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拮抗香蕉枯萎病菌的LX1菌株的分离鉴定及其抑菌蛋白的分离纯化与该基因的克隆

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
1 前言第10-20页
   ·香蕉枯萎病第10-11页
     ·香蕉枯萎病菌的危害及分布第10页
     ·香蕉枯萎病病原菌第10-11页
   ·香蕉枯萎病发病症状及病菌致病机制第11-12页
     ·香蕉枯萎病发病症状第11页
     ·香蕉枯萎病菌致病机制第11-12页
   ·香蕉枯萎病的生防菌的研究进展第12-15页
     ·假单胞菌第13页
     ·枯草芽孢杆菌第13-14页
     ·木霉第14页
     ·放线菌第14页
     ·其他菌类第14-15页
   ·解淀粉芽孢杆菌第15-18页
     ·解淀粉芽孢杆菌的特性第15-16页
     ·解淀粉芽孢杆菌的研究进展第16页
     ·解淀粉芽孢杆菌抗菌蛋白的研究进展第16页
     ·解淀粉芽孢杆菌生防机制第16-18页
       ·竞争作用第16-17页
       ·拮抗作用第17页
       ·诱导植物抗性作用第17页
       ·促生作用第17-18页
   ·本课题研究的意义和研究内容第18-20页
     ·研究意义第18页
     ·研究内容第18-19页
     ·技术路线第19-20页
2. 材料和方法第20-38页
   ·材料第20-22页
     ·菌种第20页
     ·培养基第20-21页
     ·培养条件第21页
     ·主要仪器设备第21-22页
   ·实验方法第22-23页
     ·拮抗香蕉枯萎病菌的菌株的分离筛选第22-23页
       ·采集土样第22页
       ·拮抗香蕉枯萎病菌菌株的初步分离筛选第22-23页
       ·拮抗香蕉枯萎病菌菌株的复筛第23页
   ·高效拮抗香蕉枯萎病菌的菌株鉴定第23-27页
     ·生理生化鉴定第23-25页
     ·分子鉴定第25-27页
   ·LX1菌株发酵上清液稳定性的研究第27-28页
     ·菌株发酵上清液的制备第27页
     ·发酵上清液的活性测定第27-28页
     ·不同的处理对LX1菌株产生抑菌活性物质的影响第28页
   ·LX1菌株抗菌蛋白粗提物活性成分的初步研究第28-33页
     ·抗菌蛋白粗提物的提取第28-29页
     ·抗菌蛋白粗提物活性测定第29-30页
     ·抗菌蛋白对蛋白酶K的敏感性试验第30页
     ·抗菌蛋白的分离纯化第30-31页
       ·Sephacry1 S-200HR柱层析第30-31页
       ·DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析第31页
     ·目标蛋白分子量的测定第31-33页
       ·电泳溶液的配制第31-32页
       ·电泳凝胶的制备第32-33页
       ·电泳方法第33页
       ·凝胶染色与脱色第33页
   ·抗菌蛋白的质谱分析第33-34页
   ·抗菌蛋白基因的克隆第34-37页
     ·LX1菌株基因组DNA的提取第34页
     ·引物的设计第34页
     ·PCR扩增第34页
     ·PCR产物的回收第34页
     ·纯化PCR产物加"A"第34-35页
     ·与T载体连接第35页
     ·大肠杆菌感受态的制备第35页
     ·转化第35-36页
     ·阳性克隆的筛选及鉴定第36-37页
   ·阳性克隆菌株序列测定第37-38页
3. 结果与分析第38-54页
   ·拮抗香蕉枯萎病菌菌株的分离筛选第38页
   ·LX1菌株的鉴定第38-46页
   ·LX1菌株产抗菌物质的研究第43-46页
     ·LX1菌发酵上清液抑菌活性测定结果第43页
     ·温度对发酵上清液抑菌活性的影响第43-45页
     ·pⅡ对发酵上清液抑菌活性的影响第45页
     ·培养时间对发酵上清液抑菌活性的影响第45-46页
   ·抗菌蛋白粗提物的抑菌活性测定结果第46-47页
   ·抗菌蛋白对蛋白酶K的敏感性试验结果第47-48页
   ·抗菌蛋白的分离纯化第48-50页
     ·Sephacry1 S-200HR柱层析第48-49页
     ·DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析第49-50页
   ·抗菌蛋白的质谱分析第50页
   ·抗菌蛋白基因的克隆第50-54页
     ·抗菌蛋白基因的扩增第50页
     ·阳性克隆菌株的鉴定第50-51页
     ·阳性克隆基因测序与分析第51-54页
4. 讨论第54-57页
   ·芽孢杆菌生防作用第54页
   ·LX1菌株鉴定第54-55页
   ·LX1菌株特性第55页
   ·抗菌蛋白的分离纯化第55页
   ·抗菌蛋白的基因克隆第55-56页
   ·展望第56-57页
5. 结论第57-58页
参考文献第58-66页
附录第66-68页
 附录1第66-67页
 附录2第67-68页
缩略词第68-69页
致谢第69页

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