| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第17-31页 |
| 1.1 植物病害及其防治 | 第17-18页 |
| 1.2 生物农药 | 第18页 |
| 1.3 放线菌的研究 | 第18-21页 |
| 1.3.1 放线菌的分离 | 第18-19页 |
| 1.3.2 土壤放线菌的筛选 | 第19页 |
| 1.3.3 放线菌的分类 | 第19-21页 |
| 1.4 放线菌的次级代谢产物 | 第21-26页 |
| 1.4.1 放线菌产抗生素的种类 | 第21-25页 |
| 1.4.2 抗生素的常见的分离方法 | 第25-26页 |
| 1.5 链霉菌合成抗生素的抗性分子机制 | 第26-30页 |
| 1.5.1 龟裂链霉菌的抗性基因及保护机制 | 第27-28页 |
| 1.5.2 提高抗性基因表达改造链霉菌的研究 | 第28-30页 |
| 1.6 研究背景与意义 | 第30-31页 |
| 2 拮抗放线菌的筛选与鉴定 | 第31-44页 |
| 2.1 材料 | 第31-33页 |
| 2.1.1 主要仪器 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.3 供试土壤 | 第32页 |
| 2.1.4 测试菌株 | 第32页 |
| 2.1.5 培养基 | 第32-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 2.2.1 拮抗放线菌的筛选 | 第33页 |
| 2.2.2 拮抗菌株的形态及培养特征观察 | 第33页 |
| 2.2.3 拮抗菌株生理生化特征测定 | 第33页 |
| 2.2.4 拮抗菌株 16S rDNA序列分析 | 第33-34页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳和基因测序 | 第34页 |
| 2.2.6 序列分析与系统进化树的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.7 菌株M527发酵 | 第35页 |
| 2.2.8 拮抗菌株发酵液对黄瓜枯萎病的生防实验 | 第35-36页 |
| 2.2.9 数据分析 | 第36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-42页 |
| 2.3.1 拮抗菌株的筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.2 拮抗放线菌M527形态特征及生理生化特征 | 第37-39页 |
| 2.3.3 拮抗放线菌M527的分子鉴定 | 第39-40页 |
| 2.3.4 S. rimosus M527发酵对黄瓜枯萎病菌的菌丝生长和孢子萌发的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.5 S. rimosus M527发酵液对黄瓜枯萎病的防治效果 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 3 S. rimosus M527活性物质的分离鉴定及对黄瓜枯萎病的生防效果 | 第44-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 实验菌种 | 第44页 |
| 3.1.2 试剂与仪器 | 第44-45页 |
| 3.1.3 培养基 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 菌种发酵 | 第45页 |
| 3.2.2 活性化合物的提取分离 | 第45-46页 |
| 3.2.4 活性化合物的紫外吸收波长 | 第46页 |
| 3.2.5 活性化合物的结构鉴定 | 第46-47页 |
| 3.2.6 活性化合物HPLC色谱法的建立 | 第47页 |
| 3.2.7 活性化合物对黄瓜枯萎病的生防实验 | 第47-48页 |
| 3.2.8 数据分析 | 第48页 |
| 3.3 结果与分析 | 第48-56页 |
| 3.3.1 活性化合物结构的鉴定 | 第48-52页 |
| 3.3.2 龟裂杀菌素HPLC色谱法的验证 | 第52-55页 |
| 3.3.3 龟裂杀菌素对黄瓜枯萎病菌菌丝生长和孢子萌发的影响 | 第55页 |
| 3.3.4 龟裂杀菌素对黄瓜枯萎病的生防实验 | 第55-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-58页 |
| 4 Otr A基因的表达对天蓝色链霉菌M145放线紫红素产量的影响 | 第58-70页 |
| 4.1 材料 | 第58-60页 |
| 4.1.1 菌种与质粒 | 第58-59页 |
| 4.1.2 培养基 | 第59页 |
| 4.1.3 缓冲液 | 第59页 |
| 4.1.4 试剂、工具酶及试剂盒 | 第59-60页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第60页 |
| 4.1.6 引物设计 | 第60页 |
| 4.2 方法 | 第60-64页 |
| 4.2.1 基因扩增 | 第60-61页 |
| 4.2.2 割胶回收，连接，测序 | 第61页 |
| 4.2.3 大肠杆菌感受态的制备及DNA的转化 | 第61页 |
| 4.2.4 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第61页 |
| 4.2.5 酶切实验 | 第61-62页 |
| 4.2.6 链霉菌总DNA的提取 | 第62页 |
| 4.2.7 接合转移 | 第62-63页 |
| 4.2.8 重组菌组与原始菌株生长形态与产素能力初步观察 | 第63页 |
| 4.2.9 色素发酵 | 第63页 |
| 4.2.10 色素效价相对单位定义与测定 | 第63页 |
| 4.2.11 链霉菌总RNA的提取 | 第63-64页 |
| 4.2.12 基因表达量的检测 | 第64页 |
| 4.3 结果与分析 | 第64-68页 |
| 4.3.1 重组质粒pIB139-otr A的构建 | 第64-65页 |
| 4.3.2 重组菌M145-OA的构建、筛选及鉴定 | 第65-66页 |
| 4.3.3 OtrA基因的异源表达对M145菌株生长速率与产素水平的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.4 色素效价的测定 | 第67-68页 |
| 4.3.5 OtrA基因的表达对调控基因ACT II-orf4的转录水平的影响 | 第68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-70页 |
| 5 总结与展望 | 第70-72页 |
| 5.1 全文总结 | 第70-71页 |
| 5.2 创新点 | 第71页 |
| 5.3 课题展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 作者简介 | 第80页 |
