| 中文摘要 | 第4-9页 |
| abstract | 第9-14页 |
| 引言 | 第20-24页 |
| 参考文献 | 第22-24页 |
| 第一部分 VEGFR2和VTN在胃癌中的表达及其与临床和预后的关系 | 第24-41页 |
| 材料 | 第24页 |
| 一、实验材料和仪器设备 | 第24页 |
| 二、试剂 | 第24页 |
| 方法 | 第24-26页 |
| 一、免疫组化法检测胃癌组织中VEGFR2与VTN的表达状况： | 第24-25页 |
| 二、免疫组化评价： | 第25页 |
| 三、统计学处理 | 第25-26页 |
| 结果 | 第26-33页 |
| 一、VEGFR2和VTN在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系 | 第26-29页 |
| 二、胃癌患者VEGFR2与VTN表达的相关性分析 | 第29-30页 |
| 三、胃癌患者VEGFR2和VTN的表达与生存的关系 | 第30-31页 |
| 四、胃癌患者单因素及多因素生存分析 | 第31-33页 |
| 讨论 | 第33-37页 |
| 结论 | 第37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 第二部分 VEGFR2参与胃癌恶性生物学行为的机制研究 | 第41-73页 |
| 材料 | 第41-42页 |
| 一、实验材料和仪器设备 | 第41-42页 |
| 二、试剂 | 第42页 |
| 方法 | 第42-56页 |
| 一、细胞培养 | 第42页 |
| 二、VEGFR2-shRNA及VEGFR2-pcDNA3.1 慢病毒细胞转染 | 第42-48页 |
| 三、实时定量PCR检测MKN-45、MKN-28、NCI-N87、SCH和GES-1 细胞中VEGFR2mRNA的表达情况 | 第48-50页 |
| 四、Western blotting检测VEGFR2蛋白在MKN-45、MKN-28、NCI-N87、SCH和GES-1 细胞中的表达情况 | 第50-53页 |
| 五、CCK-8 法检测细胞增殖能力 | 第53页 |
| 六、Transwell法检测VEGFR2表达对胃癌细胞体外侵袭力的影响 | 第53页 |
| 七、粘附实验检测细胞粘附能力 | 第53-54页 |
| 八、流式细胞术检测细胞周期 | 第54页 |
| 九、尾静脉接种及动物活体成像实验操作步骤： | 第54-56页 |
| 十、统计学处理 | 第56页 |
| 结果 | 第56-68页 |
| 一、VEGFR2在多种胃癌细胞系中的表达 | 第56-57页 |
| 二、转染干扰质粒对MKN-45 细胞VEGFR2表达的影响 | 第57-58页 |
| 三、转染干扰质粒对MKN-45 细胞增殖能力的影响 | 第58-59页 |
| 四、转染干扰质粒对MKN-45 细胞侵袭能力的影响 | 第59页 |
| 五、转染干扰质粒对MKN-45 细胞粘附能力的影响 | 第59-60页 |
| 六、转染干扰质粒对MKN-45 细胞周期的影响 | 第60-61页 |
| 七、转染干扰质粒对MKN-45 细胞裸鼠种植瘤生长的影响 | 第61-63页 |
| 八、转染表达质粒对SCH细胞VEGFR2表达的影响 | 第63页 |
| 九、转染表达质粒对SCH细胞增殖能力的影响 | 第63-64页 |
| 十、转染表达质粒对SCH细胞侵袭能力的影响 | 第64页 |
| 十一、转染表达质粒对SCH细胞粘附能力的影响 | 第64-65页 |
| 十二、转染表达质粒对SCH细胞周期的影响 | 第65-66页 |
| 十三、转染表达质粒对SCH细胞裸鼠种植瘤生长的影响 | 第66-68页 |
| 讨论 | 第68-70页 |
| 结论 | 第70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 第三部分 干预VEGFR2对下游信号通路的生物信息学研究 | 第73-96页 |
| 材料 | 第73页 |
| 一、实验材料和仪器设备 | 第73页 |
| 二、试剂 | 第73页 |
| 方法 | 第73-77页 |
| 一、实验流程 | 第73-74页 |
