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淡色库蚊溴氰菊酯抗性基因XN-P450的克隆、分析及CYP6F1的表达

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-24页
   ·蚊虫防治和杀虫剂抗性第11-13页
   ·昆虫的抗药性机理第13-17页
     ·代谢抗性第13-15页
       ·细胞色素 P450 单加氧酶第14页
       ·非专一性酯酶第14-15页
       ·谷胱甘肽-S-转移酶第15页
     ·靶标抗性第15-16页
       ·乙酰胆碱酯酶第15页
       ·钠离子通道第15-16页
       ·γ-氨基丁酸受体氯离子通道第16页
     ·抗药性的遗传研究第16-17页
   ·抗性基因研究技术第17-18页
   ·淡色库蚊杀虫剂抗性相关基因研究现状第18-22页
     ·我国近年对淡色库蚊抗性的监测第18-19页
     ·淡色库蚊抗性基因研究状况第19-22页
       ·细胞色素 P450 家族的研究第19-20页
       ·钠离子通道基因的研究第20页
       ·丝氨酸蛋白酶基因家族的研究第20-21页
       ·视蛋白基因的研究第21页
       ·跨膜蛋白基因的研究第21-22页
       ·蚊核糖体蛋白基因的研究第22页
   ·研究内容和意义第22-24页
第二章 不同方法提取淡色库蚊总 RNA 的定量比较分析第24-34页
   ·材料与方法第24-28页
     ·总 RNA 的提取第25-26页
     ·总 RNA 核酸浓度检测与电泳检测第26页
     ·总 RNA 的纯化第26-27页
     ·反转录及其产物检测第27页
     ·实时荧光定量 PCR(基于标准曲线的绝对定量)第27-28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·五种方法获得总 RNA 的纯度、产量及电泳检测第28-29页
     ·总 RNA 经 DnaseI 纯化的结果第29-30页
     ·五种方法方法耗时比较第30页
     ·反转录及其 PCR 产物电泳结果分析第30-31页
     ·五种方法所提总 RNA 定量分析第31页
   ·讨论第31-34页
第三章 淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关基因 XN-P450 cDNA 的克隆与生物信息学分析第34-45页
   ·材料与方法第34-37页
     ·淡色库蚊抗性与敏感品系蚊虫的总 RNA 的提取第34页
     ·cDNA 第一链的合成第34-35页
       ·3’-RACE-Ready- cDNA 的合成第34-35页
       ·5’-RACE-Ready-cDNA 的合成第35页
     ·EST 的引物验证及结果测序第35页
     ·淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关基因的 3’、5’-RACE 扩增、检测第35-36页
       ·3’-RACE PCR第35-36页
       ·5’-RACE PCR第36页
     ·基因测序第36页
       ·RACE 产物的纯化第36页
       ·克隆第36页
       ·阳性克隆检测第36页
       ·测序结果的比对分析第36页
     ·全长 cDNA 的扩增第36页
     ·生物信息学分析第36-37页
     ·定量分析第37页
   ·实验结果与分析第37-43页
     ·抗性与敏感品系库蚊的总 RNA 提取第37-38页
     ·cDNA 第一链的合成第38页
     ·EST 引物验证第38页
     ·3’、5’- RACE 扩增及测序第38页
     ·全长 cDNA 的扩增第38-40页
     ·全长基因的生物信息学分析第40-43页
     ·定量分析该基因在两种品系蚊虫中的差异表达第43页
   ·讨论第43-45页
第四章 淡色库蚊抗性基因 CYP6F1 的时序性表达第45-50页
   ·材料与方法第45-46页
     ·不同发育时期淡色库蚊总 RNA 的提取第45-46页
     ·总 RNA 的纯化、反转录第46页
     ·实时荧光定量 PCR(相对定量)第46页
   ·结果及分析第46-48页
     ·不同发育时期库蚊总 RNA 提取的浓度和纯度第46页
     ·总 RNA 的纯化及反转录第46-47页
     ·定量结果第47-48页
   ·讨论第48-50页
第五章 结论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
作者简介第58页

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