| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 1 绪论 | 第16-48页 |
| 1.1 引言 | 第16页 |
| 1.2 疫苗免疫学概述 | 第16-28页 |
| 1.2.1 疫苗概述 | 第16-19页 |
| 1.2.2 乙肝疫苗概述 | 第19-22页 |
| 1.2.3 免疫系统概述 | 第22页 |
| 1.2.4 免疫应答概述 | 第22-28页 |
| 1.3 疫苗佐剂概述 | 第28-39页 |
| 1.3.1 免疫刺激分子佐剂 | 第29-33页 |
| 1.3.2 颗粒型佐剂 | 第33-39页 |
| 1.4 颗粒的理化性质对佐剂效果的影响 | 第39-44页 |
| 1.4.1 粒径 | 第39-40页 |
| 1.4.2 表面电荷 | 第40-41页 |
| 1.4.3 功能性分子的修饰 | 第41-43页 |
| 1.4.4 其它因素 | 第43-44页 |
| 1.5 立题依据和研究目标 | 第44-48页 |
| 1.5.1 立题依据 | 第44-45页 |
| 1.5.2 研究目标及策略 | 第45-48页 |
| 2 碳酸钙微球制备及表面电荷对免疫效果影响研究 | 第48-74页 |
| 2.1 引言 | 第48-49页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第49-58页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第49-50页 |
| 2.2.2 实验设备和仪器 | 第50页 |
| 2.2.3 碳酸钙微球的制备方法 | 第50-51页 |
| 2.2.4 碳酸钙微球的性质表征 | 第51-52页 |
| 2.2.5 微球对抗原的装载 | 第52页 |
| 2.2.6 BMDCs的提取与培养 | 第52-53页 |
| 2.2.7 碳酸钙微球的细胞毒性评价 | 第53-54页 |
| 2.2.8 碳酸钙微球诱导BMDCs活化 | 第54页 |
| 2.2.9 疫苗制剂中细菌内毒素的检测 | 第54页 |
| 2.2.10 载HBsAg碳酸钙微球疫苗对小鼠的免疫效果 | 第54-57页 |
| 2.2.11 统计分析 | 第57-58页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第58-71页 |
| 2.3.1 碳酸钙微球的制备与表征 | 第58-62页 |
| 2.3.2 载抗原碳酸钙微球的制备 | 第62-64页 |
| 2.3.3 载抗原碳酸钙微球对BMDCs的活化作用 | 第64-65页 |
| 2.3.4 不同表面电荷的碳酸钙微球的制备与表征 | 第65-66页 |
| 2.3.5 脾细胞体外增殖 | 第66-67页 |
| 2.3.6 脾细胞上清中细胞因子分泌水平 | 第67-68页 |
| 2.3.7 淋巴细胞活化 | 第68-69页 |
| 2.3.8 血清抗体水平 | 第69-71页 |
| 2.4 本章小结 | 第71-74页 |
| 3 不同粒径的碳酸钙微球的制备及免疫效果评价 | 第74-96页 |
| 3.1 引言 | 第74-75页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第75-82页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第75-76页 |
| 3.2.2 实验设备和仪器 | 第76-77页 |
| 3.2.3 不同粒径的碳酸钙微球的制备 | 第77页 |
| 3.2.4 碳酸钙微球形貌、粒径和结构表征 | 第77页 |
| 3.2.5 碳酸钙微球包埋抗原 | 第77-78页 |
| 3.2.6 碳酸钙微球包埋HBsAg的二级和三级结构测定 | 第78页 |
| 3.2.7 BMDCs的提取与培养 | 第78页 |
| 3.2.8 不同粒径的碳酸钙微球的细胞毒性评价 | 第78页 |
| 3.2.9 BMDCs对载抗原碳酸钙微球的摄取 | 第78-79页 |
| 3.2.10 碳酸钙微球诱导BMDCs的成熟和活化 | 第79-80页 |
| 3.2.11 疫苗制剂中细菌内毒素的检测 | 第80页 |
| 3.2.12 载HBsAg碳酸钙微球佐剂疫苗体内效果评价 | 第80-82页 |
| 3.2.13 统计分析 | 第82页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第82-93页 |
| 3.3.1 不同粒径的碳酸钙微球的制备 | 第82-84页 |
| 3.3.2 不同粒径的碳酸钙微球的表征 | 第84-85页 |
| 3.3.3 载抗原微球的制备及抗原稳定性检测 | 第85-86页 |
| 3.3.4 BMDCs对抗原的摄取 | 第86-88页 |
| 3.3.5 不同疫苗制剂诱导DCs活化和成熟 | 第88-89页 |
| 3.3.6 脾细胞增殖和T/B淋巴细胞活化 | 第89-90页 |
| 3.3.7 细胞因子水平 | 第90-92页 |
| 3.3.8 血清特异性抗体水平 | 第92页 |
| 3.3.9 免疫记忆性 | 第92-93页 |
| 3.4 本章小结 | 第93-96页 |
| 4 表面荷正电的小粒径碳酸钙微球的佐剂效应评价 | 第96-118页 |
| 4.1 引言 | 第96-97页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第97-104页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第97-98页 |
| 4.2.2 实验设备和仪器 | 第98-99页 |
| 4.2.3 表面荷正电的1μm载抗原碳酸钙微球的制备 | 第99-100页 |
| 4.2.4 镀层小粒径碳酸钙微球的性质表征 | 第100页 |
| 4.2.5 疫苗制剂中细菌内毒素的检测 | 第100页 |
| 4.2.6 BMDCs的提取与培养 | 第100页 |
| 4.2.7 镀层小粒径碳酸钙微球的细胞毒性和系统毒性评价 | 第100-101页 |
| 4.2.8 抗原在BMDCs胞内定位 | 第101页 |
| 4.2.9 抗原交叉提呈水平 | 第101-102页 |
| 4.2.10 镀层小粒径碳酸钙微球诱导BMDCs的活化和成熟 | 第102页 |
| 4.2.11 镀层小粒径碳酸钙微球佐剂的动物免疫效果评价 | 第102-103页 |
| 4.2.12 统计分析 | 第103-104页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第104-116页 |
| 4.3.1 镀层小粒径碳酸钙微球的制备 | 第104-105页 |
| 4.3.2 微球的细胞毒性和系统毒性评价 | 第105-107页 |
| 4.3.3 抗原在DCs胞内定位 | 第107-108页 |
| 4.3.4 抗原的交叉提呈水平 | 第108-109页 |
| 4.3.5 DCs的成熟与活化 | 第109-110页 |
| 4.3.6 抗原特异性抗体水平 | 第110-111页 |
| 4.3.7 T/B细胞活化 | 第111-112页 |
| 4.3.8 细胞因子分泌水平 | 第112-114页 |
| 4.3.9 免疫记忆性 | 第114-115页 |
| 4.3.10 小动物活体成像结果 | 第115-116页 |
| 4.4 本章小结 | 第116-118页 |
| 5 共递送抗原和免疫刺激剂的碳酸钙微球复合佐剂构建与评价 | 第118-136页 |
| 5.1 引言 | 第118-119页 |
| 5.2 实验材料与方法 | 第119-124页 |
| 5.2.1 实验试剂 | 第119页 |
| 5.2.2 实验设备和仪器 | 第119-120页 |
| 5.2.3 共携载HBsAg和Poly I:C的微球制剂的制备与表征 | 第120-121页 |
| 5.2.4 碳酸钙微球复合佐剂的细胞毒性和系统毒性评价 | 第121-122页 |
| 5.2.5 复合佐剂诱导DCs成熟与活化 | 第122页 |
| 5.2.6 动物实验免疫方案 | 第122页 |
| 5.2.7 CCK-8法测定脾细胞增殖 | 第122-123页 |
| 5.2.8 T/B淋巴细胞活化 | 第123页 |
| 5.2.9 细胞因子分泌 | 第123页 |
| 5.2.10 T细胞介导特异性免疫效应 | 第123页 |
| 5.2.11 B细胞介导特异性免疫效应 | 第123-124页 |
| 5.2.12 统计分析 | 第124页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第124-133页 |
| 5.3.1 碳酸钙微球复合佐剂制备与表征 | 第124-126页 |
| 5.3.2 BMDCs的成熟与活化 | 第126-127页 |
| 5.3.3 脾细胞增殖水平 | 第127-128页 |
| 5.3.4 T/B淋巴细胞活化 | 第128-129页 |
| 5.3.5 细胞因子分泌水平 | 第129-130页 |
| 5.3.6 T细胞介导特异性免疫效应 | 第130-132页 |
| 5.3.7 B细胞介导特异性免疫效应 | 第132-133页 |
| 5.4 本章小结 | 第133-136页 |
| 6 以碳酸钙微球为模板的聚合物靶向微囊构建与评价 | 第136-154页 |
| 6.1 引言 | 第136-137页 |
| 6.2 实验材料与方法 | 第137-143页 |
| 6.2.1 实验试剂 | 第137-138页 |
| 6.2.2 实验设备和仪器 | 第138-139页 |
| 6.2.3 以碳酸钙微球为模板的聚合物微囊制备与表征 | 第139-140页 |
| 6.2.4 多巴胺镀层微球及微囊的细胞毒性及系统毒性评价 | 第140页 |
| 6.2.5 DCs对多巴胺靶向微囊的摄取 | 第140-141页 |
| 6.2.6 多巴胺微囊诱导DCs成熟与活化 | 第141页 |
| 6.2.7 动物实验免疫方案 | 第141页 |
| 6.2.8 CCK-8法测定脾细胞增殖 | 第141-142页 |
| 6.2.9 T/B淋巴细胞活化 | 第142页 |
| 6.2.10 杀伤性T细胞活化 | 第142页 |
| 6.2.11 脾细胞分泌细胞因子水平 | 第142页 |
| 6.2.12 血清中抗原特异性抗体水平 | 第142页 |
| 6.2.13 免疫记忆性考察 | 第142-143页 |
| 6.2.14 统计分析 | 第143页 |
| 6.3 实验结果与讨论 | 第143-152页 |
| 6.3.1 DC靶向多巴胺微囊的制备与表征 | 第143-145页 |
| 6.3.2 DC靶向多巴胺微囊诱导DC成熟与活化 | 第145-146页 |
| 6.3.3 脾细胞增殖水平 | 第146-147页 |
| 6.3.4 T/B淋巴细胞活化 | 第147页 |
| 6.3.5 杀伤性T细胞活化效应 | 第147-148页 |
| 6.3.6 细胞因子分泌水平 | 第148-150页 |
| 6.3.7 抗原特异性抗体水平 | 第150页 |
| 6.3.8 免疫记忆性反应 | 第150-152页 |
| 6.4 本章小结 | 第152-154页 |
| 7 结论与展望 | 第154-160页 |
| 7.1 主要结论 | 第154-156页 |
| 7.2 创新点总结 | 第156-157页 |
| 7.3 今后工作建议 | 第157-160页 |
| 附录 主要符号表 | 第160-162页 |
| 参考文献 | 第162-180页 |
| 个人简历及发表文章目录 | 第180-184页 |
| 致谢 | 第184-185页 |
