中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第12-17页 |
第一部分 初步探讨体外囊液和原头蚴对小鼠脾细胞产生IL-22的影响 | 第17-33页 |
1 材料 | 第17-18页 |
1.1 主要仪器和试剂 | 第17-18页 |
1.2 细粒棘球蚴采集及小鼠来源 | 第18页 |
2 方法 | 第18-27页 |
2.1 原头蚴制备 | 第18-19页 |
2.2 小鼠脾细胞悬液制备 | 第19-20页 |
2.3 主要溶剂配制及保存 | 第20-21页 |
2.4 建立体外细粒棘球蚴及囊液感染小鼠细胞模型 | 第21页 |
2.5 检测ELISA细粒棘球蚴感染小鼠脾细胞细胞培养上清中IL-22表达量 | 第21-22页 |
2.6 流式细胞染色和检测 | 第22页 |
2.7 试剂盒提取检测细粒棘球蚴感染小鼠脾细胞总RNA | 第22-23页 |
2.8 RNA逆转录合成cDNA | 第23页 |
2.9 PCR反应 | 第23-25页 |
2.10 实时荧光定量PCR检测细粒棘球蚴对小鼠脾细胞IL-22基因表达 | 第25-26页 |
2.11 统计学分析 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-32页 |
3.1 不同浓度原头蚴对小鼠脾细胞分泌IL-22及IL-22mRNA表达的影响 | 第27-28页 |
3.2 不同蛋白浓度囊液对小鼠脾细胞IL-22分泌及IL-22mRNA表达的影响 | 第28-30页 |
3.3 不同作用时间原头蚴对小鼠脾细胞CD4~+IL-22~+T细胞比例的影响 | 第30-31页 |
3.4 不同作用时间囊液刺激小鼠脾细胞CD4~+ IL-22~+ T细胞比例增加 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-33页 |
第二部分 细粒棘球蚴感染早期阶段IL-22表达的初步分析 | 第33-56页 |
1 材料和试剂 | 第33-34页 |
2 方法 | 第34-41页 |
2.1 细粒棘球蚴采集、形态观察、活性鉴定同第一部分 | 第34页 |
2.2 细粒棘球蚴感染动物模型建立 | 第34页 |
2.3 小鼠脾细胞制备同第一部分 | 第34页 |
2.4 流式细胞检测CD4~+ IFN-γ~+、CD4~+ IFN-γ- IL-22~+ IL17、CD4~+ IFN-γ- IL-22~+ IL-17~+步骤 | 第34-35页 |
2.5 小鼠肝及肠细胞总RNA提取 | 第35页 |
2.6 PCR反应 | 第35-38页 |
2.7 ELISA法检测细粒棘球蚴早期感染小鼠外周血中各炎症相关细胞因子含量 | 第38-40页 |
2.8 统计学分析同第一部分 | 第40-41页 |
3 结果 | 第41-54页 |
3.1 细粒棘球蚴感染模型早期小鼠脾细胞产生IL-22相关CD4~+T细胞变化 | 第41-42页 |
3.2 细粒棘球蚴感染早期Th1细胞比例升高 | 第42-44页 |
3.3 细粒棘球蚴感染早期Th17细胞比例升高 | 第44-47页 |
3.4 细粒棘球蚴感染早期Th22细胞比例升高 | 第47-49页 |
3.5 细粒棘球蚴感染早期肝脏及肠管IL-22R1 m RNA表达水平增加 | 第49-51页 |
3.6 细粒棘球蚴感染早期TGF-β1 表达升高 | 第51-52页 |
3.7 体外加入重组细胞因子IL-22促进感染小鼠脾细胞IFN-γ的表达 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
4.1 Th1细胞、细胞因子IFN-γ以及其主要转录因子T-bet在细粒棘球蚴感染早期的变化 | 第54页 |
4.2 Th17 细胞、细胞因子 IL-17 以及转录因子 RORγι在细粒棘球蚴感染早期的变化 | 第54-55页 |
4.3 Th22 细胞、细胞因子 IL-22、IL-22R1 以及转录因子 Ahr 在细粒棘球蚴感染早期变化 | 第55页 |
4.4 TGF-β在细粒棘球蚴感染早期阶段的表达水平 | 第55-56页 |
4.5 体外加入重组细胞因子 IL-22 促进感染小鼠脾细胞 IFN-γ的表达 | 第56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
文献综述 | 第61-70页 |
参考文献 | 第66-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71-72页 |
导师评阅表 | 第72页 |