摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 提高植物抗逆性的方法 | 第14-15页 |
1.1.1 植物种质资源筛选的方法 | 第14-15页 |
1.1.2 植物转基因技术及其应用 | 第15页 |
1.2 植物抗逆调控机理 | 第15-16页 |
1.3 植物抗逆相关基因 | 第16-20页 |
1.3.1 功能蛋白基因 | 第17-18页 |
1.3.2 转录因子基因 | 第18-20页 |
1.4 DREB转录因子 | 第20-22页 |
1.4.1 DREB的结构特点 | 第20-21页 |
1.4.2 DREB的功能研究 | 第21-22页 |
1.5 桑树抗逆性研究进展 | 第22-24页 |
第二章 引言 | 第24-26页 |
2.1 研究目的及意义 | 第24页 |
2.2 主要研究内容 | 第24-25页 |
2.3 研究路线 | 第25-26页 |
第三章 13份桑树杂交组合F1代的耐盐性和耐旱性鉴定 | 第26-40页 |
3.1 材料与试剂 | 第26-28页 |
3.1.1 材料 | 第26页 |
3.1.2 试剂 | 第26-27页 |
3.1.3 主要使用仪器 | 第27页 |
3.1.4 使用试剂及溶液配制方法 | 第27-28页 |
3.2 实验方法 | 第28-30页 |
3.2.1 耐盐性鉴定试验 | 第28-29页 |
3.2.2 耐早性鉴定试验 | 第29-30页 |
3.2.3 测定方法及数据分析 | 第30页 |
3.3 结果与分析 | 第30-38页 |
3.3.1 盐分胁迫对不同桑树杂交组合F1种子萌芽的影响 | 第30-34页 |
3.3.2 干旱胁迫对不同桑树杂交组合幼苗生长的影响 | 第34-37页 |
3.3.3 不同桑树杂交组合的耐盐和耐旱性综合评价 | 第37-38页 |
3.4 总结与讨论 | 第38-40页 |
第四章 部分桑树DREB基因非生物胁迫诱导表达分析 | 第40-48页 |
4.1 材料与试剂 | 第40-41页 |
4.1.1 材料 | 第40页 |
4.1.2 试剂 | 第40页 |
4.1.3 使用仪器 | 第40-41页 |
4.1.4 使用试剂及溶液配制方法 | 第41页 |
4.2 实验方法 | 第41-44页 |
4.2.0 粤桑69851的栽培及非生物胁迫处理 | 第41页 |
4.2.1 RNA的提取 | 第41-42页 |
4.2.2 cDNA第一链的合成 | 第42页 |
4.2.3 荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因的表达量 | 第42-44页 |
4.3 结果与分析 | 第44-46页 |
4.3.1 部分DREB基因的诱导表达分析 | 第44-45页 |
4.3.2 DREB4A响应非生物胁迫的表达模式 | 第45-46页 |
4.4 总结与讨论 | 第46-48页 |
第五章 MnDREB4A基因克隆和生物信息学分析 | 第48-58页 |
5.1 材料与试剂 | 第48-50页 |
5.1.1 材料 | 第48页 |
5.1.2 数据库及使用软件 | 第48页 |
5.1.3 试剂 | 第48-49页 |
5.1.4 使用仪器 | 第49页 |
5.1.5 使用试剂及溶液配制方法 | 第49-50页 |
5.2 实验方法 | 第50-53页 |
5.2.1 生物信息学分析 | 第50页 |
5.2.2 MnREB4A的克隆 | 第50-53页 |
5.3 结果与分析 | 第53-57页 |
5.3.1 MnDREB4A的克隆 | 第53-54页 |
5.3.2 MnDREB4A的生物信息学分析 | 第54-57页 |
5.4 总结与讨论 | 第57-58页 |
第六章 MnDREB4A基因亚细胞定位与启动子功能研究 | 第58-78页 |
6.1 材料和试剂 | 第58-62页 |
6.1.1 材料 | 第58页 |
6.1.2 试剂 | 第58-59页 |
6.1.3 使用仪器 | 第59页 |
6.1.4 使用试剂及溶液配制方法 | 第59-62页 |
6.2 实验方法 | 第62-70页 |
6.2.1 亚细胞定位和启动子-GUS报告载体的构建和农杆菌的转化 | 第62-66页 |
6.2.2 洋葱表皮细胞的瞬时转化 | 第66页 |
6.2.3 MnDREB4A启动子表达模式分析 | 第66-70页 |
6.3 结果与分析 | 第70-75页 |
6.3.1 MnDREB4A的亚细胞定位 | 第70-72页 |
6.3.2 MnDREB4A的启动子表达模式分析 | 第72-75页 |
6.4 总结与讨论 | 第75-78页 |
第七章 MnDREB4A在转基因烟草中的功能验证 | 第78-92页 |
7.1 材料与试剂 | 第78-80页 |
7.1.1 材料 | 第78页 |
7.1.2 试剂 | 第78页 |
7.1.3 使用仪器 | 第78-79页 |
7.1.4 使用试剂及溶液配制方法 | 第79-80页 |
7.2 实验方法 | 第80-84页 |
7.2.1 叶盘转化法转化烟草 | 第80-81页 |
7.2.2 转基因烟草的分子鉴定 | 第81-82页 |
7.2.3 烟草的非生物胁迫处理 | 第82-84页 |
7.2.4 转基因烟草相关下游基因的表达 | 第84页 |
7.3 结果与分析 | 第84-90页 |
7.3.1 转基因烟草的获得及分子鉴定 | 第84-85页 |
7.3.2 烟草的抗逆性验证 | 第85-89页 |
7.3.3 转基因烟草下游相关基因的表达 | 第89-90页 |
7.4 总结与讨论 | 第90-92页 |
第八章 综合与结论 | 第92-96页 |
参考文献 | 第96-104页 |
附录 | 第104-110页 |
在读期间发表论文及参加课题 | 第110-112页 |
致谢 | 第112页 |