| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-21页 |
| 1.1 失巢凋亡研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 失巢凋亡与肿瘤转移 | 第10-11页 |
| 1.1.2 失巢凋亡的调节机制 | 第11-13页 |
| 1.2 miRNA与失巢凋亡 | 第13-16页 |
| 1.2.1 miRNA的作用机制 | 第13-14页 |
| 1.2.2 miRNA对失巢凋亡的调节 | 第14-16页 |
| 1.3 失巢凋亡与自噬 | 第16-19页 |
| 1.3.1 自噬的发生与作用机制 | 第16-17页 |
| 1.3.2 自噬伴随失巢凋亡的发生 | 第17-18页 |
| 1.3.3 调控失巢凋亡和自噬的相关信号通路 | 第18-19页 |
| 1.4 本课题研究内容与意义 | 第19-21页 |
| 第二章 材料和方法 | 第21-41页 |
| 2.1 细胞来源 | 第21页 |
| 2.2 试剂和耗材 | 第21-25页 |
| 2.2.1 试剂 | 第21页 |
| 2.2.2 实验试剂配制 | 第21-25页 |
| 2.2.3 试剂盒 | 第25页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-40页 |
| 2.3.1 质粒载体构建 | 第25-31页 |
| 2.3.2 双荧光素酶报告基因实验 | 第31页 |
| 2.3.3 点突变实验 | 第31-32页 |
| 2.3.4 细胞培养 | 第32-33页 |
| 2.3.5 细胞慢病毒包装 | 第33-34页 |
| 2.3.6 细胞增殖实验 | 第34页 |
| 2.3.7 诱导失巢凋亡实验 | 第34页 |
| 2.3.8 克隆形成实验 | 第34页 |
| 2.3.9 细胞饥饿实验 | 第34-35页 |
| 2.3.10 细胞免疫荧光 | 第35页 |
| 2.3.11 实时定量PCR （Real-time PCR） | 第35-38页 |
| 2.3.12 蛋白质印迹法（Western Blot） | 第38-39页 |
| 2.3.13 流式细胞仪检测细胞凋亡（Annexin V检测试剂盒） | 第39-40页 |
| 2.4 数据处理与分析 | 第40-41页 |
| 第三章 实验结果 | 第41-58页 |
| 3.1 miRNA对失巢凋亡的调控 | 第41-48页 |
| 3.1.1 miRNA在失巢凋亡过程中表达量变化 | 第41-42页 |
| 3.1.2 自噬相关miRNA过表达细胞构建及其对失巢凋亡的影响 | 第42-44页 |
| 3.1.3 miR-181a-5p促进MCF10A细胞失巢凋亡 | 第44-46页 |
| 3.1.4 抑制miR-181a-5p的表达对失巢凋亡没有影响 | 第46-47页 |
| 3.1.5 讨论 | 第47-48页 |
| 3.2 miR-181a-5p对自噬的抑制作用 | 第48-53页 |
| 3.2.1 MCF10A细胞系中抑制自噬促进失巢凋亡的验证 | 第48-49页 |
| 3.2.2 miR-181a-5p在饥饿条件下对自噬抑制作用的验证 | 第49-50页 |
| 3.2.3 miR-181a-5p在失巢凋亡过程中对自噬的抑制作用 | 第50-52页 |
| 3.2.4 讨论 | 第52-53页 |
| 3.3 miR-181a-5p抑制自噬相关基因ATG5促进失巢凋亡 | 第53-58页 |
| 3.3.1 miR-181a-5p靶向抑制ATG5的表达 | 第53-54页 |
| 3.3.2 回复表达ATG5弱化miR-181a-5p对失巢凋亡的促进作用 | 第54-56页 |
| 3.3.3 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 4.1 结论 | 第58-59页 |
| 4.2 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 附录一 缩略词对照表 | 第67-68页 |
| 附录二 硕士期间公开发表的论文 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
