| 本文缩写词 | 第8-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-43页 |
| 一 前言 | 第14-15页 |
| 二 芸薹属蔬菜基因工程研究进展 | 第15-21页 |
| 1 农杆菌介导的遗传转化 | 第15-17页 |
| 2 高效遗传转化体系的建立 | 第17-20页 |
| 3 导入的外源基因 | 第20页 |
| 4 存在的主要问题 | 第20-21页 |
| 三 辣椒基因工程研究进展 | 第21-26页 |
| 1 研究进展 | 第21-22页 |
| 2 存在问题 | 第22-24页 |
| 3 对策和今后研究重点 | 第24-26页 |
| 四 植物抗虫基因工程研究进展 | 第26-41页 |
| 1 抗虫基因 | 第26-34页 |
| 2 抗虫基因工程中存在的问题和解决措施 | 第34-41页 |
| 五 研究背景及本文立题 | 第41-43页 |
| 第二章 大白菜、甘蓝和辣椒高效遗传转化体系的优化和建立 | 第43-58页 |
| 一 材料与方法 | 第43-46页 |
| 1 植物材料及无菌苗培养 | 第43页 |
| 2 基本培养基、激素种类和其它添加物 | 第43页 |
| 3 根癌农杆菌及其质粒 | 第43-44页 |
| 4 工程菌的活化与外植体侵染及筛选 | 第44页 |
| 5 影响根癌农杆菌转化效果的因素 | 第44-46页 |
| 二 结果与分析 | 第46-54页 |
| 1 不同激素配比和添加物对大白菜、甘蓝和辣椒离体再生的影响 | 第46-47页 |
| 2 不同基因型、不同苗龄和外植体对转化频率的影响 | 第47-49页 |
| 3 预培养和不同共培养方式对转化频率的影响 | 第49-50页 |
| 4 不同共培养基对转化频率的影响 | 第50页 |
| 5 工程菌液浓度和侵染时间对转化频率的影响 | 第50-52页 |
| 6 卡那霉素和头孢霉素对转化频率的影响 | 第52-54页 |
| 7 附加乙酰丁香酮对转化频率的影响 | 第54页 |
| 三 讨论 | 第54-58页 |
| 1 大白菜高效遗传转化体系的建立 | 第54-56页 |
| 2 甘蓝高效遗传转化体系的建立 | 第56页 |
| 3 辣椒高效遗传转化体系的建立 | 第56-58页 |
| 第三章 转基因大白菜、甘蓝和辣椒植株的获得及其分子鉴定 | 第58-97页 |
| 一 材料与方法 | 第58-72页 |
| 1 实验材料 | 第58-59页 |
| 2 重要仪器设备 | 第59页 |
| 3 重要试剂与溶液 | 第59-62页 |
| 4 培养基及一些重要试剂的配制 | 第62-63页 |
| 5 实验方法 | 第63-72页 |
| 5．1 根癌农杆菌法介导转化大白菜、甘蓝和辣椒 | 第63页 |
| 5．2 基因枪介导法转化大白菜和甘蓝茎尖 | 第63-65页 |
| 5．3 转基因植株的分子鉴定 | 第65-69页 |
| 5．3．1 总DNA的提取 | 第65页 |
| 5．3．2 RNA的提取 | 第65-66页 |
| 5．3．3 聚合酶链式反应（PCR）检测 | 第66-67页 |
| 5．3．4 探针的制备 | 第67页 |
| 5．3．5 Southern blotting杂交分析 | 第67-68页 |
| 5．3．6 PCR-Southern杂交分析 | 第68页 |
| 5．3．7 Northern blotting杂交分析 | 第68-69页 |
| 5．4 外源基因表达产物检测 | 第69-71页 |
| 5．4．1 总蛋白含量的测定 | 第69页 |
| 5．4．2 蛋白酶抑制剂活性的测定 | 第69-70页 |
