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紫甘蓝花青素抑制三阴性乳腺癌和黑色素瘤的机理研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
缩略词表第10-11页
第一章 文献综述第11-37页
    1.1 紫甘蓝研究概述第11页
        1.1.1 紫甘蓝简介第11页
        1.1.2 紫甘蓝中花青素研究现状第11页
    1.2 花青素概述第11-21页
        1.2.1 花青素化学结构及稳定性第11-13页
        1.2.2 花青素的生物合成及其降解第13-15页
        1.2.3 影响花青素积累的因素第15-17页
            1.2.3.1 发育对花青素合成的调控第15页
            1.2.3.2 环境因素对花青素合成的影响第15-16页
            1.2.3.3 含不同种类花青素的果实第16-17页
            1.2.3.4 花青素的提取纯化及结构鉴定第17页
        1.2.4 花青素在体内代谢第17-19页
        1.2.5 花青素防治疾病第19-21页
    1.3 乳腺癌概述第21-27页
        1.3.1 三阴性乳腺癌的流行病学及临床病理特点第21-22页
        1.3.2 三阴性乳腺癌治疗手段第22-23页
        1.3.3 三阴性乳腺癌的靶向治疗第23-25页
            1.3.3.1 PARP阻断剂第23页
            1.3.3.2 血管内皮生长因子VEFG抑制剂第23页
            1.3.3.3 检验点激酶1(checkpoint kinase 1,Chk1)抑制剂第23-24页
            1.3.3.4 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂第24-25页
        1.3.4 靶向ERα36是治疗TNBC的潜在性靶点第25-27页
            1.3.4.1 ERα36的生物学功能第26页
            1.3.4.2 ERα36的下游信号通路第26-27页
    1.4 黑色素瘤概述第27-37页
        1.4.1 从黑色素细胞到黑色素瘤的转变过程第27-28页
            1.4.1.1 黑色素细胞的产生第27-28页
            1.4.1.2 黑色素瘤细胞的分子发病进程第28页
        1.4.2 黑色素瘤的发生及治疗现状第28-32页
            1.4.2.1 黑色素瘤的临床特征第29页
            1.4.2.2 黑色素瘤的靶向治疗第29-32页
        1.4.3 黑色素瘤中的凋亡调控第32页
        1.4.4 DNA损伤和细胞周期调控在黑色素瘤中的作用第32-37页
            1.4.4.1 DNA损伤反应第32-33页
            1.4.4.2 细胞周期的检测第33-37页
第二章 常见蔬菜中花青素含量第37-45页
    2.1 引言第37页
    2.2 材料与方法第37-38页
        2.2.1 材料第37页
        2.2.2 设备及耗材第37页
        2.2.3 主要试剂与溶液配制第37页
        2.2.4 方法第37-38页
        2.2.5 数据处理第38页
    2.3 结果第38-44页
        2.3.1 提取条件对紫甘蓝花青素提取的影响第38-42页
            2.3.1.1 不同提取剂对紫甘蓝花青素提取效率的影响第38-39页
            2.3.1.2 提取剂酸度对紫甘蓝花青素提取效率的影响第39-40页
            2.3.1.3 液固比对紫甘蓝花青素提取效率的影响第40页
            2.3.1.4 抽提时间对紫甘蓝花青素提取效率的影响第40-41页
            2.3.1.5 温度对紫甘蓝花青素提取效率的影响第41-42页
        2.3.2 测定常见蔬菜中总花青素含量第42-44页
    2.4 讨论第44-45页
第三章 紫甘蓝花青素抑制三阴性乳腺癌的机理第45-78页
    3.1 引言第45页
    3.2 材料与方法第45-57页
        3.2.1 动物第45页
        3.2.2 设备第45-46页
        3.2.3 主要试剂及耗材第46页
        3.2.4 方法第46-57页
            3.2.4.1 乳腺癌细胞系培养第47-48页
            3.2.4.2 RT-qPCR第48-50页
            3.2.4.3 Western Blot第50-52页
            3.2.4.4 BALB/c裸鼠处理第52-53页
            3.2.4.5 BALB/c裸鼠活体成像实时观测第53页
            3.2.4.6 BALB/c裸鼠肿瘤样本的采集第53页
            3.2.4.7 组织病理学分析第53-55页
            3.2.4.8 CCK-8法检测细胞增值第55页
            3.2.4.9 流式细胞仪检测细胞周期(PI染色)第55-56页
            3.2.4.10 流式细胞仪检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染)第56页
            3.2.4.11 流式细胞仪检测细胞线粒体ROS(MitoTracker Red CM-H2XRos)第56页
            3.2.4.12 细胞凋亡检测(试剂盒TUNEL染色)第56-57页
            3.2.4.13 微量热涌动分析(MST)第57页
            3.2.4.14 数据处理第57页
    3.3 结果第57-76页
        3.3.1 Cy-3-glu抑制三阴性乳腺癌(TNBC)的生长第57-60页
        3.3.2 Cy-3-glu诱导TNBC细胞凋亡第60-65页
            3.3.2.1 Cy-3-glu不抑制MDA-MB-231的细胞周期第60-61页
            3.3.2.2 Cy-3-glu促进MDA-MB-231细胞死亡第61页
            3.3.2.3 Cy-3-glu不是通过细胞程序性坏死促进细胞死亡第61-62页
            3.3.2.4 Cy-3-glu促进MDA-MB-231细胞调亡第62-64页
            3.3.2.5 Cy-3-glu不通过线粒体途径诱导MDA-MB-231细胞凋亡第64-65页
        3.3.3 Cy-3-glu抑制雌激素诱导的TNBC细胞生长第65-67页
            3.3.3.1 雌激素激活MDA-MB-231细胞p-AKT信号通路第65-66页
            3.3.3.2 Cy-3-glu反转由雌激素引起的MDA-MB-231细胞增值第66-67页
        3.3.4 Cy-3-glu直接与ERa36配体结合域(LBD)结合并抑制其下游信号通路第67-71页
            3.3.4.1 Cy-3-glu直接结合ERa36-LBD第67-68页
            3.3.4.2 Cy-3-glu抑制TNBC细胞ERa36下游信号通路第68-69页
            3.3.4.3 乳腺癌细胞系EGFR和ERa36的表达第69-70页
            3.3.4.4 Cy-3-glu直接与ERa36结合蛋白酶体途径降解下游的EGFR第70-71页
        3.3.5 饲喂紫甘蓝提取物(RCE)抑制MDA-MB-231细胞体内生长第71-74页
        3.3.6 三阴性乳腺癌病人肿瘤组织ERa36和EGFR的免疫组化染色第74-76页
    3.4 讨论第76-78页
第四章 紫甘蓝花青素抑制小鼠黑色素瘤的机理第78-92页
    4.1 引言第78页
    4.2 材料与方法第78-83页
        4.2.1 动物第78页
        4.2.2 设备第78-79页
        4.2.3 主要试剂及耗材第79页
        4.2.4 方法第79-83页
            4.2.4.1 小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10培养第79页
            4.2.4.2 RT-qPCR第79-81页
            4.2.4.3 Western Blot第81页
            4.2.4.4 C57小鼠处理第81页
            4.2.4.5 C57小鼠活体成像实时观测第81页
            4.2.4.6 C57小鼠肿瘤样本的采集第81页
            4.2.4.7 组织病理学分析第81-82页
            4.2.4.8 CCK-8法检测细胞增值第82页
            4.2.4.9 流式细胞仪检测细胞周期(PI染色)第82页
            4.2.4.10 流式细胞仪检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染)第82页
            4.2.4.11 细胞线粒体ROS检测(MitoTracker Red CM-H2XRos)第82页
            4.2.4.12 细胞凋亡检测(试剂盒TUNEL染色)第82页
            4.2.4.13 小鼠原代黑色素细胞分离第82页
            4.2.4.14 数据处理第82-83页
    4.3 结果第83-90页
        4.3.1 Cy-3-glu抑制B16-F10细胞的生长第83-84页
        4.3.2 Cy-3-glu诱导B16-F10细胞凋亡第84-85页
        4.3.3 Cy-3-glu通过线粒体途径诱导B16-F10细胞凋亡第85-86页
        4.3.4 Cy-3-glu抑制B16-F10的细胞周期第86-87页
        4.3.5 Cy-3-glu通过抑制RAD51表达促进B16-F10凋亡第87-89页
        4.3.6 饲喂紫甘蓝提取物(RCE)抑制B16-F10细胞体内生长第89-90页
    4.4 讨论第90-92页
第五章 结论与展望第92-93页
    5.1 结论第92页
    5.2 展望第92-93页
参考文献第93-99页
致谢第99-100页
个人简介第100页

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