摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
·蚊虫防治和杀虫剂抗性 | 第11-13页 |
·昆虫的抗药性机理 | 第13-17页 |
·代谢抗性 | 第13-15页 |
·细胞色素 P450 单加氧酶 | 第14页 |
·非专一性酯酶 | 第14-15页 |
·谷胱甘肽-S-转移酶 | 第15页 |
·靶标抗性 | 第15-16页 |
·乙酰胆碱酯酶 | 第15页 |
·钠离子通道 | 第15-16页 |
·γ-氨基丁酸受体氯离子通道 | 第16页 |
·抗药性的遗传研究 | 第16-17页 |
·抗性基因研究技术 | 第17-18页 |
·淡色库蚊杀虫剂抗性相关基因研究现状 | 第18-22页 |
·我国近年对淡色库蚊抗性的监测 | 第18-19页 |
·淡色库蚊抗性基因研究状况 | 第19-22页 |
·细胞色素 P450 家族的研究 | 第19-20页 |
·钠离子通道基因的研究 | 第20页 |
·丝氨酸蛋白酶基因家族的研究 | 第20-21页 |
·视蛋白基因的研究 | 第21页 |
·跨膜蛋白基因的研究 | 第21-22页 |
·蚊核糖体蛋白基因的研究 | 第22页 |
·研究内容和意义 | 第22-24页 |
第二章 不同方法提取淡色库蚊总 RNA 的定量比较分析 | 第24-34页 |
·材料与方法 | 第24-28页 |
·总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
·总 RNA 核酸浓度检测与电泳检测 | 第26页 |
·总 RNA 的纯化 | 第26-27页 |
·反转录及其产物检测 | 第27页 |
·实时荧光定量 PCR(基于标准曲线的绝对定量) | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-31页 |
·五种方法获得总 RNA 的纯度、产量及电泳检测 | 第28-29页 |
·总 RNA 经 DnaseI 纯化的结果 | 第29-30页 |
·五种方法方法耗时比较 | 第30页 |
·反转录及其 PCR 产物电泳结果分析 | 第30-31页 |
·五种方法所提总 RNA 定量分析 | 第31页 |
·讨论 | 第31-34页 |
第三章 淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关基因 XN-P450 cDNA 的克隆与生物信息学分析 | 第34-45页 |
·材料与方法 | 第34-37页 |
·淡色库蚊抗性与敏感品系蚊虫的总 RNA 的提取 | 第34页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
·3’-RACE-Ready- cDNA 的合成 | 第34-35页 |
·5’-RACE-Ready-cDNA 的合成 | 第35页 |
·EST 的引物验证及结果测序 | 第35页 |
·淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关基因的 3’、5’-RACE 扩增、检测 | 第35-36页 |
·3’-RACE PCR | 第35-36页 |
·5’-RACE PCR | 第36页 |
·基因测序 | 第36页 |
·RACE 产物的纯化 | 第36页 |
·克隆 | 第36页 |
·阳性克隆检测 | 第36页 |
·测序结果的比对分析 | 第36页 |
·全长 cDNA 的扩增 | 第36页 |
·生物信息学分析 | 第36-37页 |
·定量分析 | 第37页 |
·实验结果与分析 | 第37-43页 |
·抗性与敏感品系库蚊的总 RNA 提取 | 第37-38页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第38页 |
·EST 引物验证 | 第38页 |
·3’、5’- RACE 扩增及测序 | 第38页 |
·全长 cDNA 的扩增 | 第38-40页 |
·全长基因的生物信息学分析 | 第40-43页 |
·定量分析该基因在两种品系蚊虫中的差异表达 | 第43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
第四章 淡色库蚊抗性基因 CYP6F1 的时序性表达 | 第45-50页 |
·材料与方法 | 第45-46页 |
·不同发育时期淡色库蚊总 RNA 的提取 | 第45-46页 |
·总 RNA 的纯化、反转录 | 第46页 |
·实时荧光定量 PCR(相对定量) | 第46页 |
·结果及分析 | 第46-48页 |
·不同发育时期库蚊总 RNA 提取的浓度和纯度 | 第46页 |
·总 RNA 的纯化及反转录 | 第46-47页 |
·定量结果 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |