| 摘要 | 第5-12页 |
| ABSTRACT | 第12-20页 |
| 第一章 前言 | 第28-60页 |
| 1.1 甲壳素和壳聚糖的概述 | 第28-29页 |
| 1.2 甲壳素和壳聚糖提取方法 | 第29-34页 |
| 1.2.1 化学提取法 | 第29-31页 |
| 1.2.2 酶解法 | 第31页 |
| 1.2.3 物理辅助法 | 第31-32页 |
| 1.2.4 微生物发酵法 | 第32-34页 |
| 1.2.4.1 甲壳素的提取 | 第32-33页 |
| 1.2.4.2 甲壳素脱乙酰生成壳聚糖 | 第33-34页 |
| 1.2.5 壳聚糖的解聚 | 第34页 |
| 1.3 壳聚糖的应用 | 第34-37页 |
| 1.3.1 壳聚糖在抗菌和抗氧化中的应用 | 第35-37页 |
| 1.3.1.1 壳聚糖在抗菌中的应用 | 第35-36页 |
| 1.3.1.2 壳聚糖在抗氧化中的应用 | 第36-37页 |
| 1.4 美拉德反应概述及制备方法及研究进展 | 第37-45页 |
| 1.4.1 美拉德反应概述 | 第37页 |
| 1.4.2 壳聚糖的改性 | 第37-39页 |
| 1.4.3 美拉德反应产物的应用 | 第39-45页 |
| 1.4.3.1 美拉德反应产物的抗氧化活性与机理研究 | 第41-42页 |
| 1.4.3.2 美拉德反应产物的抗氧化活性 | 第42-43页 |
| 1.4.3.3 美拉德反应产物的抗菌活性 | 第43-45页 |
| 1.5 壳聚糖纳米粒子的制备方法的最新研究进展 | 第45-56页 |
| 1.5.1 纳米材料的简要概述 | 第45页 |
| 1.5.2 壳聚糖纳米材料的制备 | 第45-50页 |
| 1.5.2.1 离子交联法 | 第47-50页 |
| 1.5.3 壳聚糖纳米粒子的质量评价及影响因素分析 | 第50-51页 |
| 1.5.3.1 纳米粒子形态 | 第50-51页 |
| 1.5.3.2 纳米粒子的包裹效率 | 第51页 |
| 1.5.3.3 壳聚糖纳米粒子包裹物质的释放 | 第51页 |
| 1.5.4 壳聚糖纳米粒子在缓释和抗菌中的主要应用 | 第51-56页 |
| 1.5.4.1 壳聚糖纳米粒子在缓释中的应用 | 第51-53页 |
| 1.5.4.2 纳米粒子及壳聚糖纳米粒子的抗菌应用 | 第53-56页 |
| 1.6 论文研究主要内容 | 第56-60页 |
| 第二章 粘质沙雷氏菌B742和植物乳酸杆菌ATCC 8014连续两步发酵法提取甲壳素 | 第60-84页 |
| 2.1 引言 | 第60-61页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第61-68页 |
| 2.2.1 试剂和仪器 | 第61页 |
| 2.2.2 虾壳粉预处理和菌种保藏 | 第61-62页 |
| 2.2.3 粘质沙雷氏菌B742发酵条件的优化 | 第62页 |
| 2.2.4 植物乳酸杆菌ATCC 8014发酵条件的优化 | 第62-63页 |
| 2.2.5 粘质沙雷氏菌B742和植物乳酸杆菌ATCC 8014连续两步发酵 | 第63-65页 |
| 2.2.6 化学方法制备甲壳素 | 第65页 |
| 2.2.7 虾壳粉中物化参数的测定 | 第65-67页 |
| 2.2.7.1 总氮含量(TN)、甲壳素含量和蛋白质含量的测定 | 第65页 |
| 2.2.7.2 灰分的测定 | 第65-66页 |
| 2.2.7.3 pH和总滴定酸度的测定 | 第66页 |
| 2.2.7.4 蛋白酶和壳聚糖酶活的测定 | 第66-67页 |
| 2.2.7.5 粗脂肪的测定 | 第67页 |
| 2.2.8 细菌生长曲线的测定 | 第67-68页 |
| 2.2.9 提取的甲壳素的结构分析 | 第68页 |
| 2.2.9.1 扫描电镜(SEM)观察 | 第68页 |
| 2.2.9.2 傅里叶红外光谱(FT-IR)分析 | 第68页 |
| 2.2.9.3 X-射线衍射分析 | 第68页 |
| 2.2.10 数据统计与分析 | 第68页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第68-83页 |
| 2.3.1 虾壳粉的化学成分分析 | 第68-69页 |
| 2.3.2 细菌生长线的测定 | 第69-71页 |
| 2.3.3 优化粘质沙雷氏菌B742去蛋白质的处理条件 | 第71-73页 |
| 2.3.4 优化的植物乳酸杆菌ATCC 8014去灰分的处理条件 | 第73-76页 |
| 2.3.5 植物乳酸杆菌发酵中Ca含量的测定 | 第76-77页 |
| 2.3.6 连续两步发酵提取甲壳素的验证 | 第77-78页 |
| 2.3.7 SEM分析 | 第78-79页 |
| 2.3.8 提取的甲壳素和商品级的甲壳素的结构比较分析 | 第79-81页 |
| 2.3.8.1 FT-IR分析 | 第79-80页 |
| 2.3.8.2 XRD分析 | 第80-81页 |
| 2.3.9 粘质沙雷氏菌B742和植物乳酸杆菌ATCC 8014在微生物发酵中的应用 | 第81-83页 |
| 2.3.9.1 粘质沙雷氏菌B742在微生物发酵中的应用 | 第81-82页 |
| 2.3.9.2 植物乳酸杆菌在微生物发酵中的应用 | 第82-83页 |
| 2.4 本章小结 | 第83-84页 |
| 第三章 粘质沙雷氏菌B742突变提高蛋白酶和壳聚糖酶的酶活 | 第84-108页 |
| 3.1 引言 | 第84页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第84-91页 |
| 3.2.1 仪器与试剂 | 第84-85页 |
| 3.2.2 突变实验和滤纸片制备 | 第85-87页 |
| 3.2.2.1 单因素突变实验 | 第85页 |
| 3.2.2.2 滤纸片制备 | 第85-86页 |
| 3.2.2.3 组合因素突变实验 | 第86-87页 |
| 3.2.3 蛋白酶和壳聚糖酶的SDS-PAGE电泳 | 第87-88页 |
| 3.2.3.1 蛋白酶和壳聚糖酶的的纯化 | 第87页 |
| 3.2.3.2 SDS-PAGE电泳 | 第87-88页 |
| 3.2.4 结构分析 | 第88页 |
| 3.2.4.1 SEM分析 | 第88页 |
| 3.2.4.2 FT-IR分析 | 第88页 |
| 3.2.4.3 XRD分析 | 第88页 |
| 3.2.4.4 TGA-DSC分析 | 第88页 |
| 3.2.5 蛋白酶和壳聚糖酶的质谱分析 | 第88页 |
| 3.2.6 不同干扰条件对蛋白酶和壳聚糖酶酶活的影响 | 第88-90页 |
| 3.2.6.1 不同p H和温度对蛋白酶和壳聚糖酶酶活的影响 | 第88-90页 |
| 3.2.6.2 不同酶抑制剂和表面活性剂对蛋白酶和壳聚糖酶酶活的影响 | 第90页 |
| 3.2.7 分析方法 | 第90-91页 |
| 3.2.7.1 蛋白酶和壳聚糖酶酶活的测定 | 第90页 |
| 3.2.7.2 DP分析 | 第90页 |
| 3.2.7.3 致死率的计算 | 第90-91页 |
| 3.2.8 数据统计与分析 | 第91页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第91-107页 |
| 3.3.1 野生型和突变型粘质沙雷氏菌B742的菌落 | 第91-92页 |
| 3.3.2 单因素突变结果分析 | 第92-93页 |
| 3.3.3 组合因素突变结果分析 | 第93-94页 |
| 3.3.4 野生型和突变型粘质沙雷氏菌B742的SEM | 第94-97页 |
| 3.3.5 甲壳素制备的去蛋白质效率和酶活分析 | 第97-98页 |
| 3.3.6 去蛋白质前后的结构分析 | 第98-100页 |
| 3.3.7 SDS-PAGE和质谱分析 | 第100-104页 |
| 3.3.8 不同pH和温度对蛋白酶和壳聚糖酶酶活的影响 | 第104-106页 |
| 3.3.9 不同表面活性剂和酶抑制剂对蛋白酶和壳聚糖酶酶活的影响 | 第106页 |
| 3.3.10 突变的重复性和稳研究 | 第106-107页 |
| 3.4 本章小结 | 第107-108页 |
| 第四章 在优化的发酵条件下日本根霉M193发酵制备甲壳素脱乙酰酶和壳聚糖 | 第108-133页 |
| 4.1 引言 | 第108-109页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第109-117页 |
| 4.2.1 仪器与试剂 | 第109页 |
| 4.2.2 日本根霉M193的活化和扩培 | 第109-110页 |
| 4.2.3 Plackett–Burman设计 | 第110-111页 |
| 4.2.4 Plackett-Burman设计优化的因素和水平的正交设计 | 第111-113页 |
| 4.2.5 壳聚糖的制备 | 第113-114页 |
| 4.2.5.1 化学法制备壳聚糖 | 第113页 |
| 4.2.5.2 微生物法制备甲壳素和壳聚糖 | 第113-114页 |
| 4.2.6 甲壳素脱乙酰酶(CDA)酶活、壳聚糖去乙酰度和分子量的测定 | 第114-116页 |
| 4.2.6.1 CDA酶活的测定 | 第114-115页 |
| 4.2.6.2 壳聚糖去乙酰度(DDA%)测定 | 第115页 |
| 4.2.6.3 壳聚糖分子量的测定 | 第115-116页 |
| 4.2.7 日本根霉M193生长曲线的绘制 | 第116页 |
| 4.2.8 提取的壳聚糖和商品级的壳聚糖的结构分析 | 第116-117页 |
| 4.2.8.1 日本根霉M193的微观结构观察 | 第116-117页 |
| 4.2.8.1.1 显微镜观察 | 第116-117页 |
| 4.2.8.1.2 扫描电镜(SEM)观察孢子 | 第117页 |
| 4.2.8.1.3 FT-IR 分析 | 第117页 |
| 4.2.8.1.4 X-射线衍射 | 第117页 |
| 4.2.8.1.5 TGA-DSC 分析 | 第117页 |
| 4.2.8.1.6 ~(13)C 的核磁共振 | 第117页 |
| 4.2.9 数据统计与分析 | 第117页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第117-132页 |
| 4.3.1 Plackett-Burman设计优化日本根霉M193发酵的培养条件 | 第117-119页 |
| 4.3.2 正交设计优化日本根霉M193的发酵条件 | 第119-122页 |
| 4.3.3 日本根霉M193发酵脱乙酰的研究 | 第122-124页 |
| 4.3.4 日本根酶M193的生长曲线 | 第124-125页 |
| 4.3.5 日本根酶M193的微观结构 | 第125-128页 |
| 4.3.5.1 日本根酶M193的显微镜观察 | 第125页 |
| 4.3.5.2 日本根酶M193孢子的扫描电镜观察 | 第125-126页 |
| 4.3.5.3 日本根酶M193孢子、发酵液中甲壳素和壳聚糖的SEM | 第126-128页 |
| 4.3.6 提取的壳聚糖和商品级的壳聚糖的结构分析 | 第128-132页 |
| 4.3.6.1 FT-IR分析 | 第128页 |
| 4.3.6.2 TGA-DCS分析 | 第128-130页 |
| 4.3.6.3 XRD分析 | 第130-131页 |
| 4.3.6.4 ~(13)C CP/MAS-NMR分析 | 第131-132页 |
| 4.4 本章小结 | 第132-133页 |
| 第五章 高强度的超声波提高壳聚糖-果糖美拉德反应产物的水溶性 | 第133-153页 |
| 5.1 引言 | 第133页 |
| 5.2 实验材料和方法 | 第133-137页 |
| 5.2.1 仪器与试剂 | 第133-134页 |
| 5.2.2 α-壳聚糖-果糖的美拉德反应 | 第134-135页 |
| 5.2.3 美拉德反应产物的产率和溶解度测定 | 第135页 |
| 5.2.4 美拉德反应溶液的吸光度、颜色和荧光光谱分析 | 第135-136页 |
| 5.2.5 美拉德反应产物的抗氧化活性分析 | 第136页 |
| 5.2.5.1 还原力测定 | 第136页 |
| 5.2.5.2 DPPH清除能力测定 | 第136页 |
| 5.2.5.3 ORAC测定 | 第136页 |
| 5.2.6 α-壳聚糖-果糖美拉德反应产物的抗菌特性 | 第136-137页 |
| 5.2.7 α-壳聚糖-果糖美拉德反应产物的结构分析 | 第137页 |
| 5.2.7.1 FT-IR分析 | 第137页 |
| 5.2.7.2 TGA-DSC分析 | 第137页 |
| 5.2.8 数据统计与分析 | 第137页 |
| 5.3 结果和讨论 | 第137-152页 |
| 5.3.1 美拉德反应产物的理化特性分析 | 第137-143页 |
