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犬细小病毒DD分离株的鉴定及基因组序列分析

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
缩略语中英文对照表第10-12页
第一章 引言第12-21页
   ·概述第12-15页
     ·犬细小病毒的特性第12-13页
     ·犬细小病毒的分子生物学特征第13-14页
     ·CPV的进化和变异第14-15页
   ·流行病学研究第15-16页
     ·致病机理第15页
     ·分子流行病学研究第15-16页
   ·CPV诊断方法研究进展第16-18页
     ·传统方法第16页
     ·酶联免疫分析技术第16页
     ·单克隆抗体(McAb)技术第16-17页
     ·胶体金免疫层析技术第17页
     ·微量中和试验第17页
     ·聚合酶链式反应(PCR)方法第17页
     ·环介导等温扩增(LAMP)技术第17-18页
     ·核酸探针技术第18页
     ·核酸杂交技术第18页
   ·免疫预防和治疗第18-19页
     ·免疫预防第18-19页
     ·治疗第19页
   ·研究目的与意义第19-20页
   ·技术路线第20-21页
第二章 犬细小病毒DD分离株的鉴定和分型第21-40页
   ·试验材料第21-24页
     ·病料、细胞和病毒第21-22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·主要溶液与配置第23-24页
     ·试验动物第24页
   ·方法第24-31页
     ·病料处理第24页
     ·病毒培养第24页
     ·PCR检测第24-25页
     ·HA与HI试验第25-26页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)第26页
     ·电镜观察第26页
     ·病毒理化性质的鉴定第26-27页
     ·无菌检验第27页
     ·支原体检验第27页
     ·外源病毒检验第27-30页
     ·动物回归试验第30页
     ·毒株分型第30-31页
   ·结果第31-38页
     ·病毒培养第31页
     ·PCR检测结果第31-32页
     ·HA与HI试验第32页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)第32页
     ·电镜观察第32-33页
     ·病毒理化性质第33页
     ·无菌检验第33页
     ·支原体检验第33页
     ·外源病毒检验第33-36页
     ·动物回归试验第36-37页
     ·VP2基因测序和分型第37-38页
   ·讨论第38页
     ·CPV-DD株的细胞培养第38页
     ·VP2基因差异与抗原性的关系第38页
   ·小结第38-40页
第三章 犬细小病毒DD株全基因组序列测定及分析第40-55页
   ·试验材料第40-41页
     ·CPVDD株F3代浓缩病毒液第40-41页
     ·主要试剂第41页
     ·主要仪器第41页
     ·主要培养基与配置第41页
   ·试验方法第41-45页
     ·基因组分段测序第41-43页
     ·3’末端(3’-UTR)测序第43-45页
     ·拼接第45页
   ·结果第45-53页
     ·PCR扩增产物电泳检测结果第45-46页
     ·3’-UTR扩增及胶回收和菌液鉴定结果第46-47页
     ·测序结果及序列拼接第47页
     ·基因组结构第47页
     ·序列对比分析第47-48页
     ·VP1基因 5’端结构与功能预测分析第48-50页
     ·非翻译区结构与功能预测分析第50-53页
   ·讨论与小结第53-55页
     ·讨论第53-54页
     ·小结第54-55页
第四章 CPV-DD株种子批的建立及VP2基因变异研究第55-70页
   ·材料第55-56页
     ·毒株和细胞第55页
     ·主要仪器及试剂第55-56页
   ·方法第56-58页
     ·建立种子批第56页
     ·无菌检验第56页
     ·支原体检验第56页
     ·外源病毒检验第56页
     ·病毒对犬致病力和免疫保护力的测定第56页
     ·种子批的冻干保存第56-57页
     ·VP2基因测序及分析第57-58页
   ·结果第58-68页
     ·病毒在CRFK细胞上的传代培养第58页
     ·病毒HA效价和含量在传代过程中的变化第58-59页
     ·无菌检验结果第59-60页
     ·支原体检验结果第60页
     ·外源病毒检验结果第60-61页
     ·动物试验第61页
     ·冻干第61-62页
     ·VP2基因扩增和测序第62页
     ·VP2蛋白氨基酸序列比对分析第62-68页
     ·构建遗传系统进化树第68页
   ·讨论第68-69页
     ·CPV-DD株在CRFK细胞上的传代变异第68-69页
     ·遗传进化分析第69页
   ·小结第69-70页
第五章 结论与下一步工作设想第70-71页
   ·结论第70页
   ·下一步工作设想第70-71页
参考文献第71-76页
附录第76-87页
致谢第87-88页
作者个人简介第88页

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