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三株马立克氏病病毒野毒株的分离鉴定及其致病性分析

中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
前言第13-26页
    1.1 马立克氏病(MD)的研究进展第13-19页
        1.1.1 病原学第13-14页
        1.1.2 流行病学第14-15页
        1.1.3 发病机理和病理变化第15-17页
            1.1.3.1 MDV感染最初的溶细胞时期第15-16页
            1.1.3.2 病毒的潜伏感染时期第16页
            1.1.3.3 第二次溶细胞时期第16页
            1.1.3.4 转化和肿瘤的形成时期第16-17页
        1.1.4 临床症状及发病机理第17页
        1.1.5 诊断技术第17-19页
            1.1.5.1 常规诊断第17-18页
            1.1.5.2 病毒分离第18页
            1.1.5.3 病毒抗原的检测第18页
            1.1.5.4 聚合酶链反应(PCR)技术第18-19页
            1.1.5.5 DNA探针技术第19页
    1.2 MDV的分子生物学研究进展第19-22页
        1.2.1 MDV的基因组结构第19-21页
        1.2.2 MDV的结构蛋白及相关基因第21-22页
            1.2.2.1 与致肿瘤相关的基因第21-22页
            1.2.2.2 糖蛋白基因第22页
            1.2.2.3 其他基因第22页
    1.3 DNA片段克隆的载体系统第22-25页
        1.3.1 质粒第23页
        1.3.2 粘粒第23页
        1.3.3 细菌人工染色体载体系统(BAC)第23-24页
        1.3.4 利用BAC构建MDV感染性克隆第24-25页
        1.3.5 基于MDV细菌人工染色体载体系统的同源重组技术第25页
    1.4 MD的防制第25-26页
        1.4.1 免疫机理第25页
        1.4.2 目前MDV疫苗的种类第25-26页
            1.4.2.1 常规疫苗第25-26页
            1.4.2.2 新型疫苗第26页
            1.4.2.3 基因工程重组疫苗第26页
    1.5 本研究的目的及意义第26页
2 材料和方法第26-32页
    2.1 主要实验器材和仪器第26-27页
        2.1.1 分子克隆相关试剂第26-27页
        2.1.2 常规细胞培养相关试剂第27页
        2.1.3 其他主要试剂第27页
        2.1.4 主要仪器第27页
        2.1.5 相关菌种、病毒株及载体第27页
    2.2 三株马立克氏病毒野毒株的分离与鉴定第27-30页
        2.2.1 病料来源第27-28页
        2.2.2 引物的设计与合成第28页
        2.2.3 病毒分离第28-29页
        2.2.4 间接免疫荧光实验(IFA)第29页
        2.2.5 相关致病相关基因的PCR扩增、测序第29-30页
    2.3 三株马立克氏病毒的主要相关致病基因序列遗传变异分析第30-31页
        2.3.1 相关致病基因PCR产物的克隆第30-31页
            2.3.1.1 相关致病基因PCR扩增第30页
            2.3.1.2 PCR产物回收第30页
            2.3.1.3 PCR产物的连接第30-31页
            2.3.1.4 连接产物对感受态宿主菌DH5a的转化第31页
            2.3.1.5 重组克隆的筛选与测序第31页
        2.3.2 三株MDV野毒株的主要致病基因的氨基酸序列分析以及系统进化树分析第31页
    2.4 三株MDV的致病性实验及毒力对比第31-32页
        2.4.1 实验设计第31页
        2.4.2 临床观察第31-32页
        2.4.3 组织病理切片的制备第32页
3 结果与分析第32-42页
    3.1 三株MDV野毒株的分离与鉴定第32-37页
        3.1.1 临床及病理变化第32-33页
        3.1.2 病毒分离及鉴定第33页
        3.1.3 三株MDV野毒株的体外增殖特性第33-34页
        3.1.4 相关致病基因PCR扩增第34-35页
        3.1.5 三株马立克氏病毒与致病性相关基因的序列遗传变异分析结果第35-37页
    3.2 三株马立克氏病病毒的毒力对比及致病性分析第37-42页
        3.2.1 三株病毒的效价测定第37页
        3.2.2 攻毒后临床症状及病理变化观察第37-39页
        3.2.3 解剖观察第39-41页
        3.2.4 病理组织学观察第41-42页
4 讨论第42-44页
5 结论第44-45页
参考文献第45-52页
致谢第52-53页
攻读硕士期间发表论文情况第53页

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