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OsTOP Ⅰ基因在水稻根形态发生中的功能研究

中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1 文献综述第11-24页
    1.1 DNA拓扑异构酶的分类第11-12页
    1.2 DNA拓扑异构酶的催化机制第12-13页
    1.3 DNA拓扑异构酶Ⅰ结构第13-14页
    1.4 DNA拓扑异构酶Ⅰ的细胞学功能第14-16页
        1.4.1 TopoI在DNA复制中的功能第14-15页
        1.4.2 TopoI在DNA转录中的功能第15页
        1.4.3 TopoI在DNA重组中的功能第15-16页
        1.4.4 TopoI在染色体凝集中的功能第16页
    1.5 植物TOPI的研究概况第16-18页
    1.6 喜树碱的应用概况第18-19页
        1.6.1 喜树碱在抗癌药物开发中的应用第18页
        1.6.2 喜树碱在杀虫剂药物开发中的应用第18-19页
        1.6.3 喜树碱在植物生长发育研究中的应用第19页
    1.7 生长素对根尖干细胞小境的调节第19-23页
        1.7.1 水稻根尖结构简介第19-20页
        1.7.2 生长素信号通路第20-21页
        1.7.3 生长素对干细胞小境的调节第21-23页
    1.8 研究目的和意义第23页
    1.9 研究内容第23-24页
2 材料与方法第24-33页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 植物材料第24页
        2.1.2 菌株第24页
        2.1.3 质粒载体第24-25页
    2.2 实验方法第25-33页
        2.2.1 OsTOPI超表达载体构建第25-26页
        2.2.2 OsTOPI启动子融合表达载体构建第26-27页
        2.2.3 OsTOPI RNAi载体的构建第27页
        2.2.4 真核生物TopoI蛋白的进化树分析第27-28页
        2.2.5 DNA抽提及PCR阳性检测第28页
        2.2.6 GUS组织化学染色第28-29页
        2.2.7 表达量检测第29-30页
        2.2.8 水稻幼苗的培养与根系观察第30-32页
            2.2.8.1 培养基配方第30-31页
            2.2.8.2 水稻幼苗的培养第31页
            2.2.8.3 根系生长状况观察及数据统计分析第31-32页
        2.2.9 根尖细胞学观察第32-33页
            2.2.9.1 微分干涉显微镜观察第32页
            2.2.9.2 原位杂交观察第32-33页
3. 结果与分析第33-47页
    3.1 载体构建与阳性植株的获得第33-34页
    3.2 真核生物TopoI蛋白系统进化树分析第34-35页
    3.3 OsTOPⅠ表达模式的分析第35-39页
        3.3.1 OsTOPⅠ表达模式的芯片数据分析第35-37页
        3.3.2 OsTOPⅠ在根尖的原位杂交检测第37-38页
        3.3.3 OsTOPⅠ::GUS表达模式的检测第38-39页
    3.4 RNAi家系根系表型第39-43页
        3.4.1 OsTOPⅠ表达量的降低对主根生长的影响第39-40页
        3.4.2 OsTopoⅠ抑制剂CPT对主根生长的影响第40页
        3.4.3 OsTOPⅠ表达量的降低对侧根和不定根数目和长度的影响第40-42页
        3.4.4 OsTOPⅠ表达量的降低对侧根起始的影响第42-43页
    3.5 RNAi家系地上部分的表型第43-44页
    3.6 OsTOPⅠ表达量的降低对根尖伸长区和分生区长度的影响第44-45页
    3.7 OsTopo I活性降低对干细胞小境的影响第45页
    3.8 OsTOPⅠ表达量的降低对根尖细胞分裂的影响第45-46页
    3.9 OsTOPⅠ表达量的降低对根尖生长素分布的影响第46-47页
4 讨论第47-54页
    4.1 OsTOPⅠ表达模式的分析第47-49页
    4.2 OsTOPⅠ对根形态发生的影响第49页
    4.3 OsTOPⅠ对地上部分的影响第49-50页
    4.4 OsTOPⅠ对干细胞小境的影响第50-51页
    4.5 OsTOPⅠ对根尖细胞分裂和生长素分布的影响第51-53页
    4.6 工作展望第53-54页
参考文献第54-60页
致谢第60-61页
附录第61-67页
    附录1 研究涉及的引物第61-62页
    附录2 原位杂交第62-67页

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