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辐射诱导旁观者效应相关microRNA的研究

致谢第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-10页
目录第10-13页
第一章 引言第13-33页
   ·辐射生物学概述第13-16页
     ·辐射的基本概念第13-14页
     ·辐射生物学的基本概念第14-15页
     ·细胞的辐射损伤第15-16页
   ·辐射诱导的旁观者效应第16-22页
     ·辐射旁效应的客观存在第16-18页
     ·辐射旁效应的产生机制第18-20页
     ·辐射旁效应的影响因素第20-21页
     ·辐射旁效应的研究意义第21-22页
   ·microRNA简介第22-28页
     ·microRNA的发生第22-24页
     ·microRNA的作用机制第24-25页
     ·microRNA的功能第25-27页
     ·microRNA与辐射生物效应第27-28页
   ·细胞外RNA第28-31页
   ·本课题研究目的及拟解决的科学问题第31-33页
第二章 实验材料与方法第33-45页
   ·主要实验试剂第33-35页
   ·实验方法第35-43页
     ·细胞及其培养第35页
     ·细胞辐照条件第35-36页
     ·条件培养基处理第36页
     ·细胞RNA样品制备第36页
     ·细胞外RNA样品的分离与收集第36-38页
     ·Solexa测序第38页
     ·实时荧光定量PCR第38-40页
     ·RNA的脂质体转染第40页
     ·微核实验第40-41页
     ·细胞克隆存活实验第41页
     ·免疫荧光分析实验第41-42页
     ·蛋白免疫印迹实验(Western blot)第42页
     ·活性氧水平的测定第42-43页
     ·外泌体荧光标记A375细胞第43页
     ·数据统计学分析第43页
   ·主要实验仪器第43-45页
第三章 microRNA参与条件培养基介导的辐射旁效应第45-52页
   ·前言第45-46页
   ·实验结果第46-50页
     ·辐射通过条件培养基诱导未照射MRC5细胞产生旁效应第46-48页
     ·辐射引起细胞内和细胞分泌的miRNAs发生变化第48-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 mi RNA-21参与辐射旁效应第52-62页
   ·前言第52-53页
   ·实验结果第53-61页
     ·对辐射前后细胞分泌的miRNAs进行测序分析与筛选第53-56页
     ·mi RNA-21在直接照射细胞、培养基和旁细胞中的表达模式第56-59页
     ·上调miRNA-21水平在未照射细胞中引起与辐射损伤类似的效应第59-61页
   ·讨论第61-62页
第五章 miR-21通过外泌体途径参与辐射诱导的旁观者效应第62-75页
   ·前言第62-64页
   ·实验结果第64-73页
     ·miRNAs在细胞之间穿梭第64-68页
     ·miRNA-21通过外泌体的方式参与辐射诱导的旁观者效应第68-73页
   ·讨论第73-75页
第六章 mi RNA参与肿瘤细胞与正常细胞之间的旁效应第75-86页
   ·前言第75-76页
   ·实验结果第76-83页
     ·miRNA通过外泌体途径在肿瘤细胞与正常细胞之间穿梭第76-80页
     ·辐照后A375细胞分泌miRNA的测序及筛选验证第80-83页
   ·讨论第83-86页
第七章 结论与展望第86-88页
   ·结论第86页
   ·展望第86-88页
参考文献第88-105页
附录Ⅰ 缩略词表第105-106页
附录Ⅱ 辐照后MRC5细胞分泌miRNA的Solexa测序数据第106-112页
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果第112-113页

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