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羊口疮病毒的分离鉴定及其ELISA检测方法的建立

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 羊口疮研究进展及展望第12-20页
   ·前言第12页
   ·病原学和分类学地位第12-13页
   ·基因组学第13页
   ·流行病学特征第13-14页
   ·临床症状第14-15页
   ·抗病毒机制和免疫逃避第15-16页
   ·诊断方法第16-18页
     ·免疫电镜分析第17页
     ·组织病理学第17页
     ·细胞分离培养第17页
     ·病毒中和试验第17页
     ·ELISA第17页
     ·免疫印迹第17-18页
     ·PCR第18页
     ·实时定量PCR第18页
     ·限制性片段长度多态性分析第18页
   ·总结第18-20页
第二章 羊口疮病毒甘肃株的分离与鉴定第20-27页
   ·材料第20-21页
     ·病料来源第20页
     ·细胞系与菌株第20页
     ·主要试剂第20页
     ·培养基与溶液第20-21页
     ·主要仪器与设备第21页
   ·方法第21-22页
     ·病毒分离第21页
     ·病毒的鉴定第21-22页
     ·羊口疮病毒B2L 基因序列分析与进化树的绘制第22页
   ·结果与分析第22-25页
     ·临床症状第22页
     ·病毒的分离培养结果第22-23页
     ·PCR 鉴定第23-24页
     ·羊口疮病毒B2L 基因重组质粒的构建第24页
     ·羊口疮病毒B2L 基因序列分析与系统进化树的构建第24-25页
   ·讨论第25-27页
第三章 羊口疮病毒B2L 基因的表达及蛋白纯化第27-37页
   ·材料第27-28页
     ·病毒第27页
     ·细胞与菌株第27页
     ·主要试剂第27页
     ·培养基与溶液第27-28页
     ·主要仪器与设备第28页
   ·方法第28-30页
     ·Rosetta(DE3)plyS 感受态细胞的制备第28页
     ·B2L 基因原核表达载体的构建第28-29页
     ·重组B2L 蛋白基因在大肠杆菌中的诱导表达及表达条件的优化第29页
     ·B2L 重组蛋白表达产物的纯化第29-30页
     ·纯化的B2L 重组蛋白分析第30页
     ·B2L 蛋白多级结构预测分析第30页
   ·结果与分析第30-36页
     ·B2L 基因原核表达载体的构建及鉴定第30-31页
     ·B2L 重组蛋白的诱导表达及其表达条件优化第31-33页
     ·B2L 重组蛋白的纯化和定量第33-35页
     ·B2L 重组蛋白的Western-blotting 分析第35页
     ·B2L 蛋白结构预测与分析第35-36页
   ·讨论第36-37页
第四章 羊口疮ELISA 检测方法的建立第37-42页
   ·材料第37-38页
     ·抗原、阳性血清及阴性血清第37页
     ·主要试剂第37页
     ·溶液第37页
     ·主要仪器与设备第37-38页
   ·方法第38-39页
     ·间接ELISA 方法的操作程序第38页
     ·间接ELISA 方法反应条件的优化第38-39页
     ·特异性试验第39页
     ·敏感性试验第39页
     ·判定标准的确定第39页
     ·重复性试验第39页
   ·结果与分析第39-41页
     ·间接ELISA 最佳工作条件的确定第39-40页
     ·特异性试验第40页
     ·敏感性试验第40-41页
     ·重复性试验第41页
   ·讨论第41-42页
第五章 全文结论第42-43页
参考文献第43-50页
致谢第50-51页
作者简历第51页

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