中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 文献综述 | 第11-24页 |
1.1 DNA拓扑异构酶的分类 | 第11-12页 |
1.2 DNA拓扑异构酶的催化机制 | 第12-13页 |
1.3 DNA拓扑异构酶Ⅰ结构 | 第13-14页 |
1.4 DNA拓扑异构酶Ⅰ的细胞学功能 | 第14-16页 |
1.4.1 TopoI在DNA复制中的功能 | 第14-15页 |
1.4.2 TopoI在DNA转录中的功能 | 第15页 |
1.4.3 TopoI在DNA重组中的功能 | 第15-16页 |
1.4.4 TopoI在染色体凝集中的功能 | 第16页 |
1.5 植物TOPI的研究概况 | 第16-18页 |
1.6 喜树碱的应用概况 | 第18-19页 |
1.6.1 喜树碱在抗癌药物开发中的应用 | 第18页 |
1.6.2 喜树碱在杀虫剂药物开发中的应用 | 第18-19页 |
1.6.3 喜树碱在植物生长发育研究中的应用 | 第19页 |
1.7 生长素对根尖干细胞小境的调节 | 第19-23页 |
1.7.1 水稻根尖结构简介 | 第19-20页 |
1.7.2 生长素信号通路 | 第20-21页 |
1.7.3 生长素对干细胞小境的调节 | 第21-23页 |
1.8 研究目的和意义 | 第23页 |
1.9 研究内容 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-33页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第24页 |
2.1.2 菌株 | 第24页 |
2.1.3 质粒载体 | 第24-25页 |
2.2 实验方法 | 第25-33页 |
2.2.1 OsTOPI超表达载体构建 | 第25-26页 |
2.2.2 OsTOPI启动子融合表达载体构建 | 第26-27页 |
2.2.3 OsTOPI RNAi载体的构建 | 第27页 |
2.2.4 真核生物TopoI蛋白的进化树分析 | 第27-28页 |
2.2.5 DNA抽提及PCR阳性检测 | 第28页 |
2.2.6 GUS组织化学染色 | 第28-29页 |
2.2.7 表达量检测 | 第29-30页 |
2.2.8 水稻幼苗的培养与根系观察 | 第30-32页 |
2.2.8.1 培养基配方 | 第30-31页 |
2.2.8.2 水稻幼苗的培养 | 第31页 |
2.2.8.3 根系生长状况观察及数据统计分析 | 第31-32页 |
2.2.9 根尖细胞学观察 | 第32-33页 |
2.2.9.1 微分干涉显微镜观察 | 第32页 |
2.2.9.2 原位杂交观察 | 第32-33页 |
3. 结果与分析 | 第33-47页 |
3.1 载体构建与阳性植株的获得 | 第33-34页 |
3.2 真核生物TopoI蛋白系统进化树分析 | 第34-35页 |
3.3 OsTOPⅠ表达模式的分析 | 第35-39页 |
3.3.1 OsTOPⅠ表达模式的芯片数据分析 | 第35-37页 |
3.3.2 OsTOPⅠ在根尖的原位杂交检测 | 第37-38页 |
3.3.3 OsTOPⅠ::GUS表达模式的检测 | 第38-39页 |
3.4 RNAi家系根系表型 | 第39-43页 |
3.4.1 OsTOPⅠ表达量的降低对主根生长的影响 | 第39-40页 |
3.4.2 OsTopoⅠ抑制剂CPT对主根生长的影响 | 第40页 |
3.4.3 OsTOPⅠ表达量的降低对侧根和不定根数目和长度的影响 | 第40-42页 |
3.4.4 OsTOPⅠ表达量的降低对侧根起始的影响 | 第42-43页 |
3.5 RNAi家系地上部分的表型 | 第43-44页 |
3.6 OsTOPⅠ表达量的降低对根尖伸长区和分生区长度的影响 | 第44-45页 |
3.7 OsTopo I活性降低对干细胞小境的影响 | 第45页 |
3.8 OsTOPⅠ表达量的降低对根尖细胞分裂的影响 | 第45-46页 |
3.9 OsTOPⅠ表达量的降低对根尖生长素分布的影响 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-54页 |
4.1 OsTOPⅠ表达模式的分析 | 第47-49页 |
4.2 OsTOPⅠ对根形态发生的影响 | 第49页 |
4.3 OsTOPⅠ对地上部分的影响 | 第49-50页 |
4.4 OsTOPⅠ对干细胞小境的影响 | 第50-51页 |
4.5 OsTOPⅠ对根尖细胞分裂和生长素分布的影响 | 第51-53页 |
4.6 工作展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61-67页 |
附录1 研究涉及的引物 | 第61-62页 |
附录2 原位杂交 | 第62-67页 |