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具有H1N1/2009病毒相同基因组合方式的流感病毒在猪体传代的毒力增强机制

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-13页
插图目录第13-14页
附表目录第14-15页
符号与縮略语第15-17页
主要仪器设备第17-18页
第一章 文献综述第18-35页
   ·A型流感病毒的进化第18-24页
     ·A型流感病毒的生态学第18-19页
     ·A型流感病毒的宿主限制第19-20页
     ·A型流感病毒的跨宿主传播的进化方式第20-22页
     ·大流行流感病毒的重排模式第22-24页
   ·猪是流感病毒的混合器第24-27页
     ·猪在流感病毒传播中的作用第24-25页
     ·猪对人流感和禽流感病毒易感第25-26页
     ·猪、人、禽流感病毒在猪体内的重排第26页
     ·猪传播流感病毒至人类第26-27页
   ·H1N1/2009大流行流感病毒的产生和流行第27-32页
     ·H1N1/2009病毒的流行情况第27页
     ·H1N1/2009病毒的发病机制第27页
     ·H1N1/2009病毒的起源第27-29页
     ·H1N1/2009病毒的特性第29-30页
     ·H1N1/2009病毒的流行动向第30-32页
   ·H1N1/2009病毒分子研究进展第32-34页
     ·表面蛋白第32-33页
     ·聚合酶蛋白第33-34页
     ·非结构蛋白和基质蛋白第34页
   ·本研究的目的和意义第34-35页
第二章 H1N1/2009“前体”病毒在猪体中传代第35-51页
 摘要第35-36页
   ·材料第36-37页
     ·病毒第36页
     ·购买材料及试剂第36页
     ·配制试剂第36-37页
     ·试验动物第37页
     ·细胞第37页
   ·方法第37-41页
     ·病毒的猪体传代试验第37-38页
     ·病毒样本半数组织感染量(TCID_(50))的测定第38-40页
     ·病理切片制作第40页
     ·肺总体和微观病变打分第40-41页
     ·数据统计分析第41页
   ·结果第41-49页
     ·传代病毒感染的猪临床症状观察第41-43页
     ·传代病毒感染的猪肺组织病理学变化第43-46页
     ·传代病毒感染的猪体内病毒的复制第46-49页
   ·讨论第49-50页
   ·小结第50-51页
第三章 第九代病毒样本的遗传变异分析及代表性克隆株的筛选第51-64页
 摘要第51-52页
   ·材料第52页
     ·病毒第52页
     ·购买材料及试剂第52页
     ·配制试剂第52页
     ·细胞第52页
   ·方法第52-57页
     ·病毒RNA提取第52-53页
     ·病毒基因组分段RT-PCR扩增第53-55页
     ·深度测序第55-56页
     ·噬斑纯化第56页
     ·病毒单克隆基因组测序(Sanger测序)第56-57页
   ·结果第57-62页
     ·第九代猪鼻洗液和BALF中病毒RNA基因组扩增第57-58页
     ·第九代病毒准种深度测序分析第58-60页
     ·上、下呼吸道中代表性病毒克隆株的筛选第60-62页
   ·讨论第62-63页
   ·小结第63-64页
第四章 第九代病毒克隆株的体外活性测定第64-79页
 摘要第64-65页
   ·材料第65-67页
     ·病毒第65页
     ·购买材料及试剂第65-66页
     ·仪器第66页
     ·配制试剂第66-67页
     ·细胞第67页
   ·方法第67-72页
     ·体外生长曲线测定第67-68页
     ·Western blot检测NP蛋白表达第68-69页
     ·聚合酶活性测定第69-70页
     ·剂量依赖性ELISA法测定病毒受体结合性第70-71页
     ·NA酶活性测定第71页
     ·数据统计分析第71-72页
   ·结果第72-77页
     ·第九代病毒克隆株体外复制力测定第72-73页
     ·第九代病毒克隆株聚合酶活性测定第73-74页
     ·第九代病毒克隆株受体结合性测定第74-75页
     ·第九代病毒克隆株NA酶活性测定第75-77页
   ·讨论第77-78页
   ·小结第78-79页
第五章 第九代病毒克隆株对猪的致病性及其接触传播性第79-89页
 摘要第79页
   ·材料第79-80页
     ·病毒第79-80页
     ·购买材料及试剂第80页
     ·配制试剂第80页
     ·试验动物第80页
     ·细胞第80页
   ·方法第80-81页
     ·试验设计第80页
     ·样本病毒半数组织感染量(TCID_(50))的测定第80-81页
     ·病理切片制作第81页
     ·肺总体和微观病变打分第81页
     ·数据统计分析第81页
   ·结果第81-87页
     ·攻毒猪和接触猪临床症状观察第81-84页
     ·攻毒猪和接触猪肺病理变化和病毒载量测定第84-85页
     ·攻毒猪和接触猪鼻拭子分毒情况第85-87页
   ·讨论第87-88页
   ·小结第88-89页
第六章 第九代病毒克隆株在豚鼠间的接触传播性及关键氨基酸突变位点的鉴定第89-104页
 摘要第89-90页
   ·材料第90-92页
     ·病毒第90页
     ·购买材料及试剂第90页
     ·配制试剂第90页
     ·转录/表达载体第90-91页
     ·试验动物第91页
     ·细胞第91-92页
   ·方法第92-96页
     ·豚鼠接触传播试验第92页
     ·病毒样本半数组织感染量(TCID_(50))的测定第92页
     ·突变病毒反向遗传操作系统质粒的构建第92-95页
     ·突变病毒的拯救第95-96页
     ·数据统计分析第96页
   ·结果第96-102页
     ·第九代病毒克隆在豚鼠间的接触传播第96-98页
     ·突变病毒的拯救第98-100页
     ·突变病毒感染豚鼠的鼻拭子排毒检测第100-102页
   ·讨论第102-103页
   ·小结第103-104页
第七章 第九代病毒克隆株对雪貂的致病性及其呼吸道飞沫传播性第104-116页
 摘要第104-105页
   ·材料第105页
     ·病毒第105页
     ·购买材料及试剂第105页
     ·配制试剂第105页
     ·试验动物第105页
     ·细胞第105页
   ·方法第105-107页
     ·雪貂试验设计第105-107页
     ·病毒样本半数组织感染量(TCID_(50))的测定第107页
     ·病理切片制作第107页
     ·肺总体和微观组织病理学评价第107页
     ·数据统计分析第107页
   ·结果第107-113页
     ·攻毒组和呼吸道飞沫传播组雪貂的临床症状观察第107-110页
     ·攻毒组和呼吸道飞沫传播组雪貂的肺病理变化第110-111页
     ·攻毒组和呼吸道飞沫传播组雪貂鼻拭子的分毒情况第111-113页
   ·讨论第113-115页
   ·小结第115-116页
结论第116-117页
创新点第117-118页
参考文献第118-134页
致谢第134-136页
作者简介第136页

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