| 5.3.1.1 美拉德反应溶液的UV吸光度和荧光特性 | 第137-139页 |
| 5.3.1.2 美拉德反应溶液的pH和总可溶性固形物的变化 | 第139-141页 |
| 5.3.1.3 α-壳聚糖-果糖美拉德反应溶液的的颜色分析 | 第141-143页 |
| 5.3.2 α-壳聚糖-果糖的美拉德反应产物的产率和溶解度 | 第143-144页 |
| 5.3.3 美拉德反应产物的特征性分析 | 第144-149页 |
| 5.3.3.1 FT-IR分析 | 第144-146页 |
| 5.3.3.2 美拉德反应产物的TGA-DSC分析 | 第146-149页 |
| 5.3.4 美拉德反应产物的抗氧化分析 | 第149-151页 |
| 5.3.4.1 还原力 | 第149页 |
| 5.3.4.2 DPPH自由基清除能力 | 第149页 |
| 5.3.4.3 ORAC分析 | 第149-151页 |
| 5.3.5 α-壳聚糖-果糖美拉德反应产物的的抗菌活性 | 第151-152页 |
| 5.4 本章小结 | 第152-153页 |
| 第六章 茶多酚-ZN复合物装载的壳聚糖纳米粒子的制备和抗氧化功能应用 | 第153-179页 |
| 6.1 引言 | 第153-154页 |
| 6.2 实验材料和方法 | 第154-160页 |
| 6.2.1 仪器与试剂 | 第154页 |
| 6.2.2 α-壳聚糖的制备、β-壳聚糖的解聚和 α-和 β-壳聚糖的解聚和纯化 | 第154-155页 |
| 6.2.3 茶多酚-Zn复合物的制备 | 第155页 |
| 6.2.4 制备 β-壳聚糖纳米粒子的条件优化 | 第155-156页 |
| 6.2.5 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的制备 | 第156-157页 |
| 6.2.6 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 β-壳聚糖纳米粒子的抗氧化活性分析 | 第157-158页 |
| 6.2.6.1 还原力测定 | 第157页 |
| 6.2.6.2 DPPH清除能力测定 | 第157-158页 |
| 6.2.6.3 ORAC测定 | 第158页 |
| 6.2.6.4 铁和铜离子清除能力 | 第158页 |
| 6.2.7 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的形态学观察 | 第158页 |
| 6.2.7.1 TEM分析 | 第158页 |
| 6.2.7.2 AFM分析 | 第158页 |
| 6.2.8 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的特征性分析 | 第158页 |
| 6.2.8.1 FT-IR分析 | 第158页 |
| 6.2.8.2 TGA-DSC分析 | 第158页 |
| 6.2.9 壳聚糖纳米粒子的荧光和毒理学实验 | 第158-159页 |
| 6.2.9.1 异硫氰酸荧光素标记的壳聚糖的制备 | 第158-159页 |
| 6.2.9.2 细胞培养和细胞活力测定 | 第159页 |
| 6.2.9.3 EBM-2 细胞吞噬纳米粒子荧光检测 | 第159页 |
| 6.2.10 数据统计与分析 | 第159-160页 |
| 6.3 结果和讨论 | 第160-178页 |
| 6.3.1 α-和 β-壳聚糖纳米粒子物化特征 | 第160-163页 |
| 6.3.1.1 β-壳聚糖纳米粒子制备条件的优化 | 第160页 |
| 6.3.1.2 α-和 β-壳聚糖纳米粒子在优化条件下的物化特征 | 第160-163页 |
| 6.3.2 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 β-壳聚糖纳米粒子的结构表征 | 第163-166页 |
| 6.3.2.1 TEM测试 | 第163-164页 |
| 6.3.2.2 AFM测试 | 第164-166页 |
| 6.3.3 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的结构分析 | 第166-169页 |
| 6.3.3.1 FT-IR分析 | 第166-167页 |
| 6.3.3.2 TGA-DSC分析 | 第167-169页 |
