| 符号及缩略语 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 第一部分 海马LTP诱发蛋白酶体介导的SPAR蛋白降解 | 第12-55页 |
| 中文摘要 | 第12-13页 |
| 英文摘要 | 第13-14页 |
| 1 前言 | 第14-18页 |
| 1.1 活动依赖的突触可塑性与UPS介导的蛋白降解 | 第14-15页 |
| 1.2 SPAR蛋白在活动依赖的突触可塑性中的作用 | 第15-16页 |
| 1.2.1 SPAR蛋白的结构特征 | 第15页 |
| 1.2.2 SPAR蛋白与电活动依赖的突触可塑性 | 第15-16页 |
| 1.3 研究的目的,意义和研究方法 | 第16-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-22页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第18页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第18页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 工具酶、试剂盒和药品 | 第19-21页 |
| 2.1.5 主要抗体 | 第21页 |
| 2.1.6 质粒载体 | 第21-22页 |
| 2.2 主要试剂及溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.2.1 分子克隆及免疫组化所需试剂及溶液 | 第22-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-40页 |
| 2.3.1 基因克隆 | 第24-34页 |
| 2.3.1.1 含SPAR-eGFP1片断的pDNC3.1质粒点突变 | 第24-26页 |
| 2.3.1.2 含SPAR-eGFP1-pSFV1融合基因重组表达载体的构建 | 第26-29页 |
| 2.3.1.3 含SPAR-eGFP1-pSFV1融合基因重组表达载体的体外转录 | 第29-30页 |
| 2.3.1.4 病毒颗粒的包装及立体定位注射 | 第30-32页 |
| 2.3.1.5 脑片荧光信号和电生理信号同步记录 | 第32-33页 |
| 2.3.1.6 数据处理与分析 | 第33-34页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.3.2.1 神经元培养所需溶液及配制 | 第34页 |
| 2.3.2.2 海马神经元的培养 | 第34-35页 |
| 2.3.2.3 HEK-293t细胞培养所需试剂及溶液 | 第35页 |
| 2.3.3 电生理记录 | 第35-37页 |
| 2.3.3.1 膜片钳记录相关溶液的配制 | 第35-36页 |
| 2.3.3.2 全细胞膜片钳记录 | 第36-37页 |
| 2.3.4 免疫荧光染色 | 第37-38页 |
| 2.3.4.1 培养细胞免疫染色 | 第37-38页 |
| 2.3.4.2 免疫组织染色 | 第38页 |
| 2.3.5 数据处理与分析 | 第38-40页 |
| 3 实验结果 | 第40-51页 |
| 3.1 含有SPAR-eGFP片段的pDNC3.1质粒定点突变 | 第40页 |
| 3.2 含SPAR-eGFP融合基因的西门利克森林病毒载体的构建 | 第40-42页 |
| 3.3 含有SPAR-eGFP蛋白的西门利克森林病毒颗粒的产生 | 第42-43页 |
| 3.4 SPAR-eGFP在神经元树突棘中高表达 | 第43-45页 |
| 3.5. 在脑片海马神经元中强制刺激LTP诱导SPAR-eGFP降解 | 第45-47页 |
| 3.6 突触可塑性依赖的SPAR-eGFP降解途径 | 第47页 |
| 3.7 不依赖蛋白质合成的SPAR-eGFP降解途径 | 第47-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 含有SPAR-eGFP西门利克森林病毒颗粒的产生 | 第51-52页 |
| 4.2 电活动依赖的突触可塑性诱导SPAR蛋白的降解 | 第52-55页 |
| 第二部分 突触-核信使蛋白Jacob调节突触传递 | 第55-81页 |
| 中文摘要 | 第55-56页 |
| 英文摘要 | 第56-57页 |
| 1 前言 | 第57-61页 |
| 2 材料和方法 | 第61-64页 |
| 2.1 实验材料 | 第61-63页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第61页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第61页 |
| 2.1.3 主要试剂和药品 | 第61-62页 |
| 2.1.4 含有WT-Jacob-eGFP融合基因的病毒载体构建 | 第62页 |
| 2.1.5 含有WT-Jacob-GFP融合基因的病毒载体体外转录 | 第62-63页 |
| 2.2 细胞培养及免疫细胞化学染色 | 第63页 |
| 2.3 全细胞膜片钳记录及数据处理分析 | 第63-64页 |
| 3 实验结果 | 第64-76页 |
| 3.1 三种突变体Jacob蛋白的构建 | 第64页 |
| 3.2 膜片钳实验中所选用的原代培养的海马神经元类型 | 第64-66页 |
| 3.3 Jacob蛋白在海马区的细胞和亚细胞结构分布 | 第66-69页 |
| 3.4 强直刺激诱导LTP后野生型的Jacob蛋白在细胞核中聚积 | 第69-71页 |
| 3.5 WT-Jacob-GFP突变体能提高突触强度和增加自发性神经递质的释放频率 | 第71-74页 |
| 3.6 △Myr-S180D-Jacob-GFP能增加兴奋性微小电流的幅度 | 第74-76页 |
| 4 讨论 | 第76-81页 |
| 4.1 Jacob在神经元的表达是一个动态的过程 | 第76-77页 |
| 4.2 Jacob蛋白在突触可塑性中的作用 | 第77-78页 |
| 4.3 Jacob参与信号传递的调控途径 | 第78-81页 |
| 全文总结 | 第81-83页 |
| 综述突触后致密区与突触可塑性 | 第83-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 附录 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
