| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第14-24页 |
| 1.1 分子成像技术 | 第14-16页 |
| 1.1.1 超声成像 | 第14页 |
| 1.1.2 磁共振成像 | 第14-15页 |
| 1.1.3 CT成像 | 第15页 |
| 1.1.4 荧光成像 | 第15-16页 |
| 1.2 纳米药物载体概述 | 第16-18页 |
| 1.2.1 纳米药物载体的分类 | 第16-18页 |
| 1.2.1.1 无机纳米粒子 | 第16-17页 |
| 1.2.1.2 纳米脂质体 | 第17页 |
| 1.2.1.3 高分子聚合物材料 | 第17-18页 |
| 1.2.2 纳米药物载体的性质 | 第18页 |
| 1.3 肿瘤的多药耐药性 | 第18-19页 |
| 1.3.1 肿瘤的多药耐药性及产生原因 | 第18-19页 |
| 1.3.2 常用克服多药耐药性的策略 | 第19页 |
| 1.4 环境响应型纳米药物载体 | 第19-21页 |
| 1.4.1 温度响应型 | 第20页 |
| 1.4.2 PH响应型 | 第20页 |
| 1.4.3 氧化还原响应型 | 第20-21页 |
| 1.4.4 光响应型 | 第21页 |
| 1.5 课题的提出与主要研究内容 | 第21-24页 |
| 1.5.1 论文选题依据与意义 | 第21-22页 |
| 1.5.2 本课题的主要研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 DOX-PLGA/PEI/PAH-CIT/PEI/P-GP SHRNA的合成与表征 | 第24-39页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料 | 第24-26页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第25页 |
| 2.2.3 溶液配置 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.3.1 PLGA NBS和DOX-PLGA NBS的制备 | 第26页 |
| 2.3.2 PLGA NBS和DOX-PLGA NBS的表征 | 第26-27页 |
| 2.3.2.1 扫描电镜观察纳米泡的形貌 | 第26页 |
| 2.3.2.2 紫外分光光度计测定DOX的吸收峰 | 第26-27页 |
| 2.3.2.3 包封率和载药率的测定 | 第27页 |
| 2.3.3 DOX-PLGA/PEI NBS的制备 | 第27页 |
| 2.3.4 DOX-PLGA/PEI NBS的表征 | 第27页 |
| 2.3.4.1 纳米泡粒径分析 | 第27页 |
| 2.3.4.2 纳米泡ZETA电位分析 | 第27页 |
| 2.3.5 PAH-CIT的制备 | 第27-28页 |
| 2.3.6 PAH-CIT的表征 | 第28页 |
| 2.3.7 DOX-PLGA/PEI/PAH-CIT/PEI的制备 | 第28页 |
| 2.3.8 DOX-PLGA/PEI/PAH-CIT/PEI/P-GP SHRNA的制备 | 第28页 |
| 2.3.9 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第28-29页 |
| 2.3.10 P-GP SHRNA质粒的提取(OMEGA质粒提取说明书) | 第29页 |
| 2.3.11 基因体外释放实验 | 第29-30页 |
| 2.3.12 体外超声成像实验 | 第30页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第30-38页 |
| 2.4.1 PLGA NBS和DOX-PLGA NBS的形貌分析 | 第30-31页 |
| 2.4.2 包封率和载药率的测定 | 第31-32页 |
| 2.4.3 纳米泡粒径及ZETA电位分析 | 第32页 |
| 2.4.4 PAH-CIT的表征 | 第32-33页 |
| 2.4.5 纳米泡形貌分析 | 第33-34页 |
| 2.4.6 纳米泡粒径分析 | 第34-35页 |
| 2.4.7 纳米泡ZETA电位分析 | 第35-36页 |
| 2.4.8 琼脂糖凝胶电泳实验 | 第36-37页 |
| 2.4.9 体外超声成像实验 | 第37-38页 |
| 2.5 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 DOX-PLGA/PEI/PAH-CIT/PEI/P-GP SHRNA体外治疗效果 | 第39-56页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 实验材料 | 第39-41页 |
| 3.2.1 细胞系 | 第39页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第39-40页 |
| 3.2.4 溶液配制 | 第40-41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-46页 |
| 3.3.1 HELA、HUVEC、MCF-7、MCF-7/ADR细胞复苏 | 第41页 |
| 3.3.2 细胞传代 | 第41页 |
| 3.3.3 细胞冻存 | 第41-42页 |
| 3.3.4 细胞毒性实验 | 第42页 |
| 3.3.5 共聚焦显微镜观察细胞内吞情况 | 第42页 |
| 3.3.6 流式细胞术检测细胞内吞情况 | 第42页 |
| 3.3.7 定量PCR实验 | 第42-44页 |
| 3.3.7.1 细胞总RNA提取 | 第42-43页 |
| 3.3.7.2 逆转录反应 | 第43页 |
| 3.3.7.3 PCR扩增反应 | 第43-44页 |
| 3.3.8 免疫印迹实验 | 第44-46页 |
| 3.3.8.1 收集蛋白样品 | 第44页 |
| 3.3.8.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第44-45页 |
| 3.3.8.3 转膜 | 第45页 |
| 3.3.8.4 免疫反应 | 第45-46页 |
| 3.3.8.5 化学发光、显影、定影 | 第46页 |
| 3.3.9 CALCEIN-AM/PI双染实验 | 第46页 |
| 3.3.10 细胞周期实验 | 第46页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第46-54页 |
| 3.4.1 细胞毒性实验 | 第46-47页 |
| 3.4.2 共聚焦显微镜观察细胞内吞情况 | 第47-48页 |
| 3.4.3 流式细胞术检测细胞内吞情况 | 第48-49页 |
| 3.4.4 定量PCR实验 | 第49-50页 |
| 3.4.5 免疫印迹实验 | 第50-51页 |
| 3.4.6 协同治疗效果 | 第51-53页 |
| 3.4.7 CALCEIN-AM/PI双染实验 | 第53-54页 |
| 3.4.8 细胞周期实验 | 第54页 |
| 3.5 小结 | 第54-56页 |
| 第四章 DOX-PLGA/PEI/PAH-CIT/PEI/P-GP SHRNA活体成像及抗肿瘤效果 | 第56-66页 |
| 4.1 引言 | 第56页 |
| 4.2 实验材料 | 第56-57页 |
| 4.2.1 实验动物及细胞株 | 第56页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第56-57页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第57页 |
| 4.2.4 溶液配制 | 第57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-59页 |
| 4.3.1 肿瘤模型的建立 | 第57-58页 |
| 4.3.2 体内超声成像 | 第58页 |
| 4.3.3 体内协同抗肿瘤作用 | 第58页 |
| 4.3.4 组织病理学分析 | 第58-59页 |
| 4.3.4.1 HE染色 | 第58页 |
| 4.3.4.2 TUNEL染色 | 第58-59页 |
| 4.3.5 血液学分析及血液生化检测 | 第59页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第59-65页 |
| 4.4.1 体内超声成像 | 第59-60页 |
| 4.4.2 体内毒副作用 | 第60-61页 |
| 4.4.3 血液学分析 | 第61-62页 |
| 4.4.4 体内协同抗肿瘤作用 | 第62-65页 |
| 4.5 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 全文总结 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-73页 |
| 硕期间取得的研究成果 | 第73-74页 |