| 6.3.4 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的抗氧化能力分析 | 第169-172页 |
| 6.3.4.1 还原力 | 第169页 |
| 6.3.4.2 DPPH自由基清除能力 | 第169-170页 |
| 6.3.4.3 ORAC分析 | 第170-172页 |
| 6.3.4.4 重金属清除能力 | 第172页 |
| 6.3.5 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的体外释放 | 第172-174页 |
| 6.3.6 茶多酚和茶多酚-Zn复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的毒理学分析 | 第174-177页 |
| 6.3.7 茶多酚和茶多酚-Zn 复合物装载的 α-和 β-壳聚糖纳米粒子的荧光特性分析 | 第177-178页 |
| 6.4 本章小结 | 第178-179页 |
| 第七章 儿茶素和儿茶素-ZN复合物装载的不同粒径的壳聚糖纳米粒子的制备和抗菌功能应用 | 第179-198页 |
| 7.1 引言 | 第179-180页 |
| 7.2 实验材料和方法 | 第180-184页 |
| 7.2.1 仪器与试剂 | 第180页 |
| 7.2.2 低分子量的 β-壳聚糖的制备 | 第180页 |
| 7.2.3 β-壳聚糖纳米粒子的制备的条件优化 | 第180-181页 |
| 7.2.4 儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径的 β-壳聚糖纳米粒子的制备 | 第181-182页 |
| 7.2.5 儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径的 β-壳聚糖纳米粒子的理化特征分析 | 第182页 |
| 7.2.6 儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径 β-壳聚糖纳米粒子的稳定性分析 | 第182页 |
| 7.2.7 FT-IR分析 | 第182页 |
| 7.2.8 儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径 β-壳聚糖纳米粒子的抗菌特性分析 | 第182-184页 |
| 7.2.8.1 生长曲线的测定 | 第182页 |
| 7.2.8.2 抑菌圈的测定 | 第182-183页 |
| 7.2.8.3 最小抑菌浓度和最小细菌浓度的测定 | 第183-184页 |
| 7.2.9 数据统计与分析 | 第184页 |
| 7.3 结果和讨论 | 第184-197页 |
| 7.3.1 制备儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径的 β-壳聚糖纳米粒子的条件优化 | 第184-186页 |
| 7.3.2 儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径 β-壳聚糖纳米粒子的理化特性分析 | 第186-188页 |
| 7.3.3 儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径 β-壳聚糖纳米粒子的稳定性 | 第188-191页 |
| 7.3.4 FT-IR分析 | 第191-193页 |
| 7.3.5 儿茶素和儿茶素-Zn复合物装载的不同粒径 β-壳聚糖纳米粒子的抗菌特性分析 | 第193-197页 |
| 7.3.5.1 抑菌生长曲线的测定 | 第193-194页 |
| 7.3.5.2 最小抑菌浓度和最小细菌浓度的测定 | 第194页 |
| 7.3.5.3 抑菌圈的测定 | 第194-197页 |
| 7.4 本章小结 | 第197-198页 |
| 第八章 全文总结、创新点与展望 | 第198-202页 |
| 参考文献 | 第202-229页 |
| 符号与标记(附录1) | 第229-231页 |
| 致谢 | 第231-233页 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 | 第233-234页 |
