中文摘要 | 第4-14页 |
Abstract | 第14-26页 |
前言 | 第29-38页 |
1. 结核病现状与结核疫苗研制现状 | 第29-30页 |
2. 抗结核免疫保护机制 | 第30-32页 |
3. 黏膜局部免疫对于抗结核免疫保护的作用 | 第32-33页 |
4. 本课题的新型结核疫苗设计理念:多表位蛋白支架疫苗 | 第33-36页 |
5. 黏膜递送载体 | 第36-38页 |
第一部分 多表位DNA疫苗的设计、构建、表达与免疫原性鉴定 | 第38-59页 |
1. 引言 | 第38-40页 |
2. 材料与方法 | 第40-47页 |
2.1 实验材料 | 第40-41页 |
2.2 实验方法 | 第41-47页 |
3. 结果 | 第47-57页 |
3.1 以HSP65为骨架的嵌合多表位核酸疫苗PES的分子设计 | 第47-50页 |
3.2 真核质粒pPES、pHSP65、p5pep、pHSP65-pep的构建和鉴定 | 第50-52页 |
3.3 重组HSP65蛋白的原核表达纯化 | 第52-53页 |
3.4 pPES质粒的体外真核表达 | 第53-54页 |
3.5 pPES疫苗的免疫原性及嵌合蛋白载体表达的优越性 | 第54-57页 |
4. 讨论 | 第57-59页 |
第二部分 脱乙酰壳聚糖组装的结核DNA疫苗诱导的黏膜免疫与保护效果 | 第59-74页 |
1. 引言 | 第59-60页 |
2. 实验材料与方法 | 第60-63页 |
2.1 试验材料 | 第60-61页 |
2.2 实验方法 | 第61-63页 |
3. 结果 | 第63-72页 |
3.1 chitosan-pPES疫苗滴鼻免疫诱导的特异性体液免疫应答 | 第63-64页 |
3.2 CS-pPES疫苗滴鼻免疫诱导的特异性全身(脾脏)细胞免疫 | 第64-67页 |
3.3 CS-pPES疫苗滴鼻免疫诱导的特异性肺局部黏膜细胞免疫 | 第67-70页 |
3.4 CS-pPES疫苗滴鼻免疫诱导的抗结核免疫保护 | 第70-72页 |
4. 讨论 | 第72-74页 |
第三部分 甘露糖化壳聚糖增强DNA疫苗的黏膜免疫与保护效果 | 第74-96页 |
1. 引言 | 第74-75页 |
2. 实验材料和方法 | 第75-76页 |
2.1 试剂材料 | 第75页 |
2.2 实验方法 | 第75-76页 |
3. 结果 | 第76-94页 |
3.1 CS-DNA和MCS-DNA复合物的理化特性 | 第76-78页 |
3.2 MCS-pPES疫苗滴鼻免疫诱生的特异性抗体免疫应答 | 第78-80页 |
3.3 MCS-pPES疫苗滴鼻免疫诱导的全身(脾脏)特异性T细胞免疫 | 第80-86页 |
3.4 MCS-pPES疫苗滴鼻免疫诱导的肺黏膜局部特异性T细胞免疫 | 第86-92页 |
3.5 MCS-pPES黏膜疫苗滴鼻免疫诱导的免疫保护 | 第92-94页 |
4. 讨论 | 第94-96页 |
第四部分 MCS-PPES增强黏膜免疫应答的机制探讨 | 第96-103页 |
1. 引言 | 第96-97页 |
2. 试验材料与方法 | 第97-98页 |
2.1 试验材料 | 第97页 |
2.2. 实验方法 | 第97-98页 |
3. 实验结果 | 第98-101页 |
3.1 β-半乳糖苷酶为报告抗原原位组化检测MCS-DNA的肺脏表达效率 | 第98-99页 |
3.2. HSP65为报告抗原原位免疫组化检测MCS-DNA的肺脏表达效率 | 第99-100页 |
3.3 以FITC示踪MCS-DNA的肺脏巨噬细胞靶向情况 | 第100页 |
3.4 以FITC示踪MCS-DNA的巨噬细胞摄取能力 | 第100-101页 |
4. 讨论 | 第101-103页 |
小结 | 第103-105页 |
参考文献 | 第105-111页 |
综述 | 第111-126页 |
参考文献 | 第117-126页 |
附录 | 第126-127页 |
缩写词表 | 第127-128页 |
致谢 | 第128页 |