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PtFLC转录本超表达载体构建及遗传转化体系优化

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
缩略词表第11-12页
1 前言第12-25页
    1.1 课题的提出第12-13页
    1.2 植物成花调控途径第13-17页
        1.2.1 光周期途径(photoperiod pathway)第14页
        1.2.2 春化途径(vernalization pathway)第14-15页
        1.2.3 赤霉素途径(GA pathway)第15-16页
        1.2.4 自主途径(autonomous pathway)第16页
        1.2.5 年龄途径(age pathway)第16-17页
        1.2.6 成花途径的整合第17页
    1.3 柑橘遗传转化研究概况第17-21页
        1.3.1 柑橘遗传转化方法第18-19页
        1.3.2 柑橘遗传转化受体材料第19-20页
        1.3.3 柑橘遗传转化标记基因第20-21页
    1.4 FLC研究进展概况第21-25页
        1.4.1 FLC在开花调控途径中作用第21-22页
        1.4.2 FLC在早实枳中的研究第22-25页
2 材料和方法第25-40页
    2.1 实验材料第25-26页
        2.1.1 植物材料第25页
        2.1.2 菌种和质粒第25-26页
    2.2 载体构建第26-34页
        2.2.1 PtFLC各转录本及EGFP基因的PCR扩增第26-28页
        2.2.2 目的片段回收、克隆第28-29页
        2.2.3 大肠杆菌转化、检测与质粒提取第29-31页
        2.2.4 质粒酶切、回收、连接与大肠杆菌转化第31-33页
        2.2.5 农杆菌EHA105 转化与保存第33-34页
    2.3 根癌农杆菌介导的洋葱表皮细胞的瞬时表达第34-35页
    2.4 根癌农杆菌介导的早实枳遗传转化第35-38页
        2.4.1 早实枳遗传转化使用的各培养基配方第35-36页
        2.4.2 早实枳外植体的准备第36页
        2.4.3 农杆菌侵染液的准备与制备第36-37页
        2.4.4 农杆菌侵染外植体与共培养第37页
        2.4.5 筛选培养、再生第37-38页
    2.5 根癌农杆菌介导烟草遗传转化第38页
        2.5.1 烟草遗传转化使用的各培养基配方第38页
        2.5.2 烟草遗传转化步骤第38页
    2.6 根癌农杆菌介导马叙愈伤组织遗传转化第38-39页
        2.6.1 愈伤组织遗传转化使用的各培养基配方第38-39页
        2.6.2 愈伤组织遗传转化步骤第39页
    2.7GFP荧光检测第39-40页
3 结果与分析第40-53页
    3.1 PtFLC超表达载体构建第40-42页
    3.2 PtFLC在洋葱表皮细胞中的瞬时表达第42-43页
    3.3 早实枳的遗传转化第43-51页
        3.3.1 早实枳外植体生长第43-44页
        3.3.2 早实枳筛选与再生第44-51页
    3.4 根癌农杆菌介导的马叙葡萄柚愈伤组织遗传转化第51-52页
    3.5 根癌农杆菌介导的烟草遗传转化第52-53页
4 讨论第53-57页
    4.1 早实枳遗传转化过程中筛选剂的选择第53-54页
        4.1.1 潮霉素(hygromycin)第53页
        4.1.2 卡那霉素(kanamycin)第53-54页
    4.2 农杆菌介导早实枳遗传转化的优劣第54-56页
        4.2.1 根癌农杆菌第54-55页
        4.2.2 发根农杆菌第55-56页
    4.3 研究展望第56-57页
附录第57-59页
    附录Ⅰ:MS培养基母液配方第57-58页
    附录Ⅱ:MT培养基母液配方第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66页

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