| 5．4．3 凝集素生物活性的测定 | 第70-71页 |
| 5．5 转基因大白菜、甘蓝和辣椒植株农艺性状考察 | 第71-72页 |
| 二 结果与分析 | 第72-93页 |
| 1 植物表达载体 | 第72页 |
| 2 农杆菌介导的大白菜、甘蓝和辣椒抗性植株及其后代的获得 | 第72-76页 |
| 3 基因枪介导转化大白菜和甘蓝卡那霉素抗性植株的获得 | 第76-77页 |
| 4 根癌农杆菌介导转化再生植株的分子鉴定 | 第77-90页 |
| 4．1 转sck基因再生植株的分子鉴定 | 第77-81页 |
| 4．2 转Bt基因再生植株的分子鉴定 | 第81-84页 |
| 4．3 转gna基因再生植株的分子鉴定 | 第84-87页 |
| 4．4 转双价和三价抗虫基因再生植株的分子鉴定 | 第87-90页 |
| 5 基因枪介导转化大白菜和甘蓝茎尖再生植株的分子鉴定 | 第90-92页 |
| 6 转基因植株的农艺性状观察 | 第92-93页 |
| 三 讨论 | 第93-97页 |
| 1 转基因大白菜、甘蓝和辣椒植株的获得及分子验证 | 第93页 |
| 2 外源基因在转基因植株中的表达及沉默 | 第93-95页 |
| 3 基因枪法在大白菜和甘蓝基因工程中的应用 | 第95-97页 |
| 第四章 转基因大白菜、甘蓝和辣椒植株的抗虫鉴定及转基因大白菜外源基因的遗传和表达分析 | 第97-112页 |
| 一 材料与方法 | 第97-100页 |
| 1 植物材料 | 第97页 |
| 2 测试用虫 | 第97页 |
| 3 测虫方法 | 第97-99页 |
| 3．1 大白菜和甘蓝转基因植株的菜青虫测试 | 第97-98页 |
| 3．2 辣椒转基因植株的棉铃虫测试 | 第98-99页 |
| 3．3 转基因植株的抗蚜性鉴定 | 第99页 |
| 4 大白菜转基因植株中外源基因的遗传和表达分析 | 第99-100页 |
| 4．1 材料准备 | 第99页 |
| 4．2 T_1代植株的卡那霉素筛选 | 第99页 |
| 4．3 T_1代植株的PCR分析和PCR-Southern杂交分析 | 第99-100页 |
| 4．4 T_1代植株的抗虫性分析 | 第100页 |
| 二 结果与分析 | 第100-106页 |
| 1 转基因大白菜植株的抗虫鉴定 | 第100-102页 |
| 1．1 菜青虫测试 | 第100-101页 |
| 1．2 蚜虫测试 | 第101-102页 |
| 2 转基因甘蓝植株的抗虫鉴定 | 第102-103页 |
| 2．1 菜青虫测试 | 第102-103页 |
| 2．2 蚜虫测试 | 第103页 |
| 3 转基因辣椒植株的抗虫鉴定 | 第103-105页 |
| 4 外源基因在转基因大白菜中的遗传和表达分析 | 第105-106页 |
| 4．1 T_1代植株中卡那霉素抗性的分离 | 第105-106页 |
| 4．2 T_1代植株的PCR和PCR-Southern杂交分析 | 第106页 |
| 4．3 T_1代植株的抗虫性分析 | 第106页 |
| 三 讨论 | 第106-112页 |
| 1 不同转基因植株抗虫性的差异与转基因沉默 | 第106-108页 |
| 2 提高植物抗虫性和延缓害虫耐受性的策略 | 第108-109页 |
| 3 外源基因的遗传和表达及其鉴定 | 第109-111页 |
| 4 转基因蔬菜的安全性评价 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-123页 |
| 附录 | 第123-133页 |
| 在学期间发表文章 | 第133-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
