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水稻OsVDAC5互作蛋白筛选及其基因RNA干涉

摘要第1-8页
Abstract第8-9页
第一章 文献综述第9-18页
   ·VDACs蛋白第9-14页
     ·VDACs蛋白的结构和定位第9-11页
     ·VDACs蛋白的功能第11-13页
     ·VDACs蛋白与其他蛋白的互作第13-14页
   ·膜蛋白酵母双杂交系统第14-17页
   ·本研究的目的及意义第17-18页
第二章 OsVDAC5互作蛋白的筛选第18-52页
   ·材料与方法第18-21页
     ·实验材料第18-19页
     ·实验试剂及培养基第19-20页
     ·相关PCR引物第20-21页
   ·实验方法第21-36页
     ·OsVDAC5跨膜结构预测第21页
     ·7种OsVDAC5诱饵蛋白载体构建第21-28页
     ·7种OsVDAC5诱饵蛋白载体的筛选第28-30页
     ·优化互作蛋白筛选的严谨性第30-32页
     ·从YTB幼穗c DNA文库中筛选OsVDAC5互作蛋白第32-34页
     ·阳性克隆鉴定第34-35页
     ·潜在互作蛋白结构预测第35-36页
   ·结果与分析第36-50页
     ·OsVDAC5跨膜结构预测第36-37页
     ·水稻YTB叶片总RNA的提取第37-38页
     ·7个目的片段的获得第38页
     ·重组质粒pBT3-N- OsVDAC5 ?47和pBT3-SUC- Os VDAC5 ?47的鉴定第38-39页
     ·重组质粒pBT3-N- OsVDAC5 ?12和pBT3-SUC- Os VDAC5 ?12的鉴定第39-40页
     ·重组质粒pBT3- SUC- OsVDAC5210、155和75的鉴定第40-41页
     ·OsVDAC5诱饵蛋白的筛选第41-42页
     ·文库筛选前严谨性的优化第42-43页
     ·水稻YTB幼穗cDNA文库筛选第43-44页
     ·酵母阳性克隆鉴定第44-47页
     ·测序质粒进一步鉴定第47-48页
     ·潜在互作蛋白结构预测第48-50页
   ·结论第50-52页
第三章 OsVDAC5植物表达载体的构建及遗传转化第52-73页
   ·材料与方法第52-54页
     ·实验材料第52页
     ·实验试剂及培养基第52-54页
   ·实验方法第54-63页
     ·植物表达载体构建第54-60页
     ·表达载体pCAMBIA1301H、pCAMBIA2301及OsVDAC5 RNAi转入农杆菌第60页
     ·植物表达载体的遗传转化第60-61页
     ·转基因植株阳性鉴定第61-62页
     ·转基因阳性植株OsVDAC5基因表达量分析第62-63页
   ·结果与分析第63-72页
     ·日本晴叶片总RNA的提取第63页
     ·pCAMBIA1301H植物表达载体构建第63-64页
     ·pCAMBIA2301植物表达载体构建第64-67页
     ·OsVDAC5 RNAi植物表达载体构建第67-68页
     ·根瘤农杆菌的阳性鉴定第68-70页
     ·水稻遗传转化及T0代转基因植株的阳性鉴定第70-71页
     ·阳性植株RNA水平的检测第71-72页
   ·结论第72-73页
参考文献第73-80页
致谢第80页

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