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微流控芯片与可控适配体技术用于细胞代谢物分析及其相互作用的研究

学位论文数据集第1-4页
摘要第4-8页
ABSTRACT第8-22页
符号及缩略词说明第22-23页
第一章 适配体在微流控芯片上用于代谢物的研究第23-43页
   ·引言第23页
   ·代谢物的分析第23-30页
     ·代谢物分析的发展和意义第23-28页
     ·代谢物分析的方法第28-30页
   ·宫颈癌的研究进展第30-35页
     ·宫颈癌与肿瘤血管新生第30-32页
     ·肿瘤血管生长相关的标志物VEGF165第32-33页
     ·肿瘤血管生长相关的标志物PDGF-BB第33页
     ·肿瘤血管生长相关的标志物凝血酶第33-34页
     ·肿瘤血管新生与VEGF165、PDGF-BB和凝血酶之间的关系第34-35页
   ·功能性核酸适配体的发展和应用第35-39页
   ·微流控芯片在细胞代谢物中的研究应用第39-41页
   ·本课题研究内容、目的及意义第41-43页
第二章 微流控芯片上人血中凝血酶的可视化分析第43-55页
   ·引言第43-44页
   ·实验部分第44-49页
     ·试剂和材料第44-45页
     ·微流控芯片的设计和制作第45-46页
     ·核酸适配体在微流控芯片上的固定第46页
     ·样品的制备第46-47页
     ·适配体环形模板的制备第47-48页
     ·RCA扩增和凝血酶的检测第48-49页
   ·结果与讨论第49-54页
     ·基质的干扰以及缓冲液的影响第49-50页
     ·捕获探针TBA,检测探针APCT对凝血酶的影响第50-52页
     ·凝血酶检测中信号的放大第52-53页
     ·凝血酶检测方法的评价第53页
     ·实际样品的分析第53-54页
   ·本章小结及展望第54-55页
第三章 基于可控适配体在芯片毛细管电泳上用于多种细胞代谢物的分析第55-66页
   ·引言第55-57页
   ·实验部分第57-59页
     ·试剂和材料第57页
     ·细胞培养第57-58页
     ·样品的制备第58页
     ·芯片毛细管电泳的分析第58页
     ·数据处理第58-59页
   ·结果与讨论第59-65页
     ·多组份蛋白质分析中适配体在微流控芯片上的行为第59-61页
     ·荧光染料对分离度的影响第61-63页
     ·基于可控适配体在微流控芯片上蛋白质检测的选择性第63页
     ·方法的评价第63-65页
   ·本章小结及展望第65-66页
第四章 氧诱导细胞迁移和在线监测宫颈癌的肿瘤标志物第66-81页
   ·引言第66-68页
   ·实验部分第68-71页
     ·试剂第68页
     ·微流控芯片的设计和制作第68-69页
     ·克拉克电极(Clark oxygen electrode)测量细胞培养基中的溶解氧第69-70页
     ·适配体在微流控芯片上用于代谢物VEGF165蛋白的检测第70页
     ·不同氧梯度下细胞共培养第70-71页
     ·RNA的萃取和DNA的扩增第71页
   ·结果和讨论第71-80页
     ·两层微流控芯片结构的设计和制作第71-73页
     ·微流控芯片上氧梯度的稳定性第73页
     ·微流控芯片上细胞的生长第73-74页
     ·基于功能核酸适配体的VEGF165蛋白的检测第74-75页
     ·氧刺激下的HIF-1α和VEGF165 mRNA以及VEGF165蛋白含量变化第75-77页
     ·氧刺激下ROS的产生第77页
     ·氧刺激下细胞的迁移第77-80页
   ·本章小结第80-81页
第五章 基于选择性开关探针在微流控芯片上用于细胞代谢物VEGF165的检测和动力学研究第81-94页
   ·引言第81-82页
   ·实验部分第82-84页
     ·试剂和芯片的制作第82-83页
     ·铱复合物探针1的合成和表征第83-84页
     ·VEGF165与寡核苷酸的动力学研究第84页
   ·结果与讨论第84-93页
     ·寡核苷酸和铱复合物探针1用于VEGF165的分析第84-86页
     ·系统的稳定性和溶液快速混合的模拟第86-88页
     ·微流控芯片上G1’浓度的优化第88-89页
     ·在微流控芯片上VEGF165与G1’的动力学研究第89-91页
     ·选择性、灵敏度和回收率第91-93页
   ·本章小结和展望第93-94页
第六章 微流控芯片-质谱用于紫杉醇诱导细胞代谢物的研究第94-110页
   ·引言第94-95页
   ·实验部分第95-100页
     ·试剂第95-96页
     ·微流控芯片的设计和制作第96-97页
     ·微通道上适配体的修饰第97-98页
     ·RCA反应以及功能核酸适配体用于蛋白质的分析第98-99页
     ·细胞的培养以及增殖、凋亡、ROS和GSH的检测第99-100页
     ·流式细胞仪用于细胞周期、凋亡、ROS和GSH的检测第100页
     ·ESI-MS用于紫杉醇的分析第100页
   ·结果与讨论第100-109页
     ·芯片的设计和制作第101-102页
     ·细胞代谢蛋白质的检测第102-105页
     ·药物代谢紫杉醇的检测第105页
     ·紫杉醇诱导细胞的存活、凋亡以及细胞周期的变化第105-107页
     ·紫杉醇诱导细胞共培养下三种蛋白质的代谢第107-108页
     ·紫杉醇诱导细胞ROS和GSH含量的变化第108-109页
   ·本章结论和展望第109-110页
第七章 结论第110-112页
参考文献第112-127页
致谢第127-128页
研究成果及发表的学术论文第128-131页
作者和导师简介第131-132页
附件第132-133页

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