小麦UDP-葡萄糖基转移酶基因Ta-UGT3的表达载体构建和转化小麦研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-23页 |
| 一 小麦抗赤霉病研究进展 | 第11-18页 |
| 1 小麦赤霉病 | 第11-14页 |
| ·小麦赤霉病的发生及危害 | 第11-12页 |
| ·禾谷镰刀菌及其毒素 | 第12页 |
| ·脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON) | 第12-14页 |
| 2 小麦抗赤霉病研究 | 第14-18页 |
| ·小麦抗赤霉病类型及其遗传机制 | 第14-15页 |
| ·小麦赤霉病抗性相关QTL的分子标记 | 第15-17页 |
| ·小麦抗镰刀菌毒素积累的自然机制 | 第17-18页 |
| 二 尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶基因Ta-UGT3 | 第18-20页 |
| 1 尿苷二磷酸葡萄糖基转移酶 | 第18-20页 |
| 2 Ta-UGT3基因的克隆 | 第20页 |
| 三 抗赤霉病相关基因的转化研究 | 第20-21页 |
| 四 本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
| 第二部分 研究报告 | 第23-45页 |
| 一 材料与方法 | 第23-33页 |
| 1. 试验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株及表达载体 | 第23-24页 |
| ·仪器设备 | 第24页 |
| ·生化试剂 | 第24页 |
| 2 试验方法 | 第24-33页 |
| ·受体材料准备 | 第24-25页 |
| ·培养基成份 | 第25页 |
| ·质粒载体的转化及构建 | 第25-28页 |
| ·电击感受态细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·质粒DNA的电击转化 | 第27页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第27页 |
| ·转化载体构建 | 第27-28页 |
| ·微弹制备及基因枪轰击 | 第28-29页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第28页 |
| ·微弹制备 | 第28-29页 |
| ·轰击转化 | 第29页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选及植株再生 | 第29页 |
| ·转基因植株根部GUS染色鉴定 | 第29-30页 |
| ·试剂及其配制 | 第29页 |
| ·染色 | 第29-30页 |
| ·转基因植株的分子鉴定 | 第30-32页 |
| ·微量法提取再生植株的基因组DNA | 第30-31页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第31-32页 |
| ·转基因植株赤霉病抗性鉴定 | 第32-33页 |
| ·主要农艺性状调查 | 第33页 |
| 二 结果与分析 | 第33-43页 |
| 1 表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 2 Ta-UGT3基因的遗传转化 | 第34页 |
| 3 T_0代转基因植株的GUS染色检测 | 第34-35页 |
| 4 T_0代转基因植株的PCR检测 | 第35-36页 |
| 5 T_1代转基因植株的PCR检测 | 第36-37页 |
| 6 T_1代转基因植株的赤霉病抗性鉴定 | 第37-40页 |
| 7 转基因植株农艺相关性状分析 | 第40-43页 |
| 三 讨论 | 第43-45页 |
| 全文结论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
