致谢 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10页 |
第一章 文献综述 | 第12-29页 |
第一节 植物抗病遗传分子机制 | 第12-20页 |
1 植物抗病基因的结构与功能 | 第12-16页 |
1.1 植物抗病基因的克隆 | 第12-13页 |
1.2 植物抗病基因的专一性识别 | 第13-14页 |
1.3 植物抗病蛋白在细胞中的分布 | 第14页 |
1.4 NBS—LRR基元在信号传导中的作用 | 第14-15页 |
1.5 Pto激酶介导的信号传导 | 第15-16页 |
2 植物抗病信号传导 | 第16-20页 |
2.1 信号传导途径的相对保守性 | 第16页 |
2.2 R基因下游的信号成分 | 第16-17页 |
2.3 R基因信号传导途径中MAPK的作用 | 第17-18页 |
2.4 系统获得抗性中的SA、JA与乙烯 | 第18-20页 |
第二节 植物抗病基因工程 | 第20-26页 |
1 植物防卫反应基因的利用 | 第20-21页 |
2 抗菌肽的利用 | 第21-22页 |
3 活性氧与植保素的利用 | 第22页 |
4 R基因的利用 | 第22-23页 |
5 病原菌无毒基因和专化性激发子的利用 | 第23-24页 |
6 信号传导调控基因的利用 | 第24-25页 |
7 其他 | 第25-26页 |
第三节 研究背景、目的及意义 | 第26-29页 |
第二章 hrmA基因及其蛋白在水稻抗病中的作用 | 第29-58页 |
第一节 HrmA蛋白的原核高效表达及其生物学活性分析 | 第29-43页 |
1 材料和方法 | 第29-37页 |
1.1 材料 | 第29页 |
1.2 方法 | 第29-37页 |
1.2.1 hrmA基因原核表达载体的构建 | 第29-32页 |
1.2.2 HrmA蛋白的诱导表达 | 第32页 |
1.2.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳分析 | 第32-33页 |
1.2.4 重组蛋白的大量制备与复性 | 第33-34页 |
1.2.5 HrmA融合蛋白的生物学活性鉴定 | 第34页 |
1.2.6 水稻PBZ1基因的克隆 | 第34页 |
1.2.7 Northern blot杂交分析 | 第34-37页 |
2 实验结果 | 第37-40页 |
2.1 hrmA基因原核表达载体的鉴定 | 第37页 |
2.2 HrmA融合蛋白的获得 | 第37-38页 |
2.3 HrmA融合蛋白诱导烟草过敏反应 | 第38页 |
2.4 HrmA融合蛋白诱导水稻细胞活性氧的进发 | 第38页 |
2.5 HrmA蛋白对水稻PR基因表达的影响 | 第38-40页 |
2.5.1 水稻PBZ1基因的克隆 | 第38-39页 |
2.5.2 Northern blot杂交分析 | 第39-40页 |
3 讨论 | 第40-41页 |
图表 | 第41-43页 |
第二节 hrmA基因的水稻转化与抗病性分析 | 第43-58页 |
1 材料与方法 | 第43-49页 |
1.1 材料 | 第43页 |
1.2 方法 | 第43-49页 |
1.2.1 hrmA基因植物表达载体的构建 | 第43-46页 |
1.2.2 水稻愈伤的培养 | 第46页 |
1.2.3 基因枪介导的水稻转化 | 第46-47页 |
1.2.4 转基因水稻植株的获得 | 第47-48页 |
1.2.5 转基因植株的PCR鉴定 | 第48-49页 |
1.2.6 转基因植株Northern blot杂交分析 | 第49页 |
1.2.7 转基因水稻的抗病性测定 | 第49页 |
2 实验结果 | 第49-51页 |
2.1 hrmA植物表达载体的鉴定 | 第49页 |
2.2 水稻胚性愈伤的培养 | 第49-50页 |
2.3 转基因植株的获得 | 第50页 |
2.4 TO代转基因植株PCR鉴定 | 第50页 |
2.5 TO代转基因植株的Northern blot杂交分析 | 第50-51页 |
2.6 TO代转基因水稻增强对病原菌的抗性 | 第51页 |
3 讨论 | 第51-54页 |
图表 | 第54-58页 |
第三章 转铁蛋白基因水稻增强氧化胁迫与稻瘟病菌的抗性 | 第58-68页 |
1 材料与方法 | 第58-59页 |
1.1 材料 | 第58页 |
1.2 方法 | 第58-59页 |
1.2.1 转基因T1代植株PCR检测 | 第58页 |
1.2.2 光合作用参数Fv/Fm的测定 | 第58页 |
1.2.3 叶绿素含量的测定 | 第58-59页 |
1.2.4 转基因T1代水稻Northern blot杂交分析 | 第59页 |
1.2.5 转基因T1代水稻PR基因表达丰度检测 | 第59页 |
1.2.6 转基因T2代水稻稻瘟病菌接种 | 第59页 |
2 实验结果 | 第59-62页 |
2.1 转Fer基因T1代水稻PCR检测 | 第59页 |
2.2 转Fer基因T1代水稻的耐受氧化胁迫能力 | 第59-61页 |
2.3 转Fer基因T1代水稻的Northern blot分析 | 第61页 |
2.4 转Fer基因T1代水稻PR基因的表达 | 第61-62页 |
2.5 转Fer基因T2代水稻叶片病斑数目减少 | 第62页 |
3 讨论 | 第62-65页 |
图表 | 第65-68页 |
小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-77页 |
附录 | 第77-82页 |