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柿原花青素前体跨膜及转运相关基因MATE、GST的表达分析及功能验证

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-22页
    1.1 课题的提出第11-13页
    1.2 前人研究进展第13-21页
        1.2.1 植物原花青素第13-14页
        1.2.2 柿原花青素的组分与结构第14页
        1.2.3 原花青素前体的合成、转运和聚合第14-16页
        1.2.4 MATE基因家族第16-18页
        1.2.5 GST基因家族第18-19页
        1.2.6 农杆菌介导的遗传转化第19-21页
    1.3 本课题研究内容第21-22页
2 材料与方法第22-36页
    2.1 试验材料第22-25页
        2.1.1 植物材料第22页
        2.1.2 植物细胞培养基第22页
        2.1.3 菌种和质粒第22-24页
        2.1.4 主要试剂和仪器第24-25页
    2.2 试验方法第25-36页
        2.2.1 柿果实原花青素含量测定第25页
        2.2.2 植物总RNA提取和cDNA反转录第25-27页
        2.2.3 超表达载体构建第27-32页
        2.2.4 干涉表达载体的构建第32-33页
        2.2.5 实时定量PCR第33-34页
        2.2.6 根癌农杆菌介导的柿叶片遗传转化第34-35页
        2.2.7 转基因材料PCR鉴定及评价指标第35-36页
3 结果与分析第36-52页
    3.1 柿果实不同发育时期果重及原花青素含量的变化第36-38页
    3.2 柿果不同发育时期和组织部位DkMATE1 和DkGST表达模式第38-41页
        3.2.1 柿果实发育过程中DkMATE1 和DkGST表达模式第38-39页
        3.2.2 ‘罗田甜柿’不同组织部位中DkMATE1 和DkGST表达模式第39-40页
        3.2.3 柿原花青素生物合成相关结构基因表达模式第40-41页
    3.3 DkMATE1 和DkGST1 基因的载体构建第41-42页
        3.3.1 超表达载体构建第41-42页
        3.3.2 干涉表达载体构建第42页
    3.4 农杆菌介导的柿叶片遗传转化第42-48页
        3.4.1 ‘磨盘柿’叶片对卡那霉素敏的感性测验第42-44页
        3.4.2 柿遗传转化流程第44页
        3.4.3 ‘磨盘柿’、‘恭城水柿’和‘次郎’转基因愈伤组织的获得第44-46页
        3.4.4 Dk MATE1 和 Dk GST 转基因材料的 PCR 鉴定第46-48页
    3.5 转基因系中柿原花青素生物合成相关基因的表达分析第48-50页
    3.6 ZT浓度对‘次郎’和‘恭城水柿’转基因叶片再生影响第50-52页
4 讨论第52-56页
    4.1 柿果PAs合成途径相关基因的表达模式及DkMATE1、DkGSTL在柿PAs代谢中的作用第52-54页
    4.2 柿遗传转化影响因素第54-56页
5 进一步工作设想第56-57页
参考文献第57-65页
附录第65-71页
作者简历及在学期间参与的学术活动第71-72页
致谢第72-73页

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