摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-25页 |
1.1 课题的提出 | 第12-13页 |
1.2 植物成花调控途径 | 第13-17页 |
1.2.1 光周期途径(photoperiod pathway) | 第14页 |
1.2.2 春化途径(vernalization pathway) | 第14-15页 |
1.2.3 赤霉素途径(GA pathway) | 第15-16页 |
1.2.4 自主途径(autonomous pathway) | 第16页 |
1.2.5 年龄途径(age pathway) | 第16-17页 |
1.2.6 成花途径的整合 | 第17页 |
1.3 柑橘遗传转化研究概况 | 第17-21页 |
1.3.1 柑橘遗传转化方法 | 第18-19页 |
1.3.2 柑橘遗传转化受体材料 | 第19-20页 |
1.3.3 柑橘遗传转化标记基因 | 第20-21页 |
1.4 FLC研究进展概况 | 第21-25页 |
1.4.1 FLC在开花调控途径中作用 | 第21-22页 |
1.4.2 FLC在早实枳中的研究 | 第22-25页 |
2 材料和方法 | 第25-40页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 菌种和质粒 | 第25-26页 |
2.2 载体构建 | 第26-34页 |
2.2.1 PtFLC各转录本及EGFP基因的PCR扩增 | 第26-28页 |
2.2.2 目的片段回收、克隆 | 第28-29页 |
2.2.3 大肠杆菌转化、检测与质粒提取 | 第29-31页 |
2.2.4 质粒酶切、回收、连接与大肠杆菌转化 | 第31-33页 |
2.2.5 农杆菌EHA105 转化与保存 | 第33-34页 |
2.3 根癌农杆菌介导的洋葱表皮细胞的瞬时表达 | 第34-35页 |
2.4 根癌农杆菌介导的早实枳遗传转化 | 第35-38页 |
2.4.1 早实枳遗传转化使用的各培养基配方 | 第35-36页 |
2.4.2 早实枳外植体的准备 | 第36页 |
2.4.3 农杆菌侵染液的准备与制备 | 第36-37页 |
2.4.4 农杆菌侵染外植体与共培养 | 第37页 |
2.4.5 筛选培养、再生 | 第37-38页 |
2.5 根癌农杆菌介导烟草遗传转化 | 第38页 |
2.5.1 烟草遗传转化使用的各培养基配方 | 第38页 |
2.5.2 烟草遗传转化步骤 | 第38页 |
2.6 根癌农杆菌介导马叙愈伤组织遗传转化 | 第38-39页 |
2.6.1 愈伤组织遗传转化使用的各培养基配方 | 第38-39页 |
2.6.2 愈伤组织遗传转化步骤 | 第39页 |
2.7GFP荧光检测 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-53页 |
3.1 PtFLC超表达载体构建 | 第40-42页 |
3.2 PtFLC在洋葱表皮细胞中的瞬时表达 | 第42-43页 |
3.3 早实枳的遗传转化 | 第43-51页 |
3.3.1 早实枳外植体生长 | 第43-44页 |
3.3.2 早实枳筛选与再生 | 第44-51页 |
3.4 根癌农杆菌介导的马叙葡萄柚愈伤组织遗传转化 | 第51-52页 |
3.5 根癌农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-57页 |
4.1 早实枳遗传转化过程中筛选剂的选择 | 第53-54页 |
4.1.1 潮霉素(hygromycin) | 第53页 |
4.1.2 卡那霉素(kanamycin) | 第53-54页 |
4.2 农杆菌介导早实枳遗传转化的优劣 | 第54-56页 |
4.2.1 根癌农杆菌 | 第54-55页 |
4.2.2 发根农杆菌 | 第55-56页 |
4.3 研究展望 | 第56-57页 |
附录 | 第57-59页 |
附录Ⅰ:MS培养基母液配方 | 第57-58页 |
附录Ⅱ:MT培养基母液配方 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66页 |