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稻曲病菌T-DNA插入突变体B-726、B-1015侧翼相关基因的克隆

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
文献综述第11-28页
 第一章 稻曲病研究进展第12-20页
   ·稻曲病的症状和危害第12-13页
   ·稻曲病发病的影响因素及其防治第13-14页
   ·稻曲病菌的分类地位第14-15页
   ·稻曲病菌的生物学性状第15-16页
   ·稻曲病菌的侵染第16-17页
   ·稻曲病菌的分子生物学研究第17-20页
 第二章 农杆菌介导转化在真菌功能基因研究中的进展第20-26页
  1 农杆菌介导真菌遗传转化的原理第20页
  2 农杆菌介导真菌转化的载体系统第20-21页
   ·共整合载体系统第20-21页
   ·双元载体系统第21页
  3 农杆菌介导遗传转化的特点第21-22页
   ·转化子稳定第21页
   ·转化效率高第21-22页
   ·操作简便第22页
  4 影响农杆菌介导转化效率的因素第22-23页
   ·共培养的时间第22-23页
   ·诱导物的添加第23页
   ·农杆菌菌株第23页
  5 农杆菌介导遗传转化在真菌功能基因研究中的应用第23-26页
   ·T-DNA标记功能基因第23-24页
   ·利用基因敲除研究基因功能第24-26页
 第三章 本研究选题依据及意义第26-28页
研究内容第28-70页
 第一章 稻曲病菌突变体B-726生物学性状分析及其T-DNA插入位点侧翼序列的克隆第30-50页
  摘要第30页
  ABSTRACT第30-31页
  1. 材料和方法第31-42页
     ·试验材料第31页
     ·突变菌株B-726生物学性状分析第31-32页
     ·突变菌株B-726的分子检测第32-34页
     ·Southern杂交检测B-726基因组中T-DNA插入的拷贝数第34-36页
     ·突变菌株B-726的T-DNA插入位点侧翼序列的克隆与分析第36-40页
     ·T-DNA侧翼序列上功能基因的克隆第40-41页
     ·基因在野生菌株P1和突变菌株B-726中表达量分析第41-42页
  2. 结果和分析第42-48页
     ·突变菌株B-726的生物学特性第42-43页
     ·突变菌株B-726的分子检测第43-44页
     ·T-DNA侧翼序列的克隆和分析第44-45页
     ·T-DNA侧翼序列上功能基因的克隆第45-48页
     ·基因在突变菌株B-726中的表达量分析第48页
  3. 讨论第48-50页
 第二章 稻曲病菌致病力丧失突变菌株B-1015的T-DNA标记基因的克隆第50-62页
  摘要第50页
  Abstract第50-51页
  1. 材料和方法第51-54页
     ·试验材料第51页
     ·突变菌株B-1015生物学性状分析第51页
     ·突变菌株B-1015的分子检测第51-52页
     ·Southern杂交检测B-1015基因组中T-DNA插入的拷贝数第52-53页
     ·突变菌株B-1015的T-DNA插入位点侧翼序列分析第53页
     ·T-DNA标记基因的克隆第53页
     ·基因在野生菌株P1和突变菌株B-1015中表达量分析第53-54页
  2. 结果和分析第54-59页
   ·突变菌株B-1015的生物学性状第54-55页
   ·突变菌株B-1015的分子检测结果第55页
   ·突变菌株B-1015中T-DNA侧翼序列克隆与分析第55-56页
   ·突变菌株B-1015中T-DNA标记基因的克隆第56-58页
   ·Uvt-1015R和Uvt-1015L基因在突变菌株B-1015中的表达分析第58-59页
  3. 讨论第59-62页
 第三章 农杆菌介导的稻曲病菌功能基因敲除第62-70页
  摘要第62页
  Abstract第62页
  1. 材料和方法第62-66页
     ·材料第62-63页
     ·基因敲除盒的构建第63-64页
     ·基因敲除载体的构建第64-65页
     ·冻融法转化农杆菌第65页
     ·农杆菌介导转化稻曲病菌第65-66页
     ·稻曲病菌的敲除突变菌株的分子检测第66页
  2. 结果和分析第66-68页
   ·基因上游片段、下游片段和HPH基因的克隆第66页
   ·基因敲除载体的构建第66-67页
     ·农杆菌介导转化的UVT-726基因敲除第67页
     ·转化子的PCR验证第67-68页
  3. 讨论第68-70页
全文总结第70-72页
参考文献第72-80页
附录 实验中所使用的培养基及试剂的配制方法第80-84页
攻读学位期间发表的学术论文第84-86页
致谢第86页

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