致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
目录 | 第10-13页 |
第一章 引言 | 第13-33页 |
·辐射生物学概述 | 第13-16页 |
·辐射的基本概念 | 第13-14页 |
·辐射生物学的基本概念 | 第14-15页 |
·细胞的辐射损伤 | 第15-16页 |
·辐射诱导的旁观者效应 | 第16-22页 |
·辐射旁效应的客观存在 | 第16-18页 |
·辐射旁效应的产生机制 | 第18-20页 |
·辐射旁效应的影响因素 | 第20-21页 |
·辐射旁效应的研究意义 | 第21-22页 |
·microRNA简介 | 第22-28页 |
·microRNA的发生 | 第22-24页 |
·microRNA的作用机制 | 第24-25页 |
·microRNA的功能 | 第25-27页 |
·microRNA与辐射生物效应 | 第27-28页 |
·细胞外RNA | 第28-31页 |
·本课题研究目的及拟解决的科学问题 | 第31-33页 |
第二章 实验材料与方法 | 第33-45页 |
·主要实验试剂 | 第33-35页 |
·实验方法 | 第35-43页 |
·细胞及其培养 | 第35页 |
·细胞辐照条件 | 第35-36页 |
·条件培养基处理 | 第36页 |
·细胞RNA样品制备 | 第36页 |
·细胞外RNA样品的分离与收集 | 第36-38页 |
·Solexa测序 | 第38页 |
·实时荧光定量PCR | 第38-40页 |
·RNA的脂质体转染 | 第40页 |
·微核实验 | 第40-41页 |
·细胞克隆存活实验 | 第41页 |
·免疫荧光分析实验 | 第41-42页 |
·蛋白免疫印迹实验(Western blot) | 第42页 |
·活性氧水平的测定 | 第42-43页 |
·外泌体荧光标记A375细胞 | 第43页 |
·数据统计学分析 | 第43页 |
·主要实验仪器 | 第43-45页 |
第三章 microRNA参与条件培养基介导的辐射旁效应 | 第45-52页 |
·前言 | 第45-46页 |
·实验结果 | 第46-50页 |
·辐射通过条件培养基诱导未照射MRC5细胞产生旁效应 | 第46-48页 |
·辐射引起细胞内和细胞分泌的miRNAs发生变化 | 第48-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
第四章 mi RNA-21参与辐射旁效应 | 第52-62页 |
·前言 | 第52-53页 |
·实验结果 | 第53-61页 |
·对辐射前后细胞分泌的miRNAs进行测序分析与筛选 | 第53-56页 |
·mi RNA-21在直接照射细胞、培养基和旁细胞中的表达模式 | 第56-59页 |
·上调miRNA-21水平在未照射细胞中引起与辐射损伤类似的效应 | 第59-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
第五章 miR-21通过外泌体途径参与辐射诱导的旁观者效应 | 第62-75页 |
·前言 | 第62-64页 |
·实验结果 | 第64-73页 |
·miRNAs在细胞之间穿梭 | 第64-68页 |
·miRNA-21通过外泌体的方式参与辐射诱导的旁观者效应 | 第68-73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
第六章 mi RNA参与肿瘤细胞与正常细胞之间的旁效应 | 第75-86页 |
·前言 | 第75-76页 |
·实验结果 | 第76-83页 |
·miRNA通过外泌体途径在肿瘤细胞与正常细胞之间穿梭 | 第76-80页 |
·辐照后A375细胞分泌miRNA的测序及筛选验证 | 第80-83页 |
·讨论 | 第83-86页 |
第七章 结论与展望 | 第86-88页 |
·结论 | 第86页 |
·展望 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-105页 |
附录Ⅰ 缩略词表 | 第105-106页 |
附录Ⅱ 辐照后MRC5细胞分泌miRNA的Solexa测序数据 | 第106-112页 |
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第112-113页 |