| 二、实验过程 | 第74-75页 |
| 三、杂交 | 第75-76页 |
| 四、样品质检 | 第76-77页 |
| 结果 | 第77-92页 |
| 一、芯片原始数据与样品编号对应表 | 第77页 |
| 二、芯片数据的QC | 第77-80页 |
| 1. Signal Histogram图 | 第77-78页 |
| 2. Relative Signal Box Plot图 | 第78-79页 |
| 3. Pearson's Correlation(signal)图 | 第79-80页 |
| 4. PCA图 | 第80页 |
| 三、芯片数据分析结果 | 第80-92页 |
| 1. 有显著差异表现的基因数目 | 第80-81页 |
| 2. 火山图 | 第81-82页 |
| 3. 散点图 | 第82-83页 |
| 4. 聚类图 | 第83页 |
| 5. IPA简介 | 第83页 |
| 6. 经典通路分析 | 第83-86页 |
| 7. 上游调控分析 | 第86-87页 |
| 8. 疾病和功能分析 | 第87-89页 |
| 9. 调控效应分析 | 第89-90页 |
| 10. 互作网络分析 | 第90-92页 |
| 11、VEGFR2（KDR）调控VTN(Vitronetcin)的基因互作调控网络 | 第92页 |
| 讨论 | 第92-94页 |
| 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-96页 |
| 第四部分 VEGFR2通过调控VTN促进胃癌生长、转移的机制研究 | 第96-122页 |
| 材料 | 第96-97页 |
| 一、实验材料和仪器设备 | 第96页 |
| 二、试剂 | 第96-97页 |
| 方法 | 第97-107页 |
| 一、细胞培养 | 第97页 |
| 二、VTN-shRNA及VTN-pcDNA3.1 慢病毒细胞转染 | 第97-101页 |
| 三、实时定量PCR检测MKN-45、MKN-28、NCI-N87和SCH细胞中VEGFR2及VTNmRNA的表达情况 | 第101-103页 |
| 四、Western blotting检测VEGFR2和VTN蛋白在MKN-45、MKN-28、NCI-N87、和SCH细胞中的表达情况 | 第103-105页 |
| 五、CCK-8 法检测细胞增殖能力 | 第105-106页 |
| 六、Transwell法检测胃癌细胞体外侵袭力 | 第106页 |
| 七、统计学处理 | 第106-107页 |
| 结果 | 第107-114页 |
| 一、VEGFR2和VTN蛋白及mRNA在四种胃癌细胞株中的表达 | 第107页 |
| 二、转染VEGFR2干扰质粒对MKN-45 细胞VTN表达的影响 | 第107-108页 |
| 三、转染表达质粒对SCH细胞VTN表达的影响 | 第108-109页 |
| 四、共转染VEGFR2及VTN干扰质粒对MKN-45 细胞VEGFR2及VTN表达的影响 | 第109-110页 |
| 五、共转染VEGFR2及VTN表达质粒对SCH细胞VEGFR2及VTN表达的影响 | 第110-111页 |
| 六、共转染VEGFR2及VTN干扰质粒对MKN-45 细胞增殖能力的影响 | 第111-112页 |
| 七、共转染VEGFR2及VTN表达质粒对SCH细胞增殖能力的影响 | 第112-113页 |
| 八、共转染VEGFR2及VTN干扰质粒对MKN-45 细胞侵袭能力的影响 | 第113-114页 |
| 九、共转染VEGFR2及VTN表达质粒对SCH细胞侵袭能力的影响 | 第114页 |
| 讨论 | 第114-118页 |
| 结论 | 第118页 |
| 参考文献 | 第118-122页 |
| 综述 1 | 第122-138页 |
| 参考文献 | 第132-138页 |
| 综述 2 | 第138-152页 |
| 参考文献 | 第147-152页 |
| 中英文对照缩略词表 | 第152-153页 |
| 攻读学位期间公开发表的论文 | 第153-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
