| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 中英文缩略词表 | 第7-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 第一部分：Chrm4-sh RNA慢病毒载体的构建包装及KD-M4 MSNs细胞模型的建立 | 第14-43页 |
| 一、慢病毒干扰载体的构建 | 第14-24页 |
| 材料与方法 | 第14-20页 |
| 1 实验材料 | 第14-16页 |
| 2 实验方法 | 第16-20页 |
| 2.1 sh RNA靶点的选择 | 第16页 |
| 2.2 sh RNA引物的设计 | 第16-17页 |
| 2.3 RNAi慢病毒重组质粒的构建 | 第17-20页 |
| 结果 | 第20-23页 |
| 小结 | 第23-24页 |
| 二、慢病毒的包装及测定病毒滴度（吉满生物） | 第24-30页 |
| 材料与方法 | 第24-27页 |
| 1. 细胞株 | 第24页 |
| 2. 菌株 | 第24页 |
| 3. 慢病毒包装系统 | 第24页 |
| 4. 试剂 | 第24页 |
| 5. 仪器 | 第24-25页 |
| 6. 实验方法 | 第25-27页 |
| 结果 | 第27-29页 |
| 小结 | 第29-30页 |
| 三、KD-M4 MSNs细胞模型的建立 | 第30-43页 |
| 材料与方法 | 第30-40页 |
| 1 实验材料 | 第30-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-40页 |
| 2.1 原代大鼠纹状体神经元培养 | 第34页 |
| 2.2 细胞免疫荧光 | 第34-35页 |
| 2.3 Western blot检测转染细胞表达情况 | 第35-38页 |
| 2.4 Chrm4-sh RNA慢病毒载体转染纹状体MSNs | 第38-39页 |
| 2.5 统计学处理方法 | 第39-40页 |
| 结果 | 第40-42页 |
| 1 原代纹状体 MSN 神经元鉴定 | 第40页 |
| 2 Chrm4-sh RNA 慢病毒载体初筛 | 第40页 |
| 3 Chrm4-sh RNA2 慢病毒载体转染 MSNs | 第40-42页 |
| 小结 | 第42-43页 |
| 第二部分：纹状体MSNs中M4受体对c AMP/DARPP-32磷酸化信号通路的调控作用研究 | 第43-56页 |
| 材料与方法 | 第43-47页 |
| 1 实验材料 | 第43-44页 |
| 2 实验方法 | 第44-47页 |
| 2.1 细胞免疫荧光 | 第44页 |
| 2.2 应用时间分辨荧光共振能量转移的检测方法（TR-FRET assay,time-resolved fluoresence resonance energy transfer assay）检测原代培养的新生大鼠纹状体神经元胞内 c AMP 含量 | 第44-46页 |
| 2.3 大鼠纹状体神经元内 P-Thr34 Darpp-32，P-Thr75 Darpp-32，CREB 和 P35蛋白含量的测定（见第一部分实验方法 2.4） | 第46页 |
| 2.4 统计学处理方法 | 第46-47页 |
| 结果 | 第47-51页 |
| 1 M1 和 M4 受体表达研究 | 第47页 |
| 2 应用 TR-FRET 分析检测氧化震颤素诱导胞内 c AMP 生成及调控作用 | 第47-48页 |
| 3 氧化震颤素对 DARPP-32 P-Thr34 和 P-Thr75 的磷酸化作用 | 第48-49页 |
| 4 氧化震颤素上调 DARPP-32 P-Thr75 磷酸化水平的调控作用研究 | 第49页 |
| 5 在 KD-M4 MSNs 上氧化震颤素对 DARPP-32 P-Thr75 磷酸化作用的研究 | 第49-51页 |
| 讨论 | 第51-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 图及照片 | 第56-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 综述 | 第71-79页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第80-81页 |
| 个人简历 | 第81页 |
