摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
英文缩略表(Abbreviation) | 第11-13页 |
第一篇 文献综述 | 第13-35页 |
1. EHEC O157:H7的主要毒力因子 | 第13-17页 |
·紧密素 | 第13-14页 |
·志贺毒素 | 第14-16页 |
·溶血素和致病性质粒编码的其他毒力基因 | 第16页 |
·脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS) | 第16-17页 |
2 O157:H7的流行病学 | 第17-19页 |
·流行病学特点 | 第17页 |
·流行情况 | 第17-19页 |
3 临床特征 | 第19页 |
4 致病机制 | 第19-22页 |
·A/E损伤 | 第19-21页 |
·产生志贺毒素和溶血素 | 第21页 |
·炎症 | 第21-22页 |
5 EHEC O157:H7检测方法 | 第22-27页 |
·常规性检测方法 | 第22-23页 |
·血清学检测方法 | 第23页 |
·免疫学检测 | 第23-25页 |
·分子生物学检测方法 | 第25-27页 |
6 防控策略 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-35页 |
第二篇 试验研究 | 第35-71页 |
第一章 EHEC O157:H7紧密素(intimin)单克隆抗体的制备与鉴定 | 第35-51页 |
1 材料 | 第36-37页 |
·菌株 | 第36页 |
·试验动物及细胞 | 第36页 |
·试验主要试剂和仪器 | 第36-37页 |
2 方法 | 第37-42页 |
·抗原的制备 | 第37页 |
·免疫动物 | 第37-38页 |
·细胞融合 | 第38-39页 |
·间接ELISA最佳抗原包被浓度和血清稀释倍数的确定 | 第39-40页 |
·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第40页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第40页 |
·阳性杂交瘤细胞的冻存和复苏 | 第40-41页 |
·MAb腹水的制备 | 第41页 |
·间接ELISA方法检测单克隆抗体特异性及单抗对EHEC O157:H7的初步检测 | 第41页 |
·单克隆抗体活性鉴定 | 第41-42页 |
·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性鉴定 | 第42页 |
·腹水敏感性测定 | 第42页 |
3 结果 | 第42-47页 |
·Intimin重组蛋白的表达、纯化 | 第42-43页 |
·细胞融合率、阳性率与细胞克隆 | 第43页 |
·间接ELISA方法的建立 | 第43-44页 |
·间接ELISA方法检测单克隆抗体特异性及单抗对EHEC O157:H7的初步检测 | 第44-45页 |
·单抗对intimin最小检出限的初步测定 | 第45-46页 |
·Western-blot检测 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |
第二章 EHEC O157双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第51-71页 |
1 材料 | 第51-52页 |
·菌株与实验动物 | 第51-52页 |
·抗体 | 第52页 |
·主要试剂及仪器 | 第52页 |
2 方法 | 第52-56页 |
·兔抗EHEC O157:H7高免血清制备 | 第52-53页 |
·兔抗EHEC O157:H7高免血清的纯化 | 第53页 |
·提纯腹水、多抗效价和浓度测定 | 第53-54页 |
·双抗体夹心ELISA方法最适反应条件的确定 | 第54-55页 |
·特异性试验 | 第55-56页 |
·敏感性试验 | 第56页 |
·重复性试验 | 第56页 |
·阴阳临界值的确定 | 第56页 |
3 结果 | 第56-67页 |
·兔抗高免血清效价、纯度及浓度测定 | 第56-58页 |
·双夹心ELISA方法最适反应条件的确定 | 第58-65页 |
·特异性试验 | 第65页 |
·敏感性试验 | 第65-66页 |
·重复性试验 | 第66-67页 |
·阴阳临界值的确定 | 第67页 |
4 讨论 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
全文总结 | 第71-73页 |
附录:常用试剂的配制 | 第73-75页 |
硕士期间发表文章 | 第75-77页 |
致谢 | 第77页 |