摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-37页 |
1.1 紫甘蓝研究概述 | 第11页 |
1.1.1 紫甘蓝简介 | 第11页 |
1.1.2 紫甘蓝中花青素研究现状 | 第11页 |
1.2 花青素概述 | 第11-21页 |
1.2.1 花青素化学结构及稳定性 | 第11-13页 |
1.2.2 花青素的生物合成及其降解 | 第13-15页 |
1.2.3 影响花青素积累的因素 | 第15-17页 |
1.2.3.1 发育对花青素合成的调控 | 第15页 |
1.2.3.2 环境因素对花青素合成的影响 | 第15-16页 |
1.2.3.3 含不同种类花青素的果实 | 第16-17页 |
1.2.3.4 花青素的提取纯化及结构鉴定 | 第17页 |
1.2.4 花青素在体内代谢 | 第17-19页 |
1.2.5 花青素防治疾病 | 第19-21页 |
1.3 乳腺癌概述 | 第21-27页 |
1.3.1 三阴性乳腺癌的流行病学及临床病理特点 | 第21-22页 |
1.3.2 三阴性乳腺癌治疗手段 | 第22-23页 |
1.3.3 三阴性乳腺癌的靶向治疗 | 第23-25页 |
1.3.3.1 PARP阻断剂 | 第23页 |
1.3.3.2 血管内皮生长因子VEFG抑制剂 | 第23页 |
1.3.3.3 检验点激酶1(checkpoint kinase 1,Chk1)抑制剂 | 第23-24页 |
1.3.3.4 表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)抑制剂 | 第24-25页 |
1.3.4 靶向ERα36是治疗TNBC的潜在性靶点 | 第25-27页 |
1.3.4.1 ERα36的生物学功能 | 第26页 |
1.3.4.2 ERα36的下游信号通路 | 第26-27页 |
1.4 黑色素瘤概述 | 第27-37页 |
1.4.1 从黑色素细胞到黑色素瘤的转变过程 | 第27-28页 |
1.4.1.1 黑色素细胞的产生 | 第27-28页 |
1.4.1.2 黑色素瘤细胞的分子发病进程 | 第28页 |
1.4.2 黑色素瘤的发生及治疗现状 | 第28-32页 |
1.4.2.1 黑色素瘤的临床特征 | 第29页 |
1.4.2.2 黑色素瘤的靶向治疗 | 第29-32页 |
1.4.3 黑色素瘤中的凋亡调控 | 第32页 |
1.4.4 DNA损伤和细胞周期调控在黑色素瘤中的作用 | 第32-37页 |
1.4.4.1 DNA损伤反应 | 第32-33页 |
1.4.4.2 细胞周期的检测 | 第33-37页 |
第二章 常见蔬菜中花青素含量 | 第37-45页 |
2.1 引言 | 第37页 |
2.2 材料与方法 | 第37-38页 |
2.2.1 材料 | 第37页 |
2.2.2 设备及耗材 | 第37页 |
2.2.3 主要试剂与溶液配制 | 第37页 |
2.2.4 方法 | 第37-38页 |
2.2.5 数据处理 | 第38页 |
2.3 结果 | 第38-44页 |
2.3.1 提取条件对紫甘蓝花青素提取的影响 | 第38-42页 |
2.3.1.1 不同提取剂对紫甘蓝花青素提取效率的影响 | 第38-39页 |
2.3.1.2 提取剂酸度对紫甘蓝花青素提取效率的影响 | 第39-40页 |
2.3.1.3 液固比对紫甘蓝花青素提取效率的影响 | 第40页 |
2.3.1.4 抽提时间对紫甘蓝花青素提取效率的影响 | 第40-41页 |
2.3.1.5 温度对紫甘蓝花青素提取效率的影响 | 第41-42页 |
2.3.2 测定常见蔬菜中总花青素含量 | 第42-44页 |
2.4 讨论 | 第44-45页 |
第三章 紫甘蓝花青素抑制三阴性乳腺癌的机理 | 第45-78页 |
3.1 引言 | 第45页 |
3.2 材料与方法 | 第45-57页 |
3.2.1 动物 | 第45页 |
3.2.2 设备 | 第45-46页 |
3.2.3 主要试剂及耗材 | 第46页 |
3.2.4 方法 | 第46-57页 |
3.2.4.1 乳腺癌细胞系培养 | 第47-48页 |
3.2.4.2 RT-qPCR | 第48-50页 |
3.2.4.3 Western Blot | 第50-52页 |
3.2.4.4 BALB/c裸鼠处理 | 第52-53页 |
3.2.4.5 BALB/c裸鼠活体成像实时观测 | 第53页 |
3.2.4.6 BALB/c裸鼠肿瘤样本的采集 | 第53页 |
3.2.4.7 组织病理学分析 | 第53-55页 |
3.2.4.8 CCK-8法检测细胞增值 | 第55页 |
3.2.4.9 流式细胞仪检测细胞周期(PI染色) | 第55-56页 |
