摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
文献综述 | 第11-28页 |
第一章 稻曲病研究进展 | 第12-20页 |
·稻曲病的症状和危害 | 第12-13页 |
·稻曲病发病的影响因素及其防治 | 第13-14页 |
·稻曲病菌的分类地位 | 第14-15页 |
·稻曲病菌的生物学性状 | 第15-16页 |
·稻曲病菌的侵染 | 第16-17页 |
·稻曲病菌的分子生物学研究 | 第17-20页 |
第二章 农杆菌介导转化在真菌功能基因研究中的进展 | 第20-26页 |
1 农杆菌介导真菌遗传转化的原理 | 第20页 |
2 农杆菌介导真菌转化的载体系统 | 第20-21页 |
·共整合载体系统 | 第20-21页 |
·双元载体系统 | 第21页 |
3 农杆菌介导遗传转化的特点 | 第21-22页 |
·转化子稳定 | 第21页 |
·转化效率高 | 第21-22页 |
·操作简便 | 第22页 |
4 影响农杆菌介导转化效率的因素 | 第22-23页 |
·共培养的时间 | 第22-23页 |
·诱导物的添加 | 第23页 |
·农杆菌菌株 | 第23页 |
5 农杆菌介导遗传转化在真菌功能基因研究中的应用 | 第23-26页 |
·T-DNA标记功能基因 | 第23-24页 |
·利用基因敲除研究基因功能 | 第24-26页 |
第三章 本研究选题依据及意义 | 第26-28页 |
研究内容 | 第28-70页 |
第一章 稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆 | 第30-50页 |
摘要 | 第30页 |
ABSTRACT | 第30-31页 |
1. 材料和方法 | 第31-42页 |
·试验材料 | 第31页 |
·突变菌株B-726生物学性状分析 | 第31-32页 |
·突变菌株B-726的分子检测 | 第32-34页 |
·Southern杂交检测B-726基因组中T-DNA插入的拷贝数 | 第34-36页 |
·突变菌株B-726的T-DNA插入位点侧翼序列的克隆与分析 | 第36-40页 |
·T-DNA侧翼序列上功能基因的克隆 | 第40-41页 |
·基因在野生菌株P1和突变菌株B-726中表达量分析 | 第41-42页 |
2. 结果和分析 | 第42-48页 |
·突变菌株B-726的生物学特性 | 第42-43页 |
·突变菌株B-726的分子检测 | 第43-44页 |
·T-DNA侧翼序列的克隆和分析 | 第44-45页 |
·T-DNA侧翼序列上功能基因的克隆 | 第45-48页 |
·基因在突变菌株B-726中的表达量分析 | 第48页 |
3. 讨论 | 第48-50页 |
第二章 稻曲病菌致病力丧失突变菌株B-1015的T-DNA标记基因的克隆 | 第50-62页 |
摘要 | 第50页 |
Abstract | 第50-51页 |
1. 材料和方法 | 第51-54页 |
·试验材料 | 第51页 |
·突变菌株B-1015生物学性状分析 | 第51页 |
·突变菌株B-1015的分子检测 | 第51-52页 |
·Southern杂交检测B-1015基因组中T-DNA插入的拷贝数 | 第52-53页 |
·突变菌株B-1015的T-DNA插入位点侧翼序列分析 | 第53页 |
·T-DNA标记基因的克隆 | 第53页 |
·基因在野生菌株P1和突变菌株B-1015中表达量分析 | 第53-54页 |
2. 结果和分析 | 第54-59页 |
·突变菌株B-1015的生物学性状 | 第54-55页 |
·突变菌株B-1015的分子检测结果 | 第55页 |
·突变菌株B-1015中T-DNA侧翼序列克隆与分析 | 第55-56页 |
·突变菌株B-1015中T-DNA标记基因的克隆 | 第56-58页 |
·Uvt-1015R和Uvt-1015L基因在突变菌株B-1015中的表达分析 | 第58-59页 |
3. 讨论 | 第59-62页 |
第三章 农杆菌介导的稻曲病菌功能基因敲除 | 第62-70页 |
摘要 | 第62页 |
Abstract | 第62页 |
1. 材料和方法 | 第62-66页 |
·材料 | 第62-63页 |
·基因敲除盒的构建 | 第63-64页 |
·基因敲除载体的构建 | 第64-65页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第65页 |
·农杆菌介导转化稻曲病菌 | 第65-66页 |
·稻曲病菌的敲除突变菌株的分子检测 | 第66页 |
2. 结果和分析 | 第66-68页 |
·基因上游片段、下游片段和HPH基因的克隆 | 第66页 |
·基因敲除载体的构建 | 第66-67页 |
·农杆菌介导转化的UVT-726基因敲除 | 第67页 |
·转化子的PCR验证 | 第67-68页 |
3. 讨论 | 第68-70页 |
全文总结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
附录 实验中所使用的培养基及试剂的配制方法 | 第80-84页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第84-86页 |
致谢 | 第86页 |