| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 引言 | 第8-12页 |
| ·炸荚 | 第8-9页 |
| ·大豆炸荚性状 | 第8页 |
| ·大豆炸荚的相关形态及微观结构 | 第8-9页 |
| ·大豆炸荚的环境因素 | 第9页 |
| ·大豆炸荚的分子标记研究 | 第9页 |
| ·大豆的收货时间对炸荚的影响 | 第9页 |
| ·大豆遗传转化研究进展 | 第9-11页 |
| ·大豆转基因的方法 | 第9-11页 |
| ·农杆菌介导法 | 第10页 |
| ·微弹轰击法 | 第10页 |
| ·聚乙二醇介导法(PEG) | 第10-11页 |
| ·大豆转化的受体系统 | 第11页 |
| ·AGL8基因的研究进展 | 第11-12页 |
| 2 大豆AGL8基因的克隆及载体构建 | 第12-26页 |
| ·试验材料与试剂 | 第12页 |
| ·试验材料 | 第12页 |
| ·试验试剂 | 第12页 |
| ·试验仪器 | 第12页 |
| ·试验方法 | 第12-22页 |
| ·目的基因的查找 | 第12-13页 |
| ·设计引物 | 第13页 |
| ·RNA提取 | 第13-14页 |
| ·Trizol法提取大豆叶片RNA | 第13页 |
| ·RNA检测 | 第13-14页 |
| ·cDNA的合成 | 第14页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第14-15页 |
| ·目的片段的纯化回收 | 第15-16页 |
| ·目的片段连接T载体 | 第16页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第16-18页 |
| ·大肠杆菌的感受态制备 | 第16-17页 |
| ·大肠杆菌的热激转化 | 第17页 |
| ·菌落PCR鉴定 | 第17-18页 |
| ·测序 | 第18页 |
| ·植物表达载体构建 | 第18-22页 |
| ·大肠杆菌的质粒提取 | 第18-19页 |
| ·目的片段与载体双酶切 | 第19-20页 |
| ·酶切产物的连接 | 第20-21页 |
| ·连接产物的热激转化及检测 | 第21-22页 |
| ·结果与分析 | 第22-26页 |
| ·目的基因序列的获得 | 第22页 |
| ·RNA提取 | 第22-23页 |
| ·目的基因AGL8的PCR扩增 | 第23页 |
| ·目的基因产物测序 | 第23-24页 |
| ·载体构建 | 第24-26页 |
| ·质粒提取 | 第24页 |
| ·双酶切 | 第24-25页 |
| ·连接及大肠杆菌的热激转化 | 第25-26页 |
| 3 农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化 | 第26-35页 |
| ·工程菌制备 | 第26-28页 |
| ·试剂与菌株 | 第26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌质粒提取 | 第26页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第26-27页 |
| ·农杆菌热激转化 | 第27页 |
| ·农杆菌菌落PCR检测 | 第27页 |
| ·试验结果 | 第27-28页 |
| ·农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化 | 第28-35页 |
| ·试验仪器 | 第28页 |
| ·试验试剂 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-32页 |
| ·大豆种子的灭菌 | 第28-29页 |
| ·大豆种子的萌发 | 第29页 |
| ·制备大豆子叶节外植体 | 第29页 |
| ·侵染菌的制备 | 第29页 |
| ·侵染大豆子叶节 | 第29-30页 |
| ·筛选丛生芽 | 第30页 |
| ·丛生芽伸长的筛选 | 第30页 |
| ·生根 | 第30页 |
| ·大豆转化体的移栽 | 第30页 |
| ·转化植株基因组DNA提取 | 第30-31页 |
| ·PCR检测 | 第31页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测 | 第31-32页 |
| ·试验结果 | 第32-35页 |
| ·大豆遗传转化过程 | 第32页 |
| ·潮霉素浓度的筛选 | 第32页 |
| ·转化株的PCR检测 | 第32-33页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测 | 第33页 |
| ·转基因植株与野生型表形变化比较 | 第33-35页 |
| 4 GmAGL8生物信息学分析 | 第35-40页 |
| ·试验方法 | 第35-36页 |
| ·同源序列比对与大豆炸荚基因的查找 | 第35页 |
| ·GmAGL8的蛋白质结构图 | 第35页 |
| ·GmAGL8的氨基酸序列分析 | 第35页 |
| ·亲疏水性分析 | 第35页 |
| ·基因进化树分析 | 第35-36页 |
| ·试验结果 | 第36-40页 |
| ·同源序列的查找 | 第36页 |
| ·PpMADS6、FUL与GmAGL8的氨基酸序列比对 | 第36-37页 |
| ·GmAGL8的氨基酸序列分析 | 第37页 |
| ·GmAGL8的蛋白质结构图 | 第37-38页 |
| ·亲疏水性分析 | 第38页 |
| ·基因进化树分析 | 第38-40页 |
| 5 结论讨论与展望 | 第40-42页 |
| ·结论 | 第40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| ·展望 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 附录表 | 第45-50页 |
| 致谢 | 第50-52页 |
| 个人简历 | 第52页 |