3.2.4.10 流式细胞仪检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染) | 第56页 |
3.2.4.11 流式细胞仪检测细胞线粒体ROS(MitoTracker Red CM-H2XRos) | 第56页 |
3.2.4.12 细胞凋亡检测(试剂盒TUNEL染色) | 第56-57页 |
3.2.4.13 微量热涌动分析(MST) | 第57页 |
3.2.4.14 数据处理 | 第57页 |
3.3 结果 | 第57-76页 |
3.3.1 Cy-3-glu抑制三阴性乳腺癌(TNBC)的生长 | 第57-60页 |
3.3.2 Cy-3-glu诱导TNBC细胞凋亡 | 第60-65页 |
3.3.2.1 Cy-3-glu不抑制MDA-MB-231的细胞周期 | 第60-61页 |
3.3.2.2 Cy-3-glu促进MDA-MB-231细胞死亡 | 第61页 |
3.3.2.3 Cy-3-glu不是通过细胞程序性坏死促进细胞死亡 | 第61-62页 |
3.3.2.4 Cy-3-glu促进MDA-MB-231细胞调亡 | 第62-64页 |
3.3.2.5 Cy-3-glu不通过线粒体途径诱导MDA-MB-231细胞凋亡 | 第64-65页 |
3.3.3 Cy-3-glu抑制雌激素诱导的TNBC细胞生长 | 第65-67页 |
3.3.3.1 雌激素激活MDA-MB-231细胞p-AKT信号通路 | 第65-66页 |
3.3.3.2 Cy-3-glu反转由雌激素引起的MDA-MB-231细胞增值 | 第66-67页 |
3.3.4 Cy-3-glu直接与ERa36配体结合域(LBD)结合并抑制其下游信号通路 | 第67-71页 |
3.3.4.1 Cy-3-glu直接结合ERa36-LBD | 第67-68页 |
3.3.4.2 Cy-3-glu抑制TNBC细胞ERa36下游信号通路 | 第68-69页 |
3.3.4.3 乳腺癌细胞系EGFR和ERa36的表达 | 第69-70页 |
3.3.4.4 Cy-3-glu直接与ERa36结合蛋白酶体途径降解下游的EGFR | 第70-71页 |
3.3.5 饲喂紫甘蓝提取物(RCE)抑制MDA-MB-231细胞体内生长 | 第71-74页 |
3.3.6 三阴性乳腺癌病人肿瘤组织ERa36和EGFR的免疫组化染色 | 第74-76页 |
3.4 讨论 | 第76-78页 |
第四章 紫甘蓝花青素抑制小鼠黑色素瘤的机理 | 第78-92页 |
4.1 引言 | 第78页 |
4.2 材料与方法 | 第78-83页 |
4.2.1 动物 | 第78页 |
4.2.2 设备 | 第78-79页 |
4.2.3 主要试剂及耗材 | 第79页 |
4.2.4 方法 | 第79-83页 |
4.2.4.1 小鼠黑色素瘤细胞系B16-F10培养 | 第79页 |
4.2.4.2 RT-qPCR | 第79-81页 |
4.2.4.3 Western Blot | 第81页 |
4.2.4.4 C57小鼠处理 | 第81页 |
4.2.4.5 C57小鼠活体成像实时观测 | 第81页 |
4.2.4.6 C57小鼠肿瘤样本的采集 | 第81页 |
4.2.4.7 组织病理学分析 | 第81-82页 |
4.2.4.8 CCK-8法检测细胞增值 | 第82页 |
4.2.4.9 流式细胞仪检测细胞周期(PI染色) | 第82页 |
4.2.4.10 流式细胞仪检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染) | 第82页 |
4.2.4.11 细胞线粒体ROS检测(MitoTracker Red CM-H2XRos) | 第82页 |
4.2.4.12 细胞凋亡检测(试剂盒TUNEL染色) | 第82页 |
4.2.4.13 小鼠原代黑色素细胞分离 | 第82页 |
4.2.4.14 数据处理 | 第82-83页 |
4.3 结果 | 第83-90页 |
4.3.1 Cy-3-glu抑制B16-F10细胞的生长 | 第83-84页 |
4.3.2 Cy-3-glu诱导B16-F10细胞凋亡 | 第84-85页 |
4.3.3 Cy-3-glu通过线粒体途径诱导B16-F10细胞凋亡 | 第85-86页 |
4.3.4 Cy-3-glu抑制B16-F10的细胞周期 | 第86-87页 |
4.3.5 Cy-3-glu通过抑制RAD51表达促进B16-F10凋亡 | 第87-89页 |
4.3.6 饲喂紫甘蓝提取物(RCE)抑制B16-F10细胞体内生长 | 第89-90页 |
4.4 讨论 | 第90-92页 |
第五章 结论与展望 | 第92-93页 |
5.1 结论 | 第92页 |
5.2 展望 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
个人简介 | 第100页 |