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农杆菌介导的大白菜遗传转化体系的建立

摘要第9-10页
Abstract第10页
第一章 前言第11-23页
    1.1 植物基因工程技术第11-15页
        1.1.1 植物基因工程技术的发展第11页
        1.1.2 植物转基因技术的方法及原理第11-14页
        1.1.3 植物基因工程技术的应用第14-15页
    1.2 大白菜再生体系的研究进展第15-18页
        1.2.1 研究进展第15页
        1.2.2 大白菜离体组织再生的影响因素第15-18页
    1.3 农杆菌介导的植物转基因方法的研究第18-22页
        1.3.1 转化机理第18页
        1.3.2 影响遗传转化的因素第18-22页
    1.4 本研究的主要内容第22页
    1.5 本研究的目的及意义第22-23页
第二章 大白菜离体组织再生体系的优化第23-31页
    2.1 材料与方法第23-25页
        2.1.1 试验材料第23页
        2.1.2 无菌苗的培育第23页
        2.1.3 外植体类型的筛选第23-24页
        2.1.4 蔗糖、6-BA、AgNO_3浓度的筛选第24页
        2.1.5 优化再生体系的重复性试验第24页
        2.1.6 不定芽的生根诱导第24页
        2.1.7 再生植株的驯化第24页
        2.1.8 统计方法第24-25页
    2.2 结果与分析第25-29页
        2.2.1 外植体类型对不定芽分化的影响第25-26页
        2.2.2 蔗糖浓度对不定芽分化的影响第26页
        2.2.3 AgNO_3浓度对不定芽分化的影响第26-27页
        2.2.4 6-BA对不定芽分化的影响第27页
        2.2.5 优化体系的稳定性检测第27-28页
        2.2.6 NAA和IBA对不定芽生根的影响第28-29页
    2.3 讨论第29-30页
        2.3.1 外植体类型对再生的影响第29页
        2.3.2 蔗糖、6-BA、硝酸银浓度的对再生的影响第29-30页
    2.4 小结第30-31页
第三章 大白菜遗传转化体系的建立第31-52页
    3.1 材料与方法第31-38页
        3.1.1 试验材料第31页
        3.1.2 重组质粒的构建第31-34页
        3.1.3 大肠杆菌转化法第34页
        3.1.4 大肠杆菌菌液的PCR检测第34页
        3.1.5 农杆菌的制备第34页
        3.1.6 遗传转化体系的建立第34-36页
        3.1.7 转基因植株的检测第36-37页
        3.1.8 转化体系的重复性试验第37-38页
        3.1.9 抗性芽的增殖第38页
    3.2 结果与分析第38-49页
        3.2.1 540-543、541-543表达载体的构建第38-39页
        3.2.2 农杆菌工程菌的制备与检测第39页
        3.2.3 抗生素Hyg对遗传转化的影响第39-42页
        3.2.4 特美汀抑菌浓度的确定第42页
        3.2.5 预培养时间对遗传转化效率的影响第42-43页
        3.2.6 抗性芽的生根诱导第43-44页
        3.2.7 转基因植株的鉴定第44-47页
        3.2.8 转化体系的稳定性检测第47-48页
        3.2.9 抗性芽的增殖结果第48-49页
    3.3 讨论第49-50页
        3.3.1 抗生素的选择与使用第49页
        3.3.2 预培养时间对遗传转化的影响第49-50页
        3.3.3 共培养与乙酰丁香酮第50页
        3.3.4 转基因植株的生根培养第50页
        3.3.5 转基因植株的检测第50页
    3.4 小结第50-52页
结论第52-53页
参考文献第53-60页
附录第60-61页
致谢第61-62页

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