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西方蜜蜂细胞色素P450单加氧酶特性初步研究

摘要第1-7页
Abstract第7-15页
第一章 引言第15-22页
   ·细胞色素P450 基本概况第15-17页
     ·发现与组成第15页
     ·功能第15页
     ·作用机制第15-16页
     ·分布特性第16页
     ·主要特征第16-17页
   ·多功能氧化酶(MFO)研究现状第17-20页
     ·核心酶系细胞色素P450 的特性研究第17页
     ·细胞色素P450 诱导作用机制第17页
     ·细胞色素P450 与抗药性第17-18页
     ·增效剂抑制MFO 与害虫抗药性的改变第18页
     ·交互抗性第18-19页
     ·CytP450 在植物中以及与昆虫相互作用中的研究第19页
     ·CytP450 的测定方法第19页
     ·CytP450 基因家族的研究第19-20页
   ·蜜蜂多功能氧化酶(MFO)研究现状第20-21页
   ·课题研究目标及意义第21-22页
第二章 测定意大利蜜蜂幼虫细胞色素P450О-脱乙基活性最佳反应体系的建立第22-29页
   ·材料与方法第22-24页
     ·实验材料第22页
     ·实验方法第22-24页
   ·结果第24-27页
     ·底物浓度和辅酶NADPH 浓度的确定第24页
     ·细胞色素P450 的О-脱乙基活性第24-25页
     ·正交试验结果极差分析第25-26页
     ·正交试验结果方差分析第26-27页
   ·讨论第27-29页
第三章 意大利蜜蜂CYTP450О-脱乙基活性的组织分布、龄期及季节变化规律研究第29-35页
   ·材料与方法第29页
     ·实验材料第29页
     ·实验方法第29页
   ·结果第29-33页
     ·意大利蜜蜂成蜂不同组织CytP450О-脱乙基活性分布规律第29-30页
     ·意大利蜜蜂不同龄期CytP450О-脱乙基活性变化规律第30-31页
     ·意大利蜜蜂六龄封盖幼虫不同月份CytP450О-脱乙基活性变化规律第31-32页
     ·不同蜂种六龄封盖幼虫CytP450 活性变化规律第32-33页
   ·讨论第33-35页
     ·意大利蜜蜂成蜂不同组织CytP450О-脱乙基活性分布规律第33页
     ·意大利蜜蜂不同龄期CytP450О-脱乙基活性变化规律第33-34页
     ·不同月份、不同蜂种六龄封盖幼虫CytP450О-脱乙基活性变化规律第34-35页
第四章 药剂处理对意大利蜜蜂成蜂CYTP450 活性的影响第35-41页
   ·材料与方法第35-36页
     ·实验材料第35-36页
     ·实验方法第36页
   ·结果第36-38页
     ·四种药剂LC_(50) 的测定第36-37页
     ·用四种药剂LC_(50) 处理后蜜蜂CytP450О-脱乙基活性变化的测定第37-38页
   ·讨论第38-41页
第五章 意大利蜜蜂CYP6AQ1CDNA 基因克隆第41-64页
   ·蜜蜂细胞色素P450 基因片段的克隆第41-49页
     ·试验材料第41-42页
     ·蜜蜂细胞色素P450cDNA 第一链的合成第42-43页
     ·蜜蜂细胞色素P450 基因片段的扩增第43-44页
     ·目的片段的克隆与测序第44-49页
   ·蜜蜂细胞色素P450 CDNA3′端序列克隆第49-53页
     ·3′RNA 反转录第49页
     ·引物设计第49-50页
     ·PCR 扩增反应第50-52页
     ·P450 cDNA 3′端序列分析第52-53页
   ·蜜蜂细胞色素P450 CDNA 5′端序列克隆第53-58页
     ·5′RNA 反转录第53-54页
     ·引物设计第54页
     ·PCR 扩增反应第54-55页
     ·P450 cDNA 5′端序列分析第55-58页
   ·蜜蜂细胞色素P450 CDNA 全长克隆第58-63页
     ·引物设计第58页
     ·PCR 扩增反应第58页
     ·全长序列分析第58-62页
     ·CYP6AQ1 分子进化树的构建第62-63页
   ·讨论第63-64页
第六章 全文总结第64-66页
 1. 对细胞色素 P450 研究进展进行了概述第64页
 2. 建立了适合蜜蜂细胞色素 P450 活性测定的最佳反应体系第64页
 3. 对蜜蜂细胞色素 P450 的组织分布特性及其在不同月份、不同龄期及在不同蜂种间 的活性差异进行了研究第64页
 4. 研究了农药对蜜蜂细胞色素 P450 活性的影响第64页
 5. 克隆了蜜蜂细胞色素 P450 基因全长第64-65页
 6. 对细胞色素 P450 序列进行了系统进化分析第65页
 7. 前景展望第65-66页
参考文献第66-73页
致谢第73-74页
作者简历第74页

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