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利用显微注射技术制备CRISPR/Cas9介导的FGF5敲除及Noggin过表达转基因小鼠及其鉴定

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-21页
    1 毛囊及其周期性生长第12页
    2 FGF5及相关背景介绍第12-14页
        2.1 成纤维细胞生长因子及其受体第12-13页
        2.2 成纤维细胞生长因子及其受体与毛囊发育第13页
        2.3 FGF5与毛囊发育第13-14页
    3 Noggin基因及相关背景介绍第14-16页
        3.1 Noggin基因的发现第14页
        3.2 Noggin在机体内的表达第14页
        3.3 Noggin的作用机制第14-15页
        3.4 Noggin基因的主要功能第15-16页
            3.4.1 Noggin与神经系统发育第15页
            3.4.2 Noggin与骨骼系统发育第15页
            3.4.3 Noggin与毛囊发育第15-16页
    4 CRISPR/Cas系统简介第16-21页
        4.1 基因编辑技术及CRISPR/Cas系统的出现第16页
        4.2 CRISPR/Cas系统的结构第16-17页
        4.3 CRISPR/Cas系统的分类第17-18页
        4.4 CRISPR/Cas系统的作用机制第18-19页
        4.5 CRISPR/Cas系统在家畜育种中的应用第19页
        4.6 CRISPR/Cas系统的脱靶效应第19-20页
            4.6.1 CRISPR/Cas系统脱靶效应的影响因素第19-20页
            4.6.2 降低CRISPR/Cas系统脱靶的策略第20页
        4.7 CRISPR/Cas系统应用展望第20-21页
第二章 利用显微注射技术制备CRISPR/Cas9介导的FGF5敲除及Noggin过表达转基因小鼠及其鉴定第21-43页
    1 引言第21-22页
    2 材料和方法第22-32页
        2.1 材料第22-23页
            2.1.1 主要仪器设备第22页
            2.1.2 活体材料第22页
            2.1.3 外源基因第22页
            2.1.4 主要试剂第22-23页
        2.2 方法第23-32页
            2.2.1 注射基因的准备第23-25页
            2.2.2 实验用鼠的准备第25页
            2.2.3 受精卵的采集第25页
            2.2.4 原核注射第25-26页
            2.2.5 胚胎移植第26页
            2.2.6 转基因小鼠的鉴定第26-28页
            2.2.7 转基因小鼠的检测第28-29页
            2.2.8 实时定量PCR第29-32页
    3 结果第32-40页
        3.1 Noggin基因过表达F0代小鼠PCR鉴定结果第32-33页
        3.2 F0代小鼠FGF5基因敲除测序结果第33-34页
        3.3 转基因阳性小鼠传代的结果第34页
        3.4 脱毛实验观察小鼠皮肤毛发再生情况第34-35页
        3.5 石蜡切片H&E染色观察毛囊分布与毛干数目第35-38页
        3.6 小鼠毛囊发育相关基因mRNA表达水平第38-40页
    4 讨论第40-42页
    5 结论第42-43页
参考文献第43-51页
图版第51-53页
致谢第53页

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