| 缩略词汇 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一部分 H9N2亚型禽流感北京燕雀分离株的致病性及传播力研究 | 第15-50页 |
| 实验材料与方法 | 第16-29页 |
| 1 材料 | 第16-20页 |
| 1.1 实验室设备 | 第16页 |
| 1.2 病毒、细胞和动物来源 | 第16-17页 |
| 1.3 实验仪器 | 第17页 |
| 1.4 实验试剂 | 第17-18页 |
| 1.5 主要试剂的配置 | 第18-19页 |
| 1.6 引物 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.1 样品采集 | 第20页 |
| 2.2 病毒分离 | 第20页 |
| 2.3 病毒分离株的纯化和扩增 | 第20-21页 |
| 2.4 病毒基因组RNA提取 | 第21页 |
| 2.5 病毒单链cDNA合成 | 第21页 |
| 2.6 病毒基因组的PCR扩增及产物的回收纯化 | 第21-22页 |
| 2.7 测序和进化分析 | 第22-23页 |
| 2.8 病毒EID50测定 | 第23页 |
| 2.9 致病性分析 | 第23页 |
| 2.10 基于雪貂的空气传播实验 | 第23-24页 |
| 2.11 血凝抑制试验(HI) | 第24-25页 |
| 2.12 受体结合实验 | 第25页 |
| 2.13 利用红细胞凝集测定受体结合特性 | 第25页 |
| 2.14 病毒鼠肺适应株的建立 | 第25-26页 |
| 2.15 适应株的感染性评价及半数致死量的测定(MLD_(50)) | 第26-27页 |
| 2.16 鼠肺适应株P12-2、P12-3病毒的同居感染实验 | 第27页 |
| 2.17 小鼠体内适应株的全基因测序 | 第27-28页 |
| 3 统计分析 | 第28-29页 |
| 实验结果 | 第29-47页 |
| 1 病毒分离和同源性分析 | 第29页 |
| 2 进化树和序列分析 | 第29-32页 |
| 3 H9N2分离株对白来航鸡的致病性 | 第32页 |
| 4 H9N2分离株对小鼠的致病性 | 第32页 |
| 5 H9N2分离株对雪貂的致病性和传播性 | 第32-35页 |
| 6 受体结合特性 | 第35-36页 |
| 7 H9N2鼠肺适应株对对人源肺细胞的感染性研究 | 第36-37页 |
| 8 H9N2鼠肺适应株细胞水平(In vitro)病毒复制能力比较 | 第37-38页 |
| 9 H9N2鼠肺适应株对小鼠的致病性 | 第38-41页 |
| 10 病毒鼠肺适应各基因氨基酸的变异 | 第41-43页 |
| 11 鼠肺适应株P12-2、P12-3病毒在小鼠群体间的传播力研究 | 第43-47页 |
| 讨论 | 第47-50页 |
| 第二部分 液相芯片方法同时检测流感病毒H5N1和H7N9亚型 | 第50-80页 |
| 实验材料与方法 | 第53-67页 |
| 1 材料 | 第53-58页 |
| 1.1 实验室设备 | 第53页 |
| 1.2 病毒和细胞来源 | 第53页 |
| 1.3 实验仪器 | 第53-54页 |
| 1.4 实验试剂 | 第54-55页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第55-57页 |
| 1.6 引物 | 第57-58页 |
| 1.7 微球编码及其表面交联探针针对的病原体的对应关系表 | 第58页 |
| 2 实验方法 | 第58-66页 |
| 2.1 特异性引物、探针以及参比品的设计与合成 | 第58-59页 |
| 2.2 特探针与微球偶联 | 第59-60页 |
| 2.3 定量检测标准品的制备 | 第60-62页 |
| 2.4 检测的PCR实验优化 | 第62页 |
| 2.5 检测的杂交温度优化 | 第62-63页 |
| 2.6 参比品浓度梯度实验 | 第63页 |
| 2.7 SA-PE用量实验 | 第63页 |
| 2.8 检测的具体操作步骤 | 第63-66页 |
| 3 数据分析 | 第66-67页 |
| 实验结果 | 第67-77页 |
| 1 流感病毒H5N1和H7N9的特异性引物和探针的设计 | 第67页 |
| 2 基于流感病毒M基因标准品的制备 | 第67页 |
| 3 标准品的扩增曲线、标准曲线、熔解曲线的建立及灵敏度和特异性评估 | 第67-69页 |
| 4 标准品的重复性验证 | 第69-70页 |
| 5 特异性引物PCR实验的优化 | 第70-71页 |
| 6 特异性探针杂交温度的优化 | 第71-72页 |
| 7 参比品浓度的优化 | 第72-73页 |
| 8 SA-PE用量的优化 | 第73页 |
| 9 引物和探针的特异性和重复性分析 | 第73-75页 |
| 10 分析灵敏度的确定 | 第75-76页 |
| 11 实验样本的检测 | 第76-77页 |
| 讨论 | 第77-80页 |
| 文献综述 甲型流感病毒的受体结合特性在跨物种传播中的作用 | 第80-89页 |
| 参考文献 | 第89-104页 |
| 个人简历 | 第104-107页 |
| 致谢 | 第107-109页 |
