摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 课题的提出 | 第11-13页 |
1.2 前人研究进展 | 第13-21页 |
1.2.1 植物原花青素 | 第13-14页 |
1.2.2 柿原花青素的组分与结构 | 第14页 |
1.2.3 原花青素前体的合成、转运和聚合 | 第14-16页 |
1.2.4 MATE基因家族 | 第16-18页 |
1.2.5 GST基因家族 | 第18-19页 |
1.2.6 农杆菌介导的遗传转化 | 第19-21页 |
1.3 本课题研究内容 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-36页 |
2.1 试验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 植物细胞培养基 | 第22页 |
2.1.3 菌种和质粒 | 第22-24页 |
2.1.4 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-36页 |
2.2.1 柿果实原花青素含量测定 | 第25页 |
2.2.2 植物总RNA提取和cDNA反转录 | 第25-27页 |
2.2.3 超表达载体构建 | 第27-32页 |
2.2.4 干涉表达载体的构建 | 第32-33页 |
2.2.5 实时定量PCR | 第33-34页 |
2.2.6 根癌农杆菌介导的柿叶片遗传转化 | 第34-35页 |
2.2.7 转基因材料PCR鉴定及评价指标 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-52页 |
3.1 柿果实不同发育时期果重及原花青素含量的变化 | 第36-38页 |
3.2 柿果不同发育时期和组织部位DkMATE1 和DkGST表达模式 | 第38-41页 |
3.2.1 柿果实发育过程中DkMATE1 和DkGST表达模式 | 第38-39页 |
3.2.2 ‘罗田甜柿’不同组织部位中DkMATE1 和DkGST表达模式 | 第39-40页 |
3.2.3 柿原花青素生物合成相关结构基因表达模式 | 第40-41页 |
3.3 DkMATE1 和DkGST1 基因的载体构建 | 第41-42页 |
3.3.1 超表达载体构建 | 第41-42页 |
3.3.2 干涉表达载体构建 | 第42页 |
3.4 农杆菌介导的柿叶片遗传转化 | 第42-48页 |
3.4.1 ‘磨盘柿’叶片对卡那霉素敏的感性测验 | 第42-44页 |
3.4.2 柿遗传转化流程 | 第44页 |
3.4.3 ‘磨盘柿’、‘恭城水柿’和‘次郎’转基因愈伤组织的获得 | 第44-46页 |
3.4.4 Dk MATE1 和 Dk GST 转基因材料的 PCR 鉴定 | 第46-48页 |
3.5 转基因系中柿原花青素生物合成相关基因的表达分析 | 第48-50页 |
3.6 ZT浓度对‘次郎’和‘恭城水柿’转基因叶片再生影响 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
4.1 柿果PAs合成途径相关基因的表达模式及DkMATE1、DkGSTL在柿PAs代谢中的作用 | 第52-54页 |
4.2 柿遗传转化影响因素 | 第54-56页 |
5 进一步工作设想 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-65页 |
附录 | 第65-71页 |
作者简历及在学期间参与的学术活动 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |