| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-8页 |
| 缩略词英汉对照表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| 1 纤维素酶的国内外研究进展 | 第9-19页 |
| ·纤维素 | 第9-10页 |
| ·纤维素酶 | 第10-14页 |
| ·纤维素酶及其组成 | 第10-11页 |
| ·纤维素酶的来源 | 第11页 |
| ·纤维素酶的作用机制 | 第11-12页 |
| ·纤维素酶的调控机制 | 第12页 |
| ·纤维素酶的应用 | 第12-13页 |
| ·纤维素酶应用面临的挑战 | 第13-14页 |
| ·纤维素酶基因工程研究进展 | 第14-18页 |
| ·宿主生物细胞壁的特点及其对蛋白运输机制的研究 | 第14-15页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第15-16页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第16-17页 |
| ·植物表达系统 | 第17-18页 |
| ·烟曲霉内切酶基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 2 研究目的及意义 | 第19页 |
| 3 研究内容及方法 | 第19-20页 |
| 第二章 产纤维素酶菌株B23 的分子鉴定和EG基因的克隆 | 第20-30页 |
| 1 材料与方法 | 第20-25页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·菌种与载体 | 第20页 |
| ·酶与试剂 | 第20页 |
| ·常用仪器 | 第20页 |
| ·溶液配制 | 第20-21页 |
| ·常用培养基 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-25页 |
| ·纤维素酶菌株B23 ITS序列的鉴定 | 第21-23页 |
| ·纤维素酶菌株B23 EG基因的克隆 | 第23-25页 |
| 2 结果与讨论 | 第25-28页 |
| ·菌株B23 的分子鉴定 | 第25-27页 |
| ·菌株B23 的形态学观察 | 第25页 |
| ·菌株B23 ITS序列扩增 | 第25-26页 |
| ·菌株B23 ITS序列的菌液PCR检测及测序鉴定 | 第26-27页 |
| ·菌株B23 EG基因的克隆 | 第27-28页 |
| ·菌株B23 总RNA的提取 | 第27页 |
| ·菌株B23 EG基因的克隆及鉴定 | 第27-28页 |
| ·克隆片段的序列分析 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-30页 |
| ·产纤维素酶菌株B23 的鉴定 | 第28页 |
| ·菌株B23 EG基因的克隆及序列分析 | 第28-30页 |
| 第三章 烟曲霉EG基因在毕赤酵母中的表达及其酶学性质的分析 | 第30-41页 |
| 1 材料与方法 | 第30-36页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·菌种与载体 | 第30页 |
| ·酶与试剂 | 第30页 |
| ·常用仪器 | 第30-31页 |
| ·溶液配制 | 第31页 |
| ·常用培养基 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| ·毕赤酵母真核表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·重组质粒PPIC9K-EG线性化 | 第33-34页 |
| ·毕赤酵母的电击转化 | 第34页 |
| ·重组毕赤酵母的筛选和鉴定 | 第34页 |
| ·重组菌GS-9K-EG的诱导表达及SDS-PAGE检测 | 第34-35页 |
| ·表达产物的纯化 | 第35页 |
| ·原始菌株B23 及GS-9K-EG菌的酶活检测 | 第35-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-39页 |
| ·EG基因与真核表达载体PPIC9K的双酶切与回收 | 第36页 |
| ·重组表达质粒PPIC9K-EG菌液的PCR及双酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组质粒PPIC9K-EG线性化结果 | 第37页 |
| ·重组表达菌的筛选 | 第37-38页 |
| ·阳性转化子的筛选 | 第37-38页 |
| ·重组酵母的PCR鉴定 | 第38页 |
| ·重组菌GS-9K-EG表达产物的SDS-PAGE检测 | 第38页 |
| ·重组菌GS-9K-EG的酶活检测 | 第38-39页 |
| ·刚果红染色结果 | 第38-39页 |
| ·内切酶活测定结果 | 第39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 全文结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51-52页 |
| 导师简介 | 第52-53页 |
