摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1.1 蛋白质O-GlcNAc糖基化修饰研究进展 | 第12-17页 |
1.1.1 O-GlcNAc修饰简介 | 第12-13页 |
1.1.2 UDP-GlcNAc与HBP途径 | 第13页 |
1.1.3 O-GlcNAc转移酶 | 第13-14页 |
1.1.4 O-GlcNAc修饰对蛋白质磷酸化的影响 | 第14-15页 |
1.1.5 O-GlcNAc修饰对蛋白质细胞定位的影响 | 第15-16页 |
1.1.6 O-GlcNAc修饰与表观遗传学的联系 | 第16-17页 |
1.2 TET基因研究进展 | 第17-21页 |
1.2.1 TET蛋白家族成员及结构特征 | 第17-18页 |
1.2.2 TET蛋白介导DNA去甲基化 | 第18-19页 |
1.2.3 TET蛋白的调控机制 | 第19-20页 |
1.2.4 TET蛋白降解机制 | 第20-21页 |
1.3 TET3研究进展 | 第21-25页 |
1.3.1 TET3基因简介 | 第21页 |
1.3.2 TET3的功能 | 第21-23页 |
1.3.3 TET3的NLS研究进展 | 第23-24页 |
1.3.4 TET3与OGT的相互作用 | 第24-25页 |
1.4 营养物质代谢对表观遗传学的影响 | 第25-28页 |
第二章 小鼠TET3、OGT和mtTET3真核表达载体构建及功能验证 | 第28-37页 |
2.1 材料和试剂 | 第28-29页 |
2.1.1 材料 | 第28页 |
2.1.2 试剂 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-34页 |
2.2.1 小鼠TET3和OGT真核表达载体构建 | 第29-33页 |
2.2.2 mtTET3真核表达载体构建 | 第33页 |
2.2.3 TET3、OGT和mtTET3真核表达载体转染HEK293T细胞 | 第33页 |
2.2.4 蛋白质免疫印迹(western blot) | 第33-34页 |
2.3 结果 | 第34-35页 |
2.4 讨论 | 第35-36页 |
2.5 小结 | 第36-37页 |
第三章 OGT通过调控O-GlcNAc糖基化影响TET3蛋白核定位 | 第37-44页 |
3.1 材料和试剂 | 第37页 |
3.1.1 材料 | 第37页 |
3.1.2 试剂 | 第37页 |
3.2 实验方法 | 第37-39页 |
3.2.1 NIH3T3细胞培养 | 第37-38页 |
3.2.2 NIH3T3细胞转染 | 第38页 |
3.2.3 细胞免疫荧光染色 | 第38页 |
3.2.4 OGT抑制剂对TET3细胞定位的影响 | 第38页 |
3.2.5 OGA抑制剂对TET3细胞定位的影响 | 第38页 |
3.2.6 培养液中葡萄糖浓度对TET3细胞定位的影响 | 第38-39页 |
3.3 结果 | 第39-41页 |
3.4 讨论 | 第41-43页 |
3.5 小结 | 第43-44页 |
第四章 牛早期胚胎中OGT和TET3基因的表达研究 | 第44-57页 |
4.1 材料和试剂 | 第44-45页 |
4.1.1 材料 | 第44页 |
4.1.2 试剂 | 第44-45页 |
4.2 实验方法 | 第45-49页 |
4.2.1 牛胎儿成纤维细胞原代培养 | 第45页 |
4.2.2 牛TET3真核表达载体构建及验证 | 第45-46页 |
4.2.3 牛TET3和OGT序列同源性分析 | 第46页 |
4.2.4 5mC和 5hmC免疫荧光染色 | 第46页 |
4.2.5 牛卵母细胞的采集和体外成熟 | 第46页 |
4.2.6 牛体细胞核移植 | 第46-47页 |
4.2.7 牛体外受精 | 第47页 |
4.2.8 牛胚胎cDNA的制备和定量PCR(real-time PCR) | 第47-49页 |
4.3 结果 | 第49-55页 |
4.4 讨论 | 第55-56页 |
4.5 小结 | 第56-57页 |
全文结论 | 第57-58页 |
进一步研究课题 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65-68页 |
缩略词 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |