| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一部分：文献综述 | 第10-32页 |
| 1. 真核生物内质网未折叠蛋白应答 | 第10-23页 |
| 1.1 真核生物蛋白折叠 | 第11-16页 |
| 1.1.1 内质网中蛋白折叠方式 | 第11-14页 |
| 1.1.2 蛋白折叠过程中的辅助因子 | 第14-16页 |
| 1.2 ERAD(ER-ASSOCIATED DEGRADATION) | 第16-17页 |
| 1.3 未折叠蛋白应答 | 第17-21页 |
| 1.3.1 酵母细胞中UPR信号途径 | 第17-18页 |
| 1.3.2 动物细胞中UPR信号途径 | 第18-19页 |
| 1.3.3 植物细胞中UPR信号途径 | 第19-21页 |
| 1.4 植物UPR与环境胁迫 | 第21-23页 |
| 2. 植物NAC家族研究进展 | 第23-32页 |
| 2.1 NAC家族概述 | 第23页 |
| 2.2 NAC蛋白的结构特征 | 第23-25页 |
| 2.3 NAC转录因子的调控 | 第25-27页 |
| 2.3.1 NAC转录因子在转录水平上的调控 | 第25-26页 |
| 2.3.2 NAC转录因子转录后调控 | 第26页 |
| 2.3.3 NAC转录因子的翻译后修饰 | 第26-27页 |
| 2.4 NAC转录因子的生物学功能 | 第27-31页 |
| 2.4.1 NAC转录因子参与植物发育过程 | 第27-28页 |
| 2.4.2 NAC转录因子参与逆境防御反应 | 第28-31页 |
| 2.4.2.1 NAC转录因子参与非生物胁迫应答 | 第29-30页 |
| 2.4.2.2 NAC转录因子参与生物胁迫应答 | 第30-31页 |
| 2.5 NAC基因在农业生产上的应用前景 | 第31-32页 |
| 第二部分：材料与方法 | 第32-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-35页 |
| 2.1.1 植物材料及其培养方法 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株 | 第32页 |
| 2.1.3 质粒 | 第32-33页 |
| 2.1.4 试剂盒 | 第33页 |
| 2.1.5 酶 | 第33页 |
| 2.1.6 主要化学试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.7 主要培养基成分 | 第34页 |
| 2.1.8 主要实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-44页 |
| 2.2.1 拟南芥幼苗培养及各种逆境条件处理 | 第35页 |
| 2.2.1.1 拟南芥种子消毒及种植 | 第35页 |
| 2.2.1.2 拟南芥幼苗胁迫处理 | 第35页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第35-36页 |
| 2.2.3 点突变 | 第36-37页 |
| 2.2.4 细菌转化 | 第37页 |
| 2.2.5 酵母转化 | 第37-38页 |
| 2.2.6 酵母单杂、双杂、转录激活活性实验 | 第38页 |
| 2.2.7 酵母X-gal显色反应 | 第38页 |
| 2.2.8 农杆菌介导的拟南芥稳定转化 | 第38页 |
| 2.2.9 原生质体转化 | 第38-39页 |
| 2.2.10 RNA提取及RT-PCR | 第39-40页 |
| 2.2.11 融合蛋白表达与提纯 | 第40-41页 |
| 2.2.12 Western blot检测 | 第41页 |
| 2.2.13 激光共聚焦荧光显微镜观察 | 第41-42页 |
| 2.2.14 凝胶迁移实验(EMSA) | 第42-44页 |
| 第三部分：实验结果 | 第44-64页 |
| 3.1 NAC103受内质网胁迫诱导上调表达 | 第44页 |
| 3.2 NAC103的诱导表达依赖于bZIP60 | 第44-46页 |
| 3.3 NAC103启动子序列中含有一个新的内质网胁迫应答相关的顺式作用元件 | 第46-49页 |
| 3.4 bZIP60通过结合UPRE-Ⅲ启动NAC103表达 | 第49-52页 |
| 3.5 NAC103 NAC家族转录激活因子 | 第52-59页 |
| 3.5.1 NAC103具有转录激活活性 | 第52-54页 |
| 3.5.2 NAC103形成同源二聚体 | 第54页 |
| 3.5.3 NAC103可能不与钙离子结合 | 第54-55页 |
| 3.5.4 NAC103在细胞核内表达 | 第55-57页 |
| 3.5.5 NAC103在植物抵御内质网胁迫过程中具有重要作用 | 第57-59页 |
| 3.6 NAC103-YFP过量表达影响植物发育过程 | 第59-61页 |
| 3.7 NAC103正调控UPR下游基因 | 第61-64页 |
| 第四部分 讨论 | 第64-69页 |
| 4.1 NAC家族基因功能多样性 | 第64页 |
| 4.2 NAC103结构特点 | 第64页 |
| 4.3 UPRE-Ⅲ是UPR调控通路中一个新的顺式作用元件 | 第64-65页 |
| 4.4 NAC103在内质网胁迫信号通路中的调控方式 | 第65-69页 |
| 附录A：本论文中使用的引物 | 第69-70页 |
| 附录B：常用试剂和缓冲液配方 | 第70-77页 |
| 附录C：常用培养基配方 | 第77-79页 |
| 第五部分：参考文献 | 第79-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读博士期间已发表论文 | 第92-93页 |
