摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
目录 | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第8-20页 |
1.1 课题来源 | 第8页 |
1.2 课题背景及研究的目的和意义 | 第8页 |
1.3 国内外在该方向的研究现状及分析 | 第8-19页 |
1.3.1 关于 MARVELD1 的研究进展 | 第8-9页 |
1.3.2 关于细胞力学的研究进展 | 第9-11页 |
1.3.3 关于 Tet 基因表达系统的研究进展 | 第11-15页 |
1.3.4 关于原子力显微镜技术的研究进展 | 第15-19页 |
1.4 技术路线 | 第19页 |
1.5 本章小结 | 第19-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-28页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 细胞系 | 第20页 |
2.1.2 菌株及重组体 | 第20页 |
2.1.3 抗体 | 第20页 |
2.1.4 常用缓冲液及其他试剂 | 第20-22页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第22页 |
2.1.6 主要软件 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-27页 |
2.2.1 质粒转化 | 第23页 |
2.2.2 质粒提取 | 第23页 |
2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第23-24页 |
2.2.4 细胞培养 | 第24页 |
2.2.5 细胞的稳定转染及克隆筛选 | 第24-25页 |
2.2.6 细胞的裂解及蛋白提取 | 第25页 |
2.2.7 荧光素酶检测 | 第25页 |
2.2.8 免疫印迹(Western Blot) | 第25-26页 |
2.2.9 细胞冻存 | 第26页 |
2.2.10 APES 处理盖玻片 | 第26-27页 |
2.2.11 扫描电子显微镜的样品制备 | 第27页 |
2.2.12 原子力显微镜的样品制备 | 第27页 |
2.3 本章小结 | 第27-28页 |
第3章 MARVELD1-Tet-on 细胞株的建立 | 第28-37页 |
3.1 引言 | 第28页 |
3.2 Tet-on 细胞株的建立 | 第28-33页 |
3.2.1 Tet-on 细胞稳定克隆筛选 | 第28-30页 |
3.2.2 荧光素酶系统检测诱导克隆稳定性表达筛选 | 第30-33页 |
3.3 MARVELD1-Tet-on 细胞株的建立 | 第33-36页 |
3.3.1 MARVELD1-Tet-on 细胞稳定克隆筛选 | 第33-35页 |
3.3.2 免疫印迹检测诱导克隆稳定性表达筛选 | 第35-36页 |
3.4 本章讨论 | 第36页 |
3.5 本章小结 | 第36-37页 |
第4章 MARVELD1-Tet-on 细胞株力学性能分析 | 第37-46页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 光学显微镜观测细胞表面形貌 | 第37-38页 |
4.3 扫描电子显微镜观测细胞表面超微结构 | 第38-39页 |
4.4 原子力显微镜观测细胞表面超微结构 | 第39-41页 |
4.4.1 细胞样品爬片方法的确立 | 第39-40页 |
4.4.2 细胞表面形貌图的获得 | 第40页 |
4.4.3 力-距离曲线的获得 | 第40-41页 |
4.5 赫兹模型求解杨氏模量 | 第41-45页 |
4.6 本章讨论 | 第45页 |
4.7 本章小结 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
附录 | 第52-53页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第53-55页 |
致谢 | 第55页 |