| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 苦荞简介 | 第11页 |
| 1.2 荞麦过敏原蛋白 | 第11-12页 |
| 1.3 植物的启动子 | 第12-16页 |
| 1.3.1 植物启动子的结构 | 第12-13页 |
| 1.3.2 植物启动子的分类 | 第13-14页 |
| 1.3.3 启动子的克隆技术 | 第14-15页 |
| 1.3.4 植物启动子的分析方法 | 第15-16页 |
| 1.4 植物瞬时表达技术 | 第16-17页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第17-19页 |
| 第二章 苦荞 16KD过敏原基因表达特异性分析及其启动子的克隆和生物信息学分析 | 第19-29页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.2 工具和主要试剂 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-23页 |
| 2.2.1 TBW16基因的组织特异性分析 | 第19页 |
| 2.2.2 苦荞TBW16启动子的克隆 | 第19-23页 |
| 2.2.3 苦荞TBW16启动子生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.3 结果 | 第23-27页 |
| 2.3.1 TBW16基因的组织特异性分析 | 第23-24页 |
| 2.3.2 TBW16启动子的克隆 | 第24-26页 |
| 2.3.3 TBW16启动子序列的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.4 分析与讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 苦荞 16KD过敏原基因启动子的组织特异性分析 | 第29-37页 |
| 3.1 材料 | 第29-30页 |
| 3.1.1 材料 | 第29页 |
| 3.1.2 工具和试剂 | 第29-30页 |
| 3.2 方法 | 第30-32页 |
| 3.2.1 TBW16启动子载体TBW16PR-pCAMBIA1301的构建 | 第30-31页 |
| 3.2.2 基因枪瞬时转化法检测TBW16启动子的组织特异性 | 第31-32页 |
| 3.2.3 农杆菌稳定转化法检测TBW16启动子的组织特异性 | 第32页 |
| 3.3 结果 | 第32-35页 |
| 3.3.1 重组载体的鉴定 | 第32-33页 |
| 3.3.2 基因枪瞬时转化法鉴定TBW16启动子的组织特异性 | 第33-34页 |
| 3.3.3 农杆菌稳定转化法检测TBW16启动子的组织特异性 | 第34-35页 |
| 3.4 分析与讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 苦荞 16KD过敏原基因启动子活性及其激素调控元件分析 | 第37-45页 |
| 4.1 材料 | 第37页 |
| 4.1.1 材料 | 第37页 |
| 4.1.2 工具和试剂 | 第37页 |
| 4.2 方法 | 第37-40页 |
| 4.2.1 苦荞TBW16启动子 5′端缺失及重组载体构建 | 第37-39页 |
| 4.2.2 苦荞叶肉细胞原生质体的制备 | 第39页 |
| 4.2.3 PEG-Ca~(2+)介导的原生质体瞬时转化 | 第39-40页 |
| 4.2.4 荧光素酶活性检测 | 第40页 |
| 4.2.5 数据分析 | 第40页 |
| 4.3 结果 | 第40-43页 |
| 4.3.1 TBW16启动子及其缺失片段的扩增 | 第40页 |
| 4.3.2 TBW16启动子载体PG-TBW16P1-4 菌落鉴定 | 第40-41页 |
| 4.3.3 TBW16启动子载体PG-TBWP1-4 转化原生质体瞬时表达分析 | 第41-43页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第43-45页 |
| 第五章 苦荞 16KD过敏原过表达和干扰载体的构建及稳定转化 | 第45-53页 |
| 5.1 材料 | 第45页 |
| 5.1.1 材料 | 第45页 |
| 5.1.2 工具和试剂 | 第45页 |
| 5.2 方法 | 第45-49页 |
| 5.2.1 TBW16过表达载体和干扰载体的构建 | 第45-48页 |
| 5.2.2 农杆菌侵染苦荞和拟南芥 | 第48-49页 |
| 5.2.3 转基因植株的筛选 | 第49页 |
| 5.3 结果 | 第49-52页 |
| 5.3.1 TBW16过表达及干扰载体的构建 | 第49-51页 |
| 5.3.2 农杆菌菌落鉴定 | 第51-52页 |
| 5.3.3 转基因植株的筛选 | 第52页 |
| 5.4 分析与讨论 | 第52-53页 |
| 第六章 结论与展望 | 第53-54页 |
| 6.1 结论 | 第53页 |
| 6.2 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-61页 |
| 附录 | 第61-66页 |
| 缩略词 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
