| 前言 | 第5-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 第1章 文献综述 | 第19-30页 |
| 1.1 前列腺癌的化学治疗 | 第19-22页 |
| 1.1.1 化学治疗 | 第19-20页 |
| 1.1.2 紫杉醇的作用机理 | 第20-21页 |
| 1.1.3 P53与化疗抵抗性 | 第21-22页 |
| 1.2 锌与肿瘤 | 第22-24页 |
| 1.2.1 锌的功能 | 第22页 |
| 1.2.2 锌与前列腺癌 | 第22-23页 |
| 1.2.3 锌与p53 | 第23-24页 |
| 1.3 P53与肿瘤 | 第24-30页 |
| 1.3.1 MDM2的生物学特性 | 第24-25页 |
| 1.3.2 E3泛素连接酶 | 第25页 |
| 1.3.3 P53的稳定性 | 第25-27页 |
| 1.3.4 泛素蛋白酶体途径 | 第27-28页 |
| 1.3.5 泛素化降解途径调节p53活性 | 第28-30页 |
| 第2章 材料与方法 | 第30-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.1.1 细胞 | 第30页 |
| 2.1.2 质粒及菌株 | 第30页 |
| 2.2 实验试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.1 细胞培养相关试剂 | 第30页 |
| 2.2.2 RT-PCR相关试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.3 Western-blot的相关试剂 | 第31页 |
| 2.2.4 其它相关试剂 | 第31页 |
| 2.3 实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.4 实验方法 | 第32-39页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第33页 |
| 2.4.2 MTT确定锌联合紫杉醇的作用浓度 | 第33页 |
| 2.4.3 细胞形态学分析 | 第33页 |
| 2.4.4 克隆形成实验 | 第33-34页 |
| 2.4.5 免疫荧光 | 第34页 |
| 2.4.6 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第34页 |
| 2.4.7 流式细胞术检测线粒体膜电势 | 第34-35页 |
| 2.4.8 RT-PCR检测mRNA的表达水平 | 第35-36页 |
| 2.4.8.1 mRNA的提取以及逆转录PCR | 第35页 |
| 2.4.8.2 半定量RT-PCR | 第35-36页 |
| 2.4.9 Western-blot检测蛋白表达水平 | 第36-39页 |
| 2.4.9.1 提取总蛋白 | 第37页 |
| 2.4.9.2 测定总蛋白浓度 | 第37页 |
| 2.4.9.3 SDS-PAGE配置及电泳 | 第37页 |
| 2.4.9.4 转膜 | 第37-38页 |
| 2.4.9.5 牛奶封闭及杂交 | 第38页 |
| 2.4.9.6 ECL显色 | 第38-39页 |
| 2.4.10 免疫共沉淀检测蛋白之间的相互作用 | 第39页 |
| 2.4.11 CHX检测蛋白的半衰期 | 第39页 |
| 2.5 统计分析 | 第39-40页 |
| 第3章 实验结果 | 第40-52页 |
| 3.1 MTT确定锌联合紫杉醇的最佳浓度 | 第40-41页 |
| 3.2 光镜下观察细胞形态 | 第41页 |
| 3.3 克隆形成实验观察细胞的增殖能力 | 第41-42页 |
| 3.4 免疫荧光观察细胞凋亡及蛋白表达 | 第42-43页 |
| 3.5 流式细胞术检测细胞的凋亡 | 第43-44页 |
| 3.6 流式细胞术检测线粒体的膜电位 | 第44-45页 |
| 3.7 RT-PCR检测凋亡相关基因水平变化 | 第45-46页 |
| 3.8 Western-blot检测蛋白表达水平变化 | 第46-47页 |
| 3.9 RT-PCR检测p53以及MDM2基因表达水平 | 第47-48页 |
| 3.10 Western-blot检测p53以及MDM2蛋白表达水平 | 第48-49页 |
| 3.11 免疫共沉淀检测p53与MDM2的结合能力 | 第49-50页 |
| 3.12 CHX检测MDM2以及p53的半衰期 | 第50-52页 |
| 第4章 讨论 | 第52-58页 |
| 第5章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 在读期间所取得的科研成果 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
