因组学 | 第13页 |
·流行病学特征 | 第13-14页 |
·临床症状 | 第14-15页 |
·抗病毒机制和免疫逃避 | 第15-16页 |
·诊断方法 | 第16-18页 |
·免疫电镜分析 | 第17页 |
·组织病理学 | 第17页 |
·细胞分离培养 | 第17页 |
·病毒中和试验 | 第17页 |
·ELISA | 第17页 |
·免疫印迹 | 第17-18页 |
·PCR | 第18页 |
·实时定量PCR | 第18页 |
·限制性片段长度多态性分析 | 第18页 |
·总结 | 第18-20页 |
第二章 羊口疮病毒甘肃株的分离与鉴定 | 第20-27页 |
·材料 | 第20-21页 |
·病料来源 | 第20页 |
·细胞系与菌株 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·培养基与溶液 | 第20-21页 |
·主要仪器与设备 | 第21页 |
·方法 | 第21-22页 |
·病毒分离 | 第21页 |
·病毒的鉴定 | 第21-22页 |
·羊口疮病毒B2L 基因序列分析与进化树的绘制 | 第22页 |
·结果与分析 | 第22-25页 |
·临床症状 | 第22页 |
·病毒的分离培养结果 | 第22-23页 |
·PCR 鉴定 | 第23-24页 |
·羊口疮病毒B2L 基因重组质粒的构建 | 第24页 |
·羊口疮病毒B2L 基因序列分析与系统进化树的构建 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-27页 |
第三章 羊口疮病毒B2L 基因的表达及蛋白纯化 | 第27-37页 |
·材料 | 第27-28页 |
·病毒 | 第27页 |
·细胞与菌株 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·培养基与溶液 | 第27-28页 |
·主要仪器与设备 | 第28页 |
·方法 | 第28-30页 |
·Rosetta(DE3)plyS 感受态细胞的制备 | 第28页 |
·B2L 基因原核表达载体的构建 | 第28-29页 |
·重组B2L 蛋白基因在大肠杆菌中的诱导表达及表达条件的优化 | 第29页 |
·B2L 重组蛋白表达产物的纯化 | 第29-30页 |
·纯化的B2L 重组蛋白分析 | 第30页 |
·B2L 蛋白多级结构预测分析 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-36页 |
·B2L 基因原核表达载体的构建及鉴定 | 第30-31页 |
·B2L 重组蛋白的诱导表达及其表达条件优化 | 第31-33页 |
·B2L 重组蛋白的纯化和定量 | 第33-35页 |
·B2L 重组蛋白的Western-blotting 分析 | 第35页 |
·B2L 蛋白结构预测与分析 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第四章 羊口疮ELISA 检测方法的建立 | 第37-42页 |
·材料 | 第37-38页 |
·抗原、阳性血清及阴性血清 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·溶液 | 第37页 |
·主要仪器与设备 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-39页 |
·间接ELISA 方法的操作程序 | 第38页 |
·间接ELISA 方法反应条件的优化 | 第38-39页 |
·特异性试验 | 第39页 |
·敏感性试验 | 第39页 |
·判定标准的确定 | 第39页 |
·重复性试验 | 第39页 |
·结果与分析 | 第39-41页 |
·间接ELISA 最佳工作条件的确定 | 第39-40页 |
·特异性试验 | 第40页 |
·敏感性试验 | 第40-41页 |
·重复性试验 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
第五章 全文结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简历 | 第